本文關(guān)鍵詞：高機(jī)械指數(shù)診斷超聲聯(lián)合超聲造影劑增效微波消融腫瘤實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：第一部分氟碳超聲造影劑的制備及性質(zhì)檢測(cè)目的選用磷脂混合物為殼材,全氟丙烷氣體為內(nèi)核,制備超聲造影劑(Ultrasound Contrast Agent,UCA),檢測(cè)其基本理化性質(zhì)和評(píng)價(jià)其生物安全性能。方法采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)-機(jī)械振蕩法制備氟碳超聲造影劑,并檢測(cè)其基本理化性質(zhì),包括形態(tài)、大小、電位、濃度和穩(wěn)定性等。常規(guī)培養(yǎng)人類肝癌細(xì)胞株SMMC7721,進(jìn)行細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn),觀察UCA對(duì)腫瘤細(xì)胞的生物活性影響。結(jié)果制備的UCA形態(tài)呈球狀、規(guī)則,大小均一,充氣性好,分散度較好,未見明顯粘連、聚集現(xiàn)象。平均粒徑1.18±0.33μm,電位0.08±7.45m V,濃度(2.31±0.24)×108 m L-1。經(jīng)CCK8細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn),不同濃度的UCA與細(xì)胞共同孵育,細(xì)胞活性不受影響,證明UCA具有良好的生物相容性。結(jié)論通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)-機(jī)械振蕩法成功制備脂質(zhì)包裹的氟碳超聲造影劑懸液。該微泡超聲造影劑性質(zhì)穩(wěn)定、生物相容性良好,為后續(xù)的離體、在體增效實(shí)驗(yàn)奠定了基礎(chǔ)。第二部分高M(jìn)I診斷超聲聯(lián)合UCA擴(kuò)大MWA治療范圍實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^(guò)體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究高機(jī)械指數(shù)(Mechanical index,MI)診斷超聲聯(lián)合UCA擴(kuò)大微波消融(Microwave Ablation,MWA)治療離體牛肝和在體兔肝效果的可行性,初步探討其增效機(jī)制。方法實(shí)驗(yàn)共分五個(gè)治療組:I,直接開始MWA治療(MWA組);II,注射1 m L UCA懸液(濃度0.5 mg/m L)后開始MWA治療(MWA+UCA組);III,在超聲FLASH條件作用下開始MWA治療(MWA+US組);IV,注射1 m L UCA懸液(濃度0.5 mg/m L)后,超聲FLASH條件作用下開始MWA治療(MWA+UCA+US組);V,注射1m L PBS液后,超聲FLASH條件作用下開始MWA治療(MWA+PBS+US組)。術(shù)中采集并比較各組消融開始后同一時(shí)間點(diǎn)(離體牛肝實(shí)驗(yàn)采用1 min;在體兔肝實(shí)驗(yàn)采用30 s)的普通/造影模式聲圖像,并記錄溫度測(cè)試儀上顯示的實(shí)時(shí)溫度。術(shù)后拔出微波天線,沿針道所示最大切面縱行切開,觀察肝組織壞死形態(tài)、測(cè)量壞死體積并比較。在體兔肝消融實(shí)驗(yàn)中,術(shù)后切取距微波輻射源0.5 cm處的肝組織置于4%多聚甲醛固定液中,行HE染色、NADH特殊染色和TEM檢查。觀察高M(jìn)I超聲聯(lián)合UCA擴(kuò)大MWA治療范圍的效果。結(jié)果相同治療參數(shù)下,各治療組在壞死范圍、溫度值、造影模式灰度變化上:MWA+US組大于MWA組、MWA+UCA組(P0.05),后兩組之間比較差異不顯著(P0.05)。MWA+UCA+US組大于MWA+US組、MWA+US+PBS組(P0.05),后兩組之間比較差異不顯著(P0.05)。體內(nèi)消融兔肝實(shí)驗(yàn)中,各治療組間病理超微結(jié)構(gòu)變化上:MWA+UCA+US組細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)完全消失,電鏡下僅留細(xì)胞碎片影;MWA組、MWA+UCA組細(xì)胞結(jié)構(gòu)形態(tài)完整、未見明顯壞死;MWA+US組、MWA+US+PBS組細(xì)胞損傷程度介于二者之間,部分細(xì)胞呈可逆性變性。結(jié)論高M(jìn)I超聲聯(lián)合UCA能夠提高消融區(qū)域溫度、擴(kuò)大MWA治療范圍、增強(qiáng)MWA的治療效果。其潛在的機(jī)制主要與高M(jìn)I超聲爆破UCA產(chǎn)生空化效應(yīng)、改變局部微環(huán)境、增加能量沉積有關(guān)。第三部分高M(jìn)I診斷超聲聯(lián)合UCA促進(jìn)MWA術(shù)后抑制殘存腫瘤的實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^(guò)建立VX2荷瘤兔肝腫瘤模型,探討高M(jìn)I診斷超聲聯(lián)合UCA對(duì)MWA術(shù)后抑制殘存腫瘤增生和促進(jìn)凋亡的作用并進(jìn)一步作安全性評(píng)估,觀察這種增效作用對(duì)荷瘤兔預(yù)后的長(zhǎng)期影響。方法建立VX2荷瘤兔肝腫瘤模型,采用前述分組方法進(jìn)行MWA治療,消融參數(shù)20 W,1 min。術(shù)后切取距微波輻射源0.5 cm處腫瘤組織行HE染色、NADH特殊染色和TEM檢查。并于消融后第1天、第3天、第7天切取消融區(qū)外圍腫瘤組織置于4%多聚甲醛固定液中行免疫組化TUNEL、PCNA染色,分別檢測(cè)各組殘存腫瘤細(xì)胞凋亡和增殖表達(dá)情況。另取40只荷瘤兔(每組8只),于術(shù)后超聲動(dòng)態(tài)觀察腫瘤生長(zhǎng)情況并計(jì)算腫瘤體積。于術(shù)前1天、術(shù)后第9天經(jīng)耳緣靜脈抽血行血生化檢查。連續(xù)稱量各組荷瘤兔圍手術(shù)期體重變化,每隔3天稱量一次,從手術(shù)當(dāng)天開始,至術(shù)后第9天結(jié)束。對(duì)各組荷瘤兔于術(shù)后第10天、第20天、第30天、第40天稱量體重并作分析比較。對(duì)所有荷瘤兔飼養(yǎng)、觀察至自然死亡,記錄生存時(shí)間。結(jié)果各組HE、NADH以及TEM病理超微結(jié)構(gòu)檢查結(jié)果同在體消融兔肝實(shí)驗(yàn)。免疫組化結(jié)果顯示:術(shù)后第1天,各組凋亡指數(shù)(AI)、增殖指數(shù)(PI)分別均約10%、70%,進(jìn)行組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);術(shù)后第3天,各組AI普遍增高、PI普遍降低,但MWA+US+UCA組AI最高、PI最低,與其他四組比較,差異顯著(P0.05)。第7天,MWA組與MWA+UCA組AI、PI與第3天比較無(wú)顯著差異(P0.05),但其余三組差異顯著(P0.05)。其中,以MWA+US+UCA組AI最高、PI最低,與其它四組比較,差異顯著(P0.05)。術(shù)后各組腫瘤體積比較:MWA+US組小于MWA組、MWA+UCA組(P0.05),后兩組比較差異不顯著(P0.05)。而MWA+UCA+US組小于MWA+US組、MWA+US+PBS組(P0.05),后兩組之間比較差異不顯著(P0.05)。術(shù)前1天與術(shù)后第9天的血生化各項(xiàng)指標(biāo)比較無(wú)明顯差異(P0.05)。各組圍手術(shù)期體重比較差異不顯著(P0.05)。各組圍手術(shù)期以外體重比較:MWA組和MWA+UCA組體重小于MWA+US組和MWA+US+PBS組(P0.05),前后兩組間比較差異不顯著(P0.05),而MWA+US+UCA組體重大于其他各組,差異顯著(P0.05)。比較各組荷瘤兔術(shù)后生存時(shí)間,MWA+US+UCA組長(zhǎng)于與其他各組,差異顯著(P0.05)。結(jié)論高M(jìn)I診斷超聲聯(lián)合UCA可以促進(jìn)MWA術(shù)后腫瘤細(xì)胞的凋亡、抑制腫瘤增長(zhǎng)。在中長(zhǎng)期隨訪中發(fā)現(xiàn)這種聯(lián)合治療方式是安全可靠的,并能延緩病程進(jìn)展,改善預(yù)后,具有潛在的臨床應(yīng)用價(jià)值。
【關(guān)鍵詞】：脂質(zhì) 造影劑 全氟丙烷 超聲 微波消融 超聲 造影劑 高機(jī)械指數(shù) 微波消融 增效 預(yù)后 造影劑
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R445.1
【目錄】：

• 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照5-7
• 摘要7-12
• ABSTRACT12-19
• 前言19-26
• 參考文獻(xiàn)21-26
• 第一部分 氟碳超聲造影劑的制備及性質(zhì)檢測(cè)26-38
• 1 材料26-27
• 2 方法27-29
• 3 結(jié)果29-31
• 4 討論31-33
• 參考文獻(xiàn)33-37
• 附圖37-38
• 第二部分 高M(jìn)I診斷超聲聯(lián)合UCA擴(kuò)大MWA治療范圍實(shí)驗(yàn)38-75
• 第一節(jié) 離體牛肝實(shí)驗(yàn)38-56
• 1 材料39-40
• 2 方法40-42
• 3 結(jié)果42-47
• 4 討論47-50
• 參考文獻(xiàn)50-52
• 附圖52-56
• 第二節(jié) 在體兔肝實(shí)驗(yàn)56-75
• 1 材料56-57
• 2 方法57-61
• 3 結(jié)果61-65
• 4 討論65-66
• 參考文獻(xiàn)66-68
• 附圖68-75
• 第三部分 高M(jìn)I診斷超聲聯(lián)合UCA促進(jìn)MWA術(shù)后抑制殘存腫瘤實(shí)驗(yàn)75-119
• 第一節(jié) 高M(jìn)I診斷超聲聯(lián)合UCA增效MWA治療兔肝VX2移植瘤實(shí)驗(yàn)76-99
• 1 材料76-77
• 2 方法77-81
• 3 結(jié)果81-84
• 4 討論84-86
• 參考文獻(xiàn)86-89
• 附圖89-99
• 第二節(jié) 術(shù)后長(zhǎng)期隨訪和生存分析99-119
• 1 材料99-100
• 2 方法100-101
• 3 結(jié)果101-107
• 4 討論107-109
• 參考文獻(xiàn)109-110
• 附圖110-119
• 全文總結(jié)119-122
• 文獻(xiàn)綜述 一122-135
• 參考文獻(xiàn)128-135
• 文獻(xiàn)綜述 二135-150
• 參考文獻(xiàn)143-150
• 致謝150-151
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文、參研項(xiàng)目、會(huì)議交流情況151-152

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3 左松,劉政;新型超聲造影劑和成像方法在肝臟疾病中的應(yīng)用[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù);2002年01期

4 馬忠武,周美樹,朱小敏,黃蘭芬,張國(guó)強(qiáng),何淑群;胃超聲造影劑的臨床應(yīng)用研究[J];武警醫(yī)學(xué);2003年02期

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7 高云華,譚開彬;超聲造影劑介導(dǎo)靶向治療的研究進(jìn)展[J];中華超聲影像學(xué)雜志;2004年12期

8 錢夢(mèng)，

本文編號(hào)：1064386