本文選題：X-Ray　切入點(diǎn)：MCF-10A　出處：《天津醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:放射治療(radiotherapy,RT)是目前乳腺癌輔助治療的重要手段之一,其目的在于利用放射線(xiàn)殺死腫瘤原發(fā)灶或轉(zhuǎn)移灶局部的腫瘤細(xì)胞。保乳術(shù)后或淋巴結(jié)陽(yáng)性患者乳腺癌根治術(shù)后放療不僅可以降低局部復(fù)發(fā)率,還可以減少遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移并改善長(zhǎng)期生存。然而,放療抵抗(radioresistance)現(xiàn)象削弱了RT對(duì)乳腺癌患者的療效;RT作為一種損傷因素是否會(huì)對(duì)腫瘤細(xì)胞的表型或基因組產(chǎn)生作用,從而使其生物功能發(fā)生改變也有待進(jìn)一步研究。同時(shí),RT是否會(huì)刺激正常的表皮細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)閻盒阅[瘤細(xì)胞而引起的繼發(fā)腫瘤尚存在爭(zhēng)議。研究乳腺癌放療抵抗的生物學(xué)機(jī)制并找出相應(yīng)的治療靶點(diǎn)是目前提高放療療效面臨的重要問(wèn)題。在肺癌的治療中,在EGFR突變患者中,酪氨酸激酶抑制劑(TKI)類(lèi)藥物聯(lián)合放療,取得了較好臨床療效。在放療后復(fù)發(fā)的乳腺癌患者,其復(fù)發(fā)是否與EGFR通路有一定的關(guān)系、RT在EGFR通路的改變上扮演了什么樣的角色、在乳腺癌患者中應(yīng)用TKI類(lèi)藥物是否也能夠增加放療的敏感性有待進(jìn)一步研究。方法:1.通過(guò)多次重復(fù)小劑量X-Ray照射,建立永生化乳腺正常上皮細(xì)胞系MCF-10A的放療耐受細(xì)胞系。2.應(yīng)用Nikon倒置顯微鏡(TE2000-U)觀(guān)察照射后細(xì)胞形態(tài)的變化。3.通過(guò)CCK-8增殖試驗(yàn),二維克隆形成試驗(yàn)、EDU細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)研究放療耐受的細(xì)胞系的增殖能力的變化及其應(yīng)用表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、TKI類(lèi)藥物和EGFR磷酸化抑制劑AG1478對(duì)細(xì)胞增殖的影響。4.通過(guò)細(xì)胞劃痕試驗(yàn)、Transwell實(shí)驗(yàn)研究放射耐受的細(xì)胞遷移能力的變化及表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、TKI類(lèi)藥物和EGFR磷酸化抑制劑AG1478對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響。5.通過(guò)細(xì)胞流式試驗(yàn)檢測(cè)放射對(duì)細(xì)胞周期的影響,以及TKI類(lèi)藥物和EGFR磷酸化抑制劑AG1478對(duì)細(xì)胞周期的影響。6.通過(guò)Western Blotting技術(shù)驗(yàn)證放療耐受的細(xì)胞系EGFR的表達(dá)及其下游信號(hào)通路的變化情況。研究結(jié)果:1.建立細(xì)胞株:成功建立耐受10Gy X-Ray的細(xì)胞株MCF-10A-10Gy。2.細(xì)胞形態(tài)的變化:形態(tài)趨向間質(zhì)細(xì)胞樣發(fā)展,MCF-10A-10Gy形態(tài)變細(xì)變長(zhǎng),細(xì)胞偽足增多變長(zhǎng),細(xì)胞核所占細(xì)胞比例增加;細(xì)胞之間的聯(lián)系變少,細(xì)胞與細(xì)胞之間的距離增大且細(xì)胞分布均勻,細(xì)胞不再呈扎堆性生長(zhǎng)。細(xì)胞正常的生長(zhǎng)與增殖不需要EGF的添加。3.細(xì)胞生物學(xué)特性的變化:MCF-10A-10Gy細(xì)胞增殖減慢,遷移能力增強(qiáng),應(yīng)用TKI類(lèi)小分子藥物和EGFR磷酸化抑制劑AG1478處理后,細(xì)胞增殖減慢,遷移能力減弱。4.細(xì)胞周期的變化:照射后,處于G1期的細(xì)胞所占比例增多,應(yīng)用TKI類(lèi)小分子藥物和EGFR磷酸化抑制劑AG1478處理原始細(xì)胞MCF-10A后,處于G1期細(xì)胞所占比例增多。5.EGFR下游通路及E-cad表達(dá)的變化及其關(guān)系:照射后細(xì)胞EGFR下游Akt通路異�；罨�;E-cad表達(dá)下調(diào),且與Akt的活化呈負(fù)相關(guān)。EGF刺激后,原始MCF-10A EGFR下游通路活化,E-cad表達(dá)下調(diào)。研究結(jié)論:1.X-Ray有可能引起永生化乳腺上皮細(xì)胞MCF-10A EGFR-Akt信號(hào)通路的異常活化,其生長(zhǎng)不再依賴(lài)外界EGF的作用;2.照射后,MCF-10A形態(tài)發(fā)生明顯變化,上皮細(xì)胞標(biāo)記物E-cadherin表達(dá)明顯下調(diào),細(xì)胞形態(tài)向間質(zhì)樣細(xì)胞形態(tài)發(fā)展;3.照射后,MCF-10A增殖能力減弱但遷移能力增強(qiáng),并且這一效應(yīng)能夠被EGFR及Akt磷酸化抑制劑所阻斷;4.照射后,細(xì)胞周期明顯阻滯在G1期,G1期所占比例增高,提示細(xì)胞對(duì)照射的敏感性降低。5.在乳腺癌中應(yīng)用EGFR靶向藥物,有可能在放療耐受后EGFR存在自我激活的患者中獲益。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R737.9;R730.55

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 ;鈣粘素E水平低提示乳腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移[J];中國(guó)腫瘤;2000年08期

2 黃嘯原;用“印度閱兵”形容乳腺癌合適嗎?[J];診斷病理學(xué)雜志;2001年02期

3 張嘉慶,王殊,喬新民;乳腺癌的現(xiàn)狀和遠(yuǎn)景[J];中華外科雜志;2002年03期

4 張維彬,汪波,石靈春;中醫(yī)藥在現(xiàn)代乳腺癌治療中的運(yùn)用[J];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合急救雜志;2002年01期

5 薛志勇;食物與乳腺癌[J];山東食品科技;2002年04期

6 王旬果,王建軍,鄭國(guó)華;乳腺癌相關(guān)標(biāo)志物的研究進(jìn)展[J];山東醫(yī)藥;2002年33期

7 陸尚聞;;男人也患乳腺癌[J];環(huán)境;2003年12期

8 ;新技術(shù)清晰拍攝早期乳腺癌細(xì)胞[J];上海生物醫(yī)學(xué)工程;2005年04期

9 田富國(guó);郭向陽(yáng);張華一;;乳腺癌診治研究新進(jìn)展[J];腫瘤研究與臨床;2005年S1期

10 馬濤,谷俊朝;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子與乳腺癌的臨床研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(外科學(xué)分冊(cè));2005年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 于永利;;抗乳腺癌免疫治療融合蛋白[A];中國(guó)免疫學(xué)會(huì)第四屆學(xué)術(shù)大會(huì)會(huì)議議程及論文摘要集[C];2002年

2 郭紅飛;;中醫(yī)治療乳腺癌的策略[A];江西省中醫(yī)、中西醫(yī)結(jié)合腫瘤學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2012年

3 龐朋沙;伍會(huì)健;;乳腺癌治療靶標(biāo)的研究進(jìn)展[A];北方遺傳資源的保護(hù)與利用研討會(huì)論文匯編[C];2010年

4 陸勁松;邵志敏;吳炅;韓企夏;沈鎮(zhèn)宙;;新型維甲酸抑制乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)及誘導(dǎo)凋亡的機(jī)制研究[A];2000全國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2000年

5 劉愛(ài)國(guó);胡冰;;乳腺癌臨床治療進(jìn)展[A];安徽省抗癌協(xié)會(huì)第四次代表大會(huì)暨乳腺癌、肺癌專(zhuān)業(yè)委員會(huì)成立會(huì)議、安徽省腫瘤防治進(jìn)展學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2001年

6 張嘉慶;王殊;喬新民;;乳腺癌的現(xiàn)狀和遠(yuǎn)景[A];第一屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合乳腺疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2002年

7 劉清俊;;乳腺癌綜合治療的新進(jìn)展[A];山西省抗癌協(xié)會(huì)第六屆腫瘤學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2003年

8 邵志敏;;21世紀(jì)乳腺癌治療的展望[A];第三屆中國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)教育論文集[C];2004年

9 陳松旺;張明;;乳腺癌治療的回顧與展望[A];西部地區(qū)腫瘤學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

10 白霞;傅建新;丁凱陽(yáng);王兆鉞;阮長(zhǎng)耿;;組織因子途徑抑制物-2在乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)研究[A];第10屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2005年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 ;血檢有望揭示乳腺癌治療效果[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2004年

2 記者 鄭曉春;乳腺癌細(xì)胞擴(kuò)散基因被找到[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

3 中國(guó)軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤中心主任 宋三泰;乳腺癌有了新療法[N];中國(guó)婦女報(bào);2002年

4 王艷紅;抑制ＤＮＡ修補(bǔ)可消滅乳腺癌細(xì)胞[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2005年

5 詹建;乳腺癌飲食 兩個(gè)時(shí)期不一樣[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2006年

6 辛君;乳腺癌擴(kuò)散基因“浮出水面”[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2009年

7 記者 毛黎;美發(fā)現(xiàn)有效抑制乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的分子[N];科技日?qǐng)?bào);2010年

8 記者 吳春燕　通訊員 王麗霞;乳腺癌治療將有新途徑[N];光明日?qǐng)?bào);2011年

9 王樂(lè)　沈基飛;我科學(xué)家發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致乳腺癌耐藥的新標(biāo)志物[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

10 劉霞;一種天然分子能阻止乳腺癌惡化[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 柴紅燕;疾病狀態(tài)下CYP4Z1和4A的生物學(xué)行為及其藥物干預(yù)研究[D];武漢大學(xué);2012年

2 李凱;ID(inhibitor of DNA binding)家族蛋白調(diào)控乳腺細(xì)胞的分化并影響乳腺癌的預(yù)后[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 江一舟;乳腺癌新輔助化療前后基因變異檢測(cè)及其功能論證[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

4 馬邵;酪氨酸去磷酸化增強(qiáng)表皮生長(zhǎng)因子受體在乳腺癌治療中靶向性的研究[D];山東大學(xué);2015年

5 姚若斯;精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶PRMT7誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞發(fā)生表皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)換及轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制研究[D];東北師范大學(xué);2015年

6 侯培鋒;α-酮戊二酸二甲酯(DM-2KG)上調(diào)缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)誘發(fā)高致瘤性干細(xì)胞樣乳腺癌細(xì)胞機(jī)制研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2014年

7 李麗麗;分泌蛋白SHON調(diào)控乳腺癌細(xì)胞EMT的分子機(jī)制研究[D];東北師范大學(xué);2015年

8 陳麗艷;PI3K抑制劑聯(lián)合組蛋白去乙�；敢种苿⿲�(duì)乳腺癌協(xié)同殺傷作用的分子機(jī)制研究[D];延邊大學(xué);2015年

9 樸俊杰;乳腺癌差異基因篩選及PAIP1對(duì)其生物學(xué)行為的影響[D];延邊大學(xué);2015年

10 汪[?如;染色體6q25.1區(qū)域基因多態(tài)性與乳腺癌遺傳易感性的關(guān)聯(lián)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張薇;X-Ray對(duì)MCF-10A EGFR通路的影響及其機(jī)制的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2017年

2 杜文英;乳腺癌分子亞型的臨床與病理特點(diǎn)[D];鄭州大學(xué);2011年

3 賈曉菲;彩色多普勒超聲與乳腺癌病理及免疫組化指標(biāo)的相關(guān)性研究[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

4 靳文;乳腺癌全基因組DNA甲基化修飾的研究[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

5 吳坤琳;TLR4/MyD88信號(hào)通路對(duì)乳腺癌侵襲性影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

6 葛廣哲;樹(shù)，

本文編號(hào)：1613536