發(fā)布時(shí)間：2017-11-13 05:00

  本文關(guān)鍵詞：一種基于整合素ανβ3為靶點(diǎn)的微泡造影劑的制備及體內(nèi)外效能評(píng)價(jià)

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【摘要】：196 8年,Gr a mi a k首次采用超聲心動(dòng)圖檢查心臟內(nèi)注射吲哚青藍(lán)染料,并提出超聲微泡造影劑的應(yīng)用。國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者進(jìn)一步對(duì)超聲微泡造影劑的應(yīng)用展開(kāi)深入研究。當(dāng)前,靶向超聲微泡造影劑是超聲研究和其它醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。越來(lái)越多的研究人員發(fā)現(xiàn),靶向微泡造影劑能夠從分子水平上識(shí)別、特異性靶向病變組織,在病變組織部位的靶向位點(diǎn)產(chǎn)生特異性超聲顯影,從而明顯提高對(duì)早期疾病病變的超聲診斷能力。鑒于腫瘤新生血管內(nèi)皮細(xì)胞高表達(dá)整合素ανβ3受體,高表達(dá)的整合素ανβ3受體是一種具有潛在臨床應(yīng)用價(jià)值的腫瘤靶向受體。因此,通過(guò)制備一種以整合素ανβ3為靶點(diǎn)的超聲微泡造影劑,可以直接實(shí)現(xiàn)腫瘤新生血管的增強(qiáng)顯影。本課題擬通過(guò)共價(jià)連接的方法將iR G D肽中的巰基和磷脂材料D SP E-PE G 2 0 0 0 Ma le i m i d e s上的馬來(lái)酰亞胺基團(tuán)共價(jià)連接,制備一種基于整合素ανβ3受體的靶向超聲微泡造影劑。體外觀察其與小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞(bE e nd.3)的黏附能力,并進(jìn)一步在小鼠乳腺癌4T1模型上觀察其對(duì)腫瘤新生血管內(nèi)皮特異性增強(qiáng)超聲分子顯影和靶向效應(yīng),有望作為超聲分子探針檢測(cè)評(píng)價(jià)整合素ανβ3在腫瘤血管新生中表達(dá),為腫瘤早期診斷和治療尋找新的靶點(diǎn)。1.通過(guò)制備一種新的靶向腫瘤新生血管整合素ανβ3受體的超聲微泡造影劑,應(yīng)用粒徑分析儀、光學(xué)顯微鏡及超聲成像儀進(jìn)行表征或檢測(cè)。通過(guò)“巰基-馬來(lái)酰亞胺”化學(xué)偶聯(lián)法將iR G D偶聯(lián)到磷脂材料D SP E-PE G 2 0 0 0Ma le i m i d e上,MS對(duì)其合成產(chǎn)物D SP E-PE G 2 0 0 0-iR G D進(jìn)行鑒定。通過(guò)G-25 0蛋白含量測(cè)定方法,檢測(cè)微泡表面iR G D肽含量及分子數(shù)。結(jié)果顯示:D S P E-PE G 2 0 00-iR G D與iR G D靶向微泡造影劑上鑒定出含有iR G D肽。iR G D靶向超聲微泡造影劑(iR G D-MB s)在平均粒徑、粒徑大小分布、濃度、體外超聲造影以及光學(xué)形態(tài)上與普通超聲微泡造影劑(C ont r o l MB s)基本相似。當(dāng)D S P C,D SP E-PE G 2 0 0 0,D S P E-P EG-iR G D摩爾比9:0.5:0.5時(shí),一定量的微泡表面iR G D肽含量最高,符合理想造影劑的要求。2.通過(guò)探討iR G D-M B s體外特異性靶向血管內(nèi)皮細(xì)胞的黏附效果和能力。體外靜態(tài)黏附實(shí)驗(yàn)顯示,iR G D-M B s可以較多并牢固地結(jié)合與bE nd.3細(xì)胞表面;加入抗整合素ανβ3受體的單克隆抗體封閉后,該結(jié)合可以被競(jìng)爭(zhēng)性阻斷。加入C ont r o l MB s未觀察到與bEnd.3細(xì)胞結(jié)合。平行板流動(dòng)腔體外結(jié)果顯示,在血流剪切力1 dyne/c m 2條件下,iR G D-M B s可與培養(yǎng)皿上的bE nd.3細(xì)胞靶向結(jié)合,而抗體封閉組及C ont r o l MB s對(duì)照組均未見(jiàn)明顯微泡結(jié)合。3.通過(guò)探討制備出的靶向血管內(nèi)皮整合素ανβ3受體的超聲微泡造影劑結(jié)合超聲分子成像技術(shù)在體內(nèi)實(shí)時(shí)、無(wú)創(chuàng)性評(píng)估小鼠4T1腫瘤新生血管的超聲分子成像情況。結(jié)果顯示:在iR G D-M B s造影組中,腫瘤組織的V I值與C ont r o l MB s造影組腫瘤組織的V I值相比較(10.70±2.7 5、1.13±0.18,P0.0 5),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.0 5)。iR G D-M B s超聲視頻信號(hào)強(qiáng)度值約為C ont r o l MB s組的10倍。H E切片染色顯示,腫瘤組織形態(tài)較好,可見(jiàn)紅細(xì)胞分布于腫瘤血管內(nèi)。腫瘤組織免疫熒光顯示,4T 1腫瘤新生血管內(nèi)皮細(xì)胞C D 31和整合素ανβ3受體陽(yáng)性表達(dá),C D 31紅色著色,整合素ανβ3受體綠色著色。iR G D-M B s組較C ont r o l MB s組有明顯的靶向腫瘤新生血管,有望成為一種理想的腫瘤新生血管內(nèi)超聲分子探針,實(shí)現(xiàn)腫瘤新生血管的超聲分子成像,用于腫瘤的早期診斷及療效評(píng)估。
【學(xué)位授予單位】：西南科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R445.1;R730

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

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本文編號(hào)：1179169