本文關鍵詞：添加劑對不同含水量多花黑麥草青貯發(fā)酵品質及微生物種群的影響

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【摘要】：本研究以中國南方地區(qū)優(yōu)質牧草多花黑麥草(Lolium multiflorum Lam.)為試驗材料,評價其在不同含水量(75%和65%)條件下添加不同添加劑(甲酸、植物乳桿菌(Lactobacillus plantment) 、布氏乳桿菌(Lactobacillus buchneri))調制的青貯飼料的發(fā)酵品質；并在經過60天常規(guī)發(fā)酵后,各處理組在有氧條件下放置3天和7天后檢測其有氧穩(wěn)定性,探究在不同處理條件下多花黑麥草二次發(fā)酵情況。同時,利用PCR-DGGE技術檢測青貯60天和有氧變敗7天微生物種群多樣性,反映多花黑麥草青貯中有益菌存在狀況并確立優(yōu)勢菌株。試驗結果如下：1.不同類型添加劑對發(fā)酵品質影響顯著,甲酸處理組能在青貯初期快速降低青貯料pH值,抑制了微生物的活動,基本保存了青貯料原有的營養(yǎng)品質；植物乳桿菌在青貯初期pH值降低到4以下,乳酸含量顯著高于其他處理組(P0.05),但在發(fā)酵中后期變化幅度較小,青貯效果較優(yōu)；布氏乳桿菌添加組在60天青貯過程中,pH值一直高于甲酸和植物乳桿菌處理組,水溶性碳水化合物(WSC)下降和氨態(tài)氮／總氮(NH3-N/TN)上升幅度較大,特別是在青貯中后期(21-60d)變化幅度大于前期(0-21d),青貯效果雖優(yōu)于對照組,但比甲酸和植物乳桿菌處理組差。含水量(75%和65%)對多花黑麥草青貯發(fā)酵品質的動態(tài)影響不顯著(P0.05),本試驗中設置的兩個水分含量75%和65%均無滲出液,在不添加任何添加劑的情況下(對照組),依然能制成較優(yōu)良的青貯料。2.在多花黑麥草青貯有氧變敗時期,不同添加劑對其有氧穩(wěn)定的影響差異顯著(P0.05)。有氧變敗3天時,甲酸和布氏乳桿菌處理組pH值上升幅度小于植物乳桿菌和對照組,到有氧變敗7天時,只有布氏乳桿菌添加組pH值仍然保持在5以下,且就有氧穩(wěn)定性也遠高于其他處理組(超過150h)。綜上所述,就多花黑麥草青貯有氧穩(wěn)定性而言,布氏乳桿菌甲酸對照植物乳桿菌。3. DGGE結果表明,布氏乳桿菌(Lactobacillus buchneri)在多花黑麥草青貯后期以及有氧穩(wěn)定性中發(fā)揮著重要的作用。在青貯60天時,DGGE結果表明各處理菌群處于較穩(wěn)定狀態(tài),布氏乳桿菌占據了發(fā)酵主導地位,但在個別處理組中檢測到了芽孢桿菌(Bacillus)的存在；在有氧變敗7天時,各處理中均檢測到了好氧的腸桿菌(Enterobacter)的存在,但在布氏乳桿菌處理組中布氏乳桿菌仍為優(yōu)勢種群。綜上所述,本試驗中,多花黑麥草含水量在75%和65%時均能制成較優(yōu)質的青貯料,考慮到晾曬時間過長會使牧草營養(yǎng)成分流失較多以及過低水分不利于壓實等問題,將多花黑麥草水分控制在75%左右較適宜。同時,綜合我國南方地區(qū)氣候條件以及結合實際生產,在含水量75%條件下,添加甲酸或者布氏乳桿菌對于生產優(yōu)質多花黑麥草青貯料以及防止青貯料二次發(fā)酵是可行且有效的。
【關鍵詞】：不同處理 多花黑麥草 青貯 發(fā)酵品質 微生物
【學位授予單位】：四川農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S816
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-10
• 1. 立題背景10-11
• 2. 文獻綜述11-18
• 2.1 影響青貯品質的因素11-13
• 2.1.1 青貯原料含水量11
• 2.1.2 青貯原料緩沖能力11-12
• 2.1.3 青貯原料水溶性碳水化合物含量12
• 2.1.4 青貯體系中乳酸菌種類與數(shù)量12
• 2.1.5 青貯溫度12-13
• 2.2 青貯化學及生物添加劑的應用13-15
• 2.2.1 酶制劑以及營養(yǎng)因子13
• 2.2.2 防腐劑13-14
• 2.2.3 非蛋白氮14
• 2.2.4 乳酸菌14-15
• 2.3 PCR-DGGE技術在青貯研究領域的應用15-16
• 2.4 青貯中有氧變敗研究16-17
• 2.5 多花黑麥草青貯研究進展17
• 2.6 研究的目的與意義17-18
• 3. 研究的材料與方法18-24
• 3.1 試驗地概況18
• 3.2 試驗材料18
• 3.3 試驗設計18-19
• 3.4 青貯料的制作19-20
• 3.5 試驗測定項目與方法20-23
• 3.5.1 發(fā)酵品質與化學成分20
• 3.5.2 青貯飼料有氧變敗20
• 3.5.3 青貯飼料微生物計數(shù)20-21
• 3.5.4 青貯飼料微生物多樣性的測定21-23
• 3.6 數(shù)據處理23-24
• 4. 結果與分析24-45
• 4.1 多花黑麥草原料成分24-25
• 4.2 不同處理多花黑麥草青貯發(fā)酵品質的變化25-35
• 4.2.1 不同處理多花黑麥草pH值的變化25-27
• 4.2.2 不同處理多花黑麥草氨態(tài)氮/總氮的變化27-29
• 4.2.3 不同處理多花黑麥草乳酸含量的變化29-31
• 4.2.4 不同處理多花黑麥草乙酸含量的變化31-33
• 4.2.5 不同處理多花黑麥草水溶性碳水化合物的變化33-35
• 4.3 不同處理對多花黑麥草發(fā)酵有氧穩(wěn)定性的影響35-36
• 4.4 不同處理對多花黑麥草青貯微生物種群的影響36-45
• 4.4.1 樣品16s rDNA的V3區(qū)pcr擴增結果36-37
• 4.4.2 多花黑麥草青貯60天V3區(qū)pcr產物DGGE結果37-42
• 4.4.3 多花黑麥草青貯有氧變敗7天V3區(qū)pcr產物DGGE結果42-45
• 5. 討論與小結45-50
• 5.1 多花黑麥草原料化學成分45
• 5.2 不同處理多花黑麥草青貯發(fā)酵品質的變化45-48
• 5.3 不同添加劑對不同含水量多花黑麥草青貯有氧穩(wěn)定性的影響48
• 5.4 不同處理對多花黑麥草青貯微生物種群的影響48-50
• 6. 結論與展望50-52
• 6.1 結論50-51
• 6.2 展望51-52
• 參考文獻52-60
• 致謝60-61
• 附錄61-66
• 攻讀學位期間的學術論文情況66
• 攻讀學位期間參與項目66

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