本文關鍵詞：川芎嗪對人食管癌細胞株ECA109體外放射敏感性的影響　出處：《河北醫(yī)科大學》2016年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：目的:研究川芎嗪對食管癌ECA109細胞株的抑制作用及其放療增敏作用,并初步探討其可能的機制,為川芎嗪作為放療增敏劑在臨床上應用提供理論基礎。方法:采用CCK-8實驗檢測不同濃度的川芎嗪和不同劑量放療及二者聯(lián)合對ECA109細胞株的增殖抑制率的影響;倒置顯微鏡下觀察川芎嗪和放療及二者聯(lián)合對ECA109細胞株形態(tài)的影響。流式細胞儀檢測ECA109細胞株的細胞周期變化及早期凋亡率。免疫熒光雙重染色檢測ECA109株細胞的凋亡情況;DNA電泳觀察ECA109細胞株的晚期凋亡情況;western blot檢測Bcl-2和Bax蛋白的表達情況。結果:1 CCK-8結果CCK-8實驗結果顯示川芎嗪和放療單獨應用對ECA109細胞株均有抑制作用,并且在一定范圍內呈劑量依賴性,不同濃度的川芎嗪(0.5mg/ml、1 mg/ml、1.5 mg/ml、2.0 mg/ml、2.5 mg/ml、3.0 mg/ml)作用于ECA109細胞株24h后的抑制率分別為:(9.60±0.95)%、(21.13±3.58)%、、(35.37±3.21)%、(49.68±0.99)%、(55.36±6.36)%、(61.26±5.26)%,在觀察范圍內(0.5-3mg/ml),抑制率隨著川芎嗪濃度的升高而升高(P0.05)。川芎嗪作用于ECA109細胞株24h的IC50值為2.03mg/ml。放射劑量為2、4、6、8Gy對ECA109細胞株的抑制率分別為:(8.97±1.11)%、(15.22±2.36)%、(23.31±5.24)%、(32.15±5.21)%,抑制率隨著放射劑量的升高而升高(P0.05)。川芎嗪聯(lián)合放療對ECA109細胞株的抑制率,最低值川芎嗪0.5mg/ml+2Gy放療抑制率(20.57±4.25)%,最高值川芎嗪3mg/ml+8Gy放療抑制率(88.36±8.69)%,較單一用藥或者單純放療高(P0.05)。2光學顯微鏡觀察結果倒置顯微鏡下可以看到川芎嗪和放療及二者聯(lián)合作用后,ECA109細胞株形態(tài)發(fā)生了不同程度的變化,以聯(lián)合應用組為著。3細胞周期檢測結果流式細胞儀檢測細胞周期結果顯示川芎嗪可以阻滯ECA109細胞株的G0/G1期,放療阻滯ECA109細胞株的G2/M期,聯(lián)合應用后,ECA109細胞株處于G2/M期的細胞與放療組相比顯著增多。4流式細胞儀檢測早期凋亡率結果流式細胞儀檢測凋亡率結果顯示,川芎嗪單獨作用與ECA109細胞株的早期凋亡率為(13.57±1.32)%,放療組ECA109細胞株早期凋亡率為9.14±2.01)%,川芎嗪和放療聯(lián)合應用組早期凋亡率為(22.31±2.14)%,均顯著高于對照組(1.77±0.15)%(P0.01)。5瓊脂糖凝膠電泳結果瓊脂糖凝膠電泳結果顯示,川芎嗪組和聯(lián)合作用組出現(xiàn)了明顯的梯狀條帶,對照組和放療組沒有出現(xiàn)梯狀條帶。6 Western blot結果WB結果顯示,川芎嗪組Bcl-2蛋白表達下降,Bax蛋白表達量明顯上升。放療單獨應用對Bcl-2和Bax蛋白表達無明顯影響,放療聯(lián)合川芎嗪組的Bcl-2蛋白表達明顯下降,而Bax蛋白表達明顯升高。結論:1川芎嗪和放療對ECA109細胞株具有抑制作用,并且在一定范圍內呈現(xiàn)劑量依賴性,放療和川芎嗪聯(lián)合應用對ECA109細胞株的抑制作用強于二者單用。2川芎嗪和放療對ECA109細胞株的抑制作用與誘導ECA109細胞株凋亡有關。3川芎嗪對ECA109細胞株具有放療增敏作用。4川芎嗪對ECA109細胞株的放療增敏作用可能與改變細胞周期、誘導細胞凋亡,下調Bcl-2與Bax蛋白比值有關。
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R735.1;R730.55

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本文編號：1333071