本文關(guān)鍵詞：云南省部分地區(qū)宿主動物巴貝蟲感染狀況的調(diào)查研究

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【摘要】：【目的】以云南省為本次研究的空間范圍,家畜動物(牛、羊、馬、驢、犬)和小型獸類為研究對象,采用巢氏PCR進(jìn)行巴貝蟲18S rRNA基因擴(kuò)增及序列分析,了解云南省不同地區(qū)家畜動物和小型獸類感染巴貝蟲的狀況,為制定防治措施提供依據(jù)�！痉椒ā�1.樣本來源共采集家畜動物和小型獸類樣本3277份。其中在12個縣采集家畜動物血液1073份(牛血274份、羊血395份、犬血354,馬血33份,驢血17份)。在18個縣采集分屬4目9科26屬的小型獸類脾臟樣本2204份(德欽縣346份,維西縣99份,香格里拉縣91份,玉龍縣224份,景谷縣76份,寧洱縣88份,騰沖市39份,永德縣215份,勐�？h175份,勐臘縣81份,云縣68份,石屏縣128份,彌勒縣110份,宜良縣94份,蒙自市22份,福貢縣134份,瀘水縣114份,貢山縣100份)。2.基因組DNA提取操作步驟按照TIANGEN組織/血液基因組DNA提取試劑盒說明書進(jìn)行。3.PCR擴(kuò)增(1)對于家畜動物,采用巢氏PCR擴(kuò)增巴貝蟲屬18S rRNA基因接近全長的片段。(2)對于小型獸類,采用巢氏PCR擴(kuò)增巴貝蟲屬18S rRNA基因接近全長的片段,并且采用巢氏PCR擴(kuò)增微小巴貝蟲18S rRNA基因部分片段。4.瓊脂糖凝膠電泳將PCR第二輪擴(kuò)增產(chǎn)物置于1.2%瓊脂糖凝膠電泳,凝膠成像儀觀察結(jié)果。5.基因序列測定和系統(tǒng)進(jìn)化樹分析將電泳檢測到目的條帶的pcr擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序,測序結(jié)果登陸ncbiblast網(wǎng)站進(jìn)行同源性比較,并運(yùn)用mega6.06軟件進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化樹分析�！窘Y(jié)果】1.共檢測1073份家畜動物血液樣本,檢出巴貝蟲陽性50份,總陽性率4.66%。其中274份牛血中檢出11份陽性(4.01%),4份為牛巴貝蟲,7份為雙芽巴貝蟲。395份羊血中檢出38份陽性(9.62%),37份為奧氏巴貝蟲樣寄生蟲,1份為狍巴貝蟲樣寄生蟲;354份犬血中檢出1份陽性(0.28%),為韋氏巴貝蟲。其余33份馬和17份驢中未檢出陽性。2.共從6個縣的家畜血液中檢出巴貝蟲,分別是香格里拉、漾濞、劍川、蘭坪、云龍、耿馬和勐臘。3.家畜血液陽性擴(kuò)增產(chǎn)物的系統(tǒng)發(fā)育分析結(jié)果顯示,7份雙芽巴貝蟲中,4份和昆明株(ay603402)、廣東株(jq723014)位于同一大分支,3份和湖北株(hq840960)、盧氏株(jx495402)位于同一大分支。在4份牛巴貝蟲中,1份與南非株(l19077)、巴西株(fj426364)位于同一大分支,3份和巴西株(ef458213)、美國株(hq264111)位于同一大分支。37份奧氏巴貝蟲樣寄生蟲均與奧氏巴貝蟲加拿大株(kc460321)同源性最高。狍巴貝蟲樣寄生蟲與狍巴貝蟲德國株(km657248)同源性最高。犬血中的1份韋氏巴貝蟲基因序列與韋氏巴貝蟲臺灣株(hq148664)的同源性為99.7%。4.本調(diào)查共從2204份小型獸類脾臟中檢出巴貝蟲53份,感染率為2.40%,分屬2目4科9屬12種小獸,按照陽性率從高到低依次為是中華新猬(40.00%)、滇絨鼠(14.29%)、斯氏家鼠(7.53%)、中華姬鼠(5.91%)、中麝，

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