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豬6種常見病毒多重PCR檢測方法的建立及應用

發(fā)布時間:2017-08-13 05:08

  本文關鍵詞:豬6種常見病毒多重PCR檢測方法的建立及應用


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【摘要】:旨在建立一種可同時檢測豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)、豬瘟病毒(CSFV)、豬偽狂犬病病毒(PRV)、豬圓環(huán)病毒2型(PCV-2)、豬細小病毒(PPV)和豬巨細胞病毒(PCMV)的多重PCR檢測方法。參考相關文獻及序列比對結果設計6對特異性引物,建立了可同時檢測以上6種病毒的多重PCR方法并應用此方法對臨床病例進行了檢測。結果表明,所建立的多重PCR方法靈敏度高,對6種病毒的最低核酸檢測量分別為12.8pg(PRRSV)、46pg(CSFV)、16pg(PRV)、23.5pg(PCV-2)、72pg(PPV)、8.6pg(PCMV),對豬流感病毒(SIV)、豬乙型腦炎病毒(JEV)、豬流行性腹瀉病毒(PEDV)、豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)和豬輪狀病毒(PoRV)無特異性擴增。應用該方法對臨床145份樣品進行檢測,總陽性率為83.45%,2種以上病毒混合感染陽性率為69.66%。說明所建立的多重PCR檢測方法敏感,可用于豬群中上述6種豬病病原的單一感染或混合感染的鑒別診斷。
【作者單位】: 青島農業(yè)大學動物科技學院;山東出入境檢疫檢驗局/食品農產品檢測中心;澳蘭百特生物工程有限公司;
【關鍵詞】豬繁殖與呼吸綜合征病毒 豬瘟病毒 豬偽狂犬病病毒 豬圓環(huán)病毒型 豬細小病毒 豬巨細胞病毒 多重PCR
【基金】:國家科技支撐計劃項目(2015BAI07B01)
【分類號】:S858.28
【正文快照】: 近年來,我國養(yǎng)豬業(yè)呈現規(guī)模化、集約化發(fā)展,隨著豬群養(yǎng)殖密度的增大,多種病毒混合感染的情況日趨嚴重[1-2],其中以豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome vi-rus,PRRSV)、豬瘟病毒(Classical swine fever vi-rus,CSFV)、豬偽狂犬病病毒(Pseud

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