【摘要】：目的 運(yùn)用超聲造影及其量化分析技術(shù)評價睪丸缺血再灌注微血管損傷，探索一種無創(chuàng)、可行的評價睪丸微血管損傷的方法。 方法 制備脂質(zhì)微泡造影劑（MB）并檢測其相關(guān)聲學(xué)特性。 將成年健康大白兔隨機(jī)分成對照組(假手術(shù)組/S組)、微血管缺血損傷組（I組，包括I1、I2、I3組）、微血管復(fù)灌注損傷組（R組，包括R1、R2、R3、R4組），共8組，每組6只。隨機(jī)選擇一側(cè)睪丸，，彩超監(jiān)測下，于睪丸上方2cm處結(jié)扎精索使睪丸血流量完全消失，建立睪丸完全缺血模型，其中I1、I2、I3組分別缺血2h、4h、6h，建立睪丸輕、中、重度微血管缺血損傷模型后，復(fù)灌注2h；R1、R2、R3、R4組缺血4h后分別復(fù)灌注1h、2h、4h、6h，建立睪丸微血管不同程度復(fù)灌注損傷模型。S組暴露精索后穿線但不結(jié)扎。術(shù)前、術(shù)后分別進(jìn)行雙側(cè)睪丸MB超聲造影，運(yùn)用超聲造影量化分析技術(shù)分析各組造影參數(shù)：峰值強(qiáng)度（PI）、達(dá)峰時間（TP）、曲率（Slope）、平均渡越時間（MTT）、峰值減半時間（DT/2）和曲線下面積（Area）的變化。各組造影結(jié)束后，在彩超引導(dǎo)下經(jīng)心臟穿刺取血3ml，實驗室檢測血漿血管性血友病因子（vWF）、一氧化氮（NO）、內(nèi)皮素-1（ET-1）含量。術(shù)后取術(shù)側(cè)睪丸，多點取材，行HE染色及免疫組織化學(xué)染色檢查（基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-9），對比觀察各組病理變化。使用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，所有數(shù)據(jù)均以x±s表示，兩組數(shù)據(jù)間的比較采用兩獨立樣本t檢驗。差異性檢驗水準(zhǔn)設(shè)為P0.05(雙側(cè))。 結(jié)果 脂質(zhì)微泡造影劑為乳白色渾濁液體，光鏡下可見粒徑平均2~4μm，分布均勻的圓形微泡，室溫下保存24h后液體變澄清，鏡下觀察微泡變大、數(shù)量減少。 術(shù)前各實驗組、對照組間術(shù)側(cè)睪丸超聲造影各參數(shù)無顯著差別(p0.05)。達(dá)到不同程度缺血再灌注后，Il組造影參數(shù)PI、Slope顯著升高，TP、MTT明顯延長，Area顯著增大，與S組相比有顯著的差別(p0.05)，造影時間-強(qiáng)度曲線峰值明顯升高、后移。I2組造影參數(shù)PI、Slope進(jìn)一步升高，DT/2顯著延長，TP明顯縮短，Area進(jìn)一步增大，與S組、I1組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)，造影曲線明顯升高、前移且下降緩慢。I3組術(shù)側(cè)睪丸實質(zhì)始終未見顯影，造影曲線近似一條直線。R組造影時間-強(qiáng)度曲線峰值較對照組升高且前移，隨復(fù)灌注時間延長，PI、Slope先增高后降低，TP先降低后增高，MTT、DT/2呈延長趨勢，Area先增大后減小。 術(shù)前各組間血漿vWF、NO、ET-1含量均無統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)。術(shù)后各實驗組血漿vWF、NO、ET-1含量均較S組顯著增高(p0.05)。不同程度缺血組以I2組含量最高(p0.01)，較I1、I3組顯著升高(p0.05)。R組血漿vWF、NO、ET-1含量隨復(fù)灌注時間延長而呈增高趨勢。 睪丸病理檢查結(jié)果：S組睪丸間質(zhì)微血管未見擴(kuò)張，未見明顯的出血、血栓形成；I組隨缺血程度加重，睪丸微血管擴(kuò)張，紅細(xì)胞淤積漏出、炎癥細(xì)胞浸潤逐漸增多，血管基底膜MMP-9表達(dá)逐漸增強(qiáng)，其中I3組微血管破壞嚴(yán)重，管腔內(nèi)大量微血栓形成。R組隨復(fù)灌注時間延長，睪丸微血管內(nèi)紅細(xì)胞淤積、漏出增多，炎癥細(xì)胞粘附、游出、浸潤增多，血管基底膜MMP-9表達(dá)逐漸增強(qiáng)，管腔內(nèi)逐漸有微血栓形成。 結(jié)論 ①采用睪丸不同程度缺血、再灌注方法，可方便、有效的制作睪丸微血管不同程度損傷模型。 ②超聲造影及其量化分析技術(shù)能夠評價睪丸微血管損傷的程度。
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【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R445.1;R697.22

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2283937