本文關鍵詞：EPO對宮內(nèi)感染腦白質損傷新生大鼠腦組織MBP、CD68表達的影響及神經(jīng)行為學觀察

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【摘要】：目的探討重組人促紅細胞生成素(reccmbinant human erythropoietin,rhEPO)對宮內(nèi)感染導致的腦白質損傷(white matter damage,WMD)新生大鼠的神經(jīng)保護作用。 方法25只受孕Wistar大鼠,按4：1隨機分為感染組(n=20)、非感染組(n=5)。孕15天感染組腹腔注射脂多糖300ug/Kg一次,建立宮內(nèi)感染動物模型；非感染組腹腔注射等量生理鹽水。觀察兩組大鼠早產(chǎn)率、平均每胎活產(chǎn)數(shù)及仔鼠出生體重。孕鼠分娩后取胎盤組織行病理檢查。感染組中早產(chǎn)鼠及足月仔鼠分別生后即刻隨機取6只灌注取腦行HE染色,去除其它早產(chǎn)鼠后將剩余仔鼠隨機分為EPO組(n=49,生后即刻腹腔注射5000IU/Kg rhEPO)和感染對照組(n=49,生后即刻腹腔注射等量生理鹽水)；非感染組均為足月分娩,取新生鼠49只作為正常對照組(n=49,生后即刻腹腔注射等量生理鹽水)。每組分別于生后1、3、7天各組隨機選取10只灌注取腦,石蠟包埋,切片后行髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)、CD68免疫熒光染色,生后30天利用曠場試驗、懸吊試驗、斜坡試驗及拒俘試驗進行神經(jīng)行為學檢測。 結果1、一般情況：感染組有3只孕鼠提前分娩(孕22天前分娩,共產(chǎn)19只仔鼠),早產(chǎn)分娩率為15%；共獲得114只足月仔鼠,隨后有10只死亡,存活率為91.22%。感染組平均每胎活產(chǎn)數(shù)及仔鼠出生體重較非感染組均明顯下降,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 2、胎盤病理檢測：感染組孕鼠胎盤病理檢測可見胎盤內(nèi)血管明顯充血、水腫,并有大量中性粒細胞浸潤。 3、腦HE染色：早產(chǎn)鼠腦白質結構疏松化明顯,可見神經(jīng)元呈核小、體積小及少突起的欠分化形態(tài)；感染組足月鼠腦白質出現(xiàn)染色淡、結構疏松化改變；神經(jīng)纖維粗細不均、走向紊亂；非感染組仔鼠腦組織結構清晰。 4、MBP免疫熒光染色：感染對照組、EPO組及正常對照組新生1、3日齡大鼠腦組織未見明顯MBP染色,7日齡感染對照組、EPO組與正常對照組比較,MBP表達水平明顯下降,各組間差異均具有統(tǒng)計學意義(P0.05)；EPO組較感染對照組MBP表達水平明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 5、CD68免疫熒光染色：各組新生1日齡大鼠腦組織未見明顯CD68染色,3、7日齡感染對照組、EPO組與正常對照組比較,CD68表達水平明顯升高,各組間差異均具有統(tǒng)計學意義(P0.05)；EPO組較感染對照組CD68表達水平顯著下降,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 6、神經(jīng)行為學檢測：感染對照組、EPO組較正常對照組,各項神經(jīng)行為學檢測得分顯著降低,各組間差異均具有統(tǒng)計學意義(P0.05)；EPO組各項神經(jīng)行為學評分顯著高于感染對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論1、宮內(nèi)感染可導致孕鼠早產(chǎn)、仔鼠低出生體重及仔鼠低存活率。 2、腹腔注射LPS后可出現(xiàn)宮內(nèi)感染相應的胎盤病理改變,成功建立孕鼠宮內(nèi)感染模型。 3、宮內(nèi)感染可導致新生大鼠腦白質損傷。 4、新生大鼠腦白質損傷主要表現(xiàn)為少突膠質細胞受損、髓鞘化障礙及小膠質細胞過度活化。 5、EPO可減輕宮內(nèi)感染新生大鼠腦內(nèi)少突膠質細胞損傷、髓鞘化障礙,有效抑制小膠質細胞活化,從而減輕腦白質損傷,并可改善神經(jīng)行為學預后。
【關鍵詞】：促紅細胞生成素 新生 大鼠 宮內(nèi)感染 腦白質損傷 MBP CD68
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R722.1
【目錄】：

• 摘要2-4
• Abstract4-7
• 引言7-9
• 第一章 材料與方法9-14
• 1.1 材料9-10
• 1.1.1 實驗動物9
• 1.1.2 實驗藥品和試劑9-10
• 1.1.3 主要實驗儀器及設備10
• 1.2 方法10-14
• 1.2.1 動物實驗的分組與處理10-11
• 1.2.2 標本采集11
• 1.2.3 制備腦、胎盤組織切片11-12
• 1.2.4 HE切片制作12
• 1.2.5 免疫熒光染色12
• 1.2.6 神經(jīng)行為學觀察12-14
• 第二章 數(shù)據(jù)采集與處理14-15
• 第三章 結果15-18
• 3.1 一般情況15
• 3.2 胎盤和腦組織HE染色結果15
• 3.3 MBP、CD68免疫組織化學染色結果15-17
• 3.4 神經(jīng)行為學檢測結果17-18
• 第四章 討論18-23
• 第五章 結論23-24
• 附圖表24-26
• 參考文獻26-29
• 綜述29-41
• 參考文獻36-41
• 攻讀學位期間的研究成果41-42
• 致謝42-43

【參考文獻】

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本文編號：686308