持續(xù)驚厥后幼年大鼠海馬突觸可塑性及BDNF表達(dá)變化的研究
本文關(guān)鍵詞:持續(xù)驚厥后幼年大鼠海馬突觸可塑性及BDNF表達(dá)變化的研究
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【摘要】:目的:研究幼年期大鼠長(zhǎng)時(shí)程驚厥(status convulsion,SC)后海馬突觸可塑性:突觸超微結(jié)構(gòu)和長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)(long-term potentiation,LTP)變化,檢測(cè)海馬腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophicfactor,BDNF)表達(dá)變化,探討B(tài)DNF與突觸可塑性之間的可能關(guān)系。 方法:選擇無特定病原體級(jí)(specific pathogen,SPF)生后21d雄性Wistar鼠,隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組,每組80只。腹腔注射氯化鋰-匹羅卡品制造SC模型;以腹腔注射生理鹽水為對(duì)照組。電鏡觀察造模后1、7、14、21d這4個(gè)時(shí)間點(diǎn)的突觸超微結(jié)構(gòu)變化,比較突觸間隙、突觸后致密物(postsynaptic density,PSD)厚度、突觸活性區(qū)(synaptic active zone,SAZ)長(zhǎng)度;膜片鉗技術(shù)檢測(cè)這4個(gè)時(shí)間點(diǎn)的大鼠海馬場(chǎng)興奮性突觸后電位(field excitatory postsynapticpotentials,fEPSP)斜率與波幅的變化,比較LTP的變化。造模后12h、1d、3、7、14、21d免疫組織化學(xué)方法觀察海馬區(qū)BDNF表達(dá)的定位情況,western blot方法鑒定其表達(dá)情況。 結(jié)果:(1)電鏡觀察海馬突觸超微結(jié)構(gòu)變化:SC后4個(gè)時(shí)間點(diǎn),實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組突觸間隙無明顯變化(P>0.05);SC后7、14d,實(shí)驗(yàn)組PSD平均厚度比對(duì)照組薄、SAZ平均長(zhǎng)度比對(duì)照組短(P<0.05)。(2)SC后7d,實(shí)驗(yàn)組fEPSP斜率為162.30%±28.50%,顯著高于對(duì)照組的124.01%±26.46%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);SC后14d實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組fEPSP斜率分別為83.06%±8.32%和121.64%±23.12%,波幅分別為100.54%±16.03%和135.65%±35.85%,實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組斜率及波幅明顯降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。(3)免疫組織化學(xué)檢查BDNF表達(dá),蘇木素染核發(fā)現(xiàn)SC后12h、1d、3、7d CA1區(qū)和CA3區(qū)錐體細(xì)胞皺縮,排列紊亂無序。SC后大鼠海馬CA1,CA3區(qū)BDNF陽性著色均有不同程度的增強(qiáng),實(shí)驗(yàn)組在SC后12h,1d,3d,7d較正常組有增多趨勢(shì),14d及21d組無明顯差別。(4)western blot測(cè)定BDNF表達(dá)情況,SC后12h、1d、3d、7d分別為:1.08±0.10、1.39±0.08、0.85±0.04、0.53±0.06,對(duì)照組分別為:0.39±0.16、0.37±0.03、0.39±0.02、0.37±0.04,實(shí)驗(yàn)組BDNF表達(dá)比對(duì)照組顯著增高(P<0.05)。 結(jié)論:(1)SC后潛伏期,,突觸超微結(jié)構(gòu)發(fā)生變化:實(shí)驗(yàn)組PSD厚度及SAZ長(zhǎng)度均較對(duì)照組小,可能影響突觸傳遞信息功能。(2)幼年大鼠SC后fEPSP斜率在SC后7d較正常組增高;在SC后14dfEPSP斜率及波幅較正常組和其它實(shí)驗(yàn)組明顯降低。提示SC后潛伏期早期階段LTP增高,突觸傳遞效能增強(qiáng);潛伏期后期LTP降低,突觸傳遞效能減弱。(3)經(jīng)免疫組化和western blot方法檢測(cè),提示BDNF表達(dá)受SC刺激影響,在SC后7d內(nèi)呈先增高后降低至正常的動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)。(4) BDNF與突觸可塑性關(guān)系密切。
【關(guān)鍵詞】:幼年大鼠 長(zhǎng)時(shí)程驚厥 長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng) 突觸可塑性 腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R720.597
【目錄】:
- 英漢縮略語名詞對(duì)照5-6
- 摘要6-9
- ABSTRACT9-12
- 前言12-14
- 材料與方法14-24
- 結(jié)果24-32
- 討論32-37
- 小結(jié)37-38
- 全文總結(jié)38-39
- 參考文獻(xiàn)39-42
- 文獻(xiàn)綜述42-53
- 參考文獻(xiàn)48-53
- 致謝53-54
- 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文及參加的學(xué)術(shù)活動(dòng)54-55
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
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本文編號(hào):579507
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