本文關(guān)鍵詞：豬瘟疫苗毒株和流行毒株RT-nPCR檢測方法的建立

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【摘要】：為給臨床快速鑒別診斷豬瘟提供技術(shù)依據(jù),根據(jù)GenBank公布的CSFV全基因序列,結(jié)合豬瘟序列測定結(jié)果,針對NS5B基因區(qū)域設計2條通用外擴引物、2條通用內(nèi)擴引物和1條疫苗毒株特異性內(nèi)擴引物,建立一種可鑒別豬瘟疫苗毒株和流行毒株的RT-nPCR診斷方法。結(jié)果顯示,該方法可從HCLV株擴增出2條大小分別為261bp和157bp的片段,可從Shimen、SXYL2006、GX54和SD2002等流行毒株擴增出1條261bp的片段,其他幾種常見豬病毒檢測均呈陰性;靈敏度試驗表明,檢測的cDNA質(zhì)量濃度極限為3.4×10-7 pg/L;116份臨床樣品中有37份樣品檢測呈陽性,陽性率為32%;分析部分陽性病料E2基因序列也證實檢測結(jié)果的準確性。說明:建立的RT-nPCR鑒別診斷方法靈敏度高、特異性好,能直觀區(qū)分豬瘟疫苗毒株和流行毒株。
【作者單位】： 咸陽職業(yè)技術(shù)學院畜牧獸醫(yī)研究所動物疫病分子生物學診斷實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 豬瘟 反轉(zhuǎn)錄-復合套式聚合酶鏈式反應 鑒別診斷
【基金】：陜西省科學技術(shù)研究發(fā)展計劃(2014K02-06-03) 咸陽市科學技術(shù)研究計劃(2014K02-21)~~
【分類號】：S852.651
【正文快照】： 豬瘟(Classical swine fever,CSF)是一種高度接觸性傳染病,其病原為豬瘟病毒(Classicalswine fever virus,CSFV),豬和野豬是其唯一宿主[1]。關(guān)于CSF的報道最早可追溯至19世紀早期,該病一直是嚴重危害養(yǎng)豬業(yè)的烈性傳染病,中國農(nóng)業(yè)部將其列為一類動物疫病。CSFV屬黃病毒科,瘟病

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本文編號：871045