本文選題：超順磁性氧化鐵納米顆粒　切入點：骨髓間充質(zhì)干細胞　出處：《南方醫(yī)科大學》2017年碩士論文

【摘要】：一、研究目的探索使用超順磁性氧化鐵納米顆粒標記骨髓間充質(zhì)干細胞的適合濃度,量化體外MRI成像所需的骨髓間充質(zhì)干細胞的最低細胞密度,證明超順磁性氧化鐵納米顆粒對骨髓間充質(zhì)干細胞向成軟骨細胞分化無顯著影響,為后續(xù)更深入的動物實驗等提供一定的實驗依據(jù)和基礎。二、研究方法本實驗采用全骨髓貼壁法體外分離培養(yǎng)獲得原代SD大鼠的自體骨髓間充質(zhì)干細胞,采用超順磁性氧化鐵納米顆粒標記細胞后,觀察標記后的骨髓間充質(zhì)干細胞的細胞增殖、細胞凋亡等生物學行為變化,然后使用磁共振設備進行體外骨髓間充質(zhì)干細胞的成像,觀察和判斷標記效果和成像質(zhì)量等,同時對標記后的干細胞進行體外誘導分化實驗,將其誘導分化為成軟骨細胞,并觀察和判斷誘導分化的效果。三、研究結(jié)果1.超順磁性氧化鐵納米顆粒標記對骨髓間充質(zhì)干細胞增殖能力的影響。通過從SD大鼠脛骨、股骨的骨組織內(nèi)分離并培養(yǎng)獲得了原代的骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSC),并且可以不斷傳代和擴增細胞,同時保持細胞生物學活性和狀態(tài)良好。本文所指超順磁性氧化鐵納米顆粒濃度均為含F(xiàn)e濃度。通過CCK-8法證明了當超順磁性氧化鐵納米顆粒的濃度低于7.5μg/ml時,骨髓間充質(zhì)干細胞的增殖活性沒有受到明顯影響。還通過普魯士藍染色發(fā)現(xiàn)超順磁性氧化鐵納米顆粒的標記率非常高。2.超順磁性氧化鐵納米顆粒標記骨髓間充質(zhì)干細胞體外MR成像。使用3.0T MRI對超順磁性氧化鐵納米顆粒標記的骨髓間充質(zhì)干細胞進行體外成像掃描,成像質(zhì)量高,可以發(fā)現(xiàn)隨著骨髓間充質(zhì)干細胞的細胞密度逐漸增大,在T2WI和T2*WI序列上的細胞信號都逐漸降低。T2WI成像可以發(fā)現(xiàn)的最低細胞密度為25×104/ml,T2*WI成像可以發(fā)現(xiàn)的最低細胞密度為12.5×104/ml,說明T2*WI比T2WI發(fā)現(xiàn)細胞信號改變更為敏感。3.超順磁性氧化鐵納米顆粒標記對骨髓間充質(zhì)干細胞成軟骨分化能力的影響。通過將超順磁性氧化鐵納米顆粒標記的骨髓間充質(zhì)干細胞進行誘導分化為成軟骨細胞的培養(yǎng),并使用阿利新藍染色進行鑒別,發(fā)現(xiàn)了未標記的骨髓間充質(zhì)干細胞和被標記的骨髓間充質(zhì)干細胞都生長、分化狀態(tài)良好,可見到分泌出內(nèi)酸性粘多糖。四、結(jié)論1.濃度為0,2.5,5,7.5μg/ml的超順磁性氧化鐵納米顆粒對骨髓間充質(zhì)干細胞的細胞增殖活性沒有顯著影響,而當濃度為10,12.5 μg/ml時,干細胞的細胞活性受到了較明顯的影響。2.普魯士藍染色表明超順磁性氧化鐵納米顆粒濃度為2.5,5μg/ml時的干細胞標記率低于濃度為7.5,10,12.5 μg/ml時的標記率。3.體外MRI表明當超順磁性氧化鐵納米顆粒的標記濃度為7.5μg/ml時,標記細胞的T2值隨著細胞密度增大而降低,在T2WI成像下可發(fā)現(xiàn)的最低細胞密度為25×104/ml,T2*WI成像可以發(fā)現(xiàn)的最低細胞密度為12.5×104/ml,說明T2*WI比T2WI發(fā)現(xiàn)細胞信號改變更為敏感。4.體外誘導分化實驗表明濃度為7.5μg/ml的超順磁性氧化鐵納米顆粒標記骨髓間充質(zhì)干細胞后仍可以經(jīng)過誘導分化后生長良好并分泌出內(nèi)酸性粘多糖,但需要進一步研究以確定此標記濃度下分化的細胞是否為成軟骨細胞。
[Abstract]:Bone marrow mesenchymal stem cells ( bone marrow mesenchymal stem cells , BMMSC ) were isolated and cultured in vitro .

【學位授予單位】：南方醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R445.2;R68

【參考文獻】

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本文編號：1709167