本文關(guān)鍵詞：褪黑素刺激對內(nèi)蒙古絨山羊毛囊干細(xì)胞增殖和分化的影響及機(jī)理研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：本研究旨在探討褪黑素及其受體阻斷后對內(nèi)蒙古絨山羊毛囊干細(xì)胞增殖和分化過程中整合素β1、SOX9、β-catenin、BMP2/4、KAP7、KAP8、K5/14和K1／10十一個基因表達(dá)的研究,為內(nèi)蒙古白絨山羊毛囊干細(xì)胞定向增殖及其誘導(dǎo)分化提供相關(guān)的理論基礎(chǔ)。1.探尋研究褪黑素對毛囊干細(xì)胞的最適增殖分化濃度,采用0pg/mL (CG)、 100pg/mL、300pg/mL、500pg/mL、700pg/mL五個濃度梯度對毛囊干細(xì)胞連續(xù)處理21d,分別提取0d、1d、3d、5d、7d、14d和21d的細(xì)胞eDNA為模板采用實(shí)時定量PCR方法整合素β1、SOX9、β-catenin、BMP2/4、KAPT、KAPS、K5/14和K1/10十一個基因表達(dá)量。結(jié)果顯示,500pg/mL濃度的褪黑素為毛囊干細(xì)胞定向分化為毛囊細(xì)胞的最適分化濃度,300pg/mL濃度的褪黑素為毛囊干細(xì)胞定向分化為表皮細(xì)胞的最適分化濃度,且同時存在整合素β1、SOX9、β-catenin, BMP2/4、KAPT、KAP8、K5/14和K1/10在一定的時間點(diǎn)出現(xiàn)高表達(dá)的現(xiàn)象。2。探尋研究褪黑素對毛囊干細(xì)胞分化為毛囊細(xì)胞膜受體作用,根據(jù)第一個實(shí)驗(yàn)確定的最適分化濃度,設(shè)立Opg/ml、500pg/mL、500pg/mL+4-P-ADOT(MT2阻斷劑)、500pg/mL+Luzindole (MT1+MT2阻斷劑)四個實(shí)驗(yàn)組處理毛囊干細(xì)胞,分別提取0d、1d、3d、5d、7d、14d和21d的細(xì)胞cDNA為模板采用實(shí)時定量PCR方法整合素β1、SOX9、β-catenin、BMP2/4、KAP7、KAP8、K5/14和K1/10十一個基因表達(dá)量。結(jié)果顯示,加入阻斷劑組未出現(xiàn)KAP7、KAP8高表達(dá)現(xiàn)象,褪黑素作用毛囊干細(xì)胞向毛囊細(xì)胞分化是通過細(xì)胞膜上的受體2調(diào)節(jié)實(shí)現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】：絨山羊 毛囊干細(xì)胞 褪黑素 整合素β1 SOX9 β-catenin BMP2/4 KAP7/8 K5/14 K1/10
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S827
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-12
• 1 引言12-22
• 1.1 絨山羊的簡介12
• 1.2 毛囊的介紹12-14
• 1.2.1 毛囊的結(jié)構(gòu)12
• 1.2.2 毛囊的生長周期12-13
• 1.2.3 毛囊周期性變化的調(diào)控因子13-14
• 1.3 毛囊干細(xì)胞的介紹14-19
• 1.3.1 毛囊干細(xì)胞的概述及特征14-15
• 1.3.2 毛囊干細(xì)胞的相關(guān)標(biāo)記物15-16
• 1.3.3 毛囊干細(xì)胞定位的研究歷程16-17
• 1.3.4 調(diào)節(jié)毛囊干細(xì)胞增殖分化的信號通路17-19
• 1.4 褪黑素19-20
• 1.4.1 褪黑素的研究概況19
• 1.4.2 褪黑素受體的分類和分布19-20
• 1.5 本實(shí)驗(yàn)研究的目的和意義20-22
• 2 褪黑素對毛囊干細(xì)胞增殖分化濃度的研究22-53
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料22
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料22
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器及耗材22
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑22
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法22-26
• 2.2.1 毛囊干細(xì)胞的解凍和復(fù)蘇22
• 2.2.2 毛囊干細(xì)胞的傳代培養(yǎng)22-23
• 2.2.3 褪黑素處理毛囊干細(xì)胞23
• 2.2.4 細(xì)胞總RNA的提取23
• 2.2.5 細(xì)胞總RNA的鑒定23
• 2.2.6 熒光定量PCR引物的設(shè)計與合成23
• 2.2.7 RT-PCR擴(kuò)增23-25
• 2.2.8 相對定量PCR檢測基因不同組間的表達(dá)25-26
• 2.2.9 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析26
• 2.3 結(jié)果與分析26-53
• 2.3.1 細(xì)胞總RNA的提取26-27
• 2.3.2 褪黑素刺激后毛囊干細(xì)胞形態(tài)觀察27
• 2.3.3 褪黑素刺激調(diào)控毛囊干細(xì)胞增殖分化β1-integrin和SOX9基因的確定27-34
• 2.3.4 褪黑素刺激調(diào)控于毛囊干細(xì)胞增殖分化β-catenin和BMP2/4基因表達(dá)的確定34-40
• 2.3.5 褪黑素刺激調(diào)控毛囊干細(xì)胞增殖分化KAP7和KAP8基因表達(dá)確定40-45
• 2.3.6 褪黑素刺激調(diào)控毛囊干細(xì)胞增殖分化K5/14和K1/10基因表達(dá)確定45-53
• 3 褪黑素刺激(受體阻斷)調(diào)控毛囊干細(xì)胞增殖分化濃度相關(guān)基因受體的確定53-72
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料53
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法53
• 3.3 結(jié)果與分析53-72
• 3.3.1 細(xì)胞總RNA的提取53
• 3.3.2 褪黑素及褪黑素受體阻斷后毛囊干細(xì)胞形態(tài)觀察53-54
• 3.3.3 褪黑素刺激(受體阻斷)調(diào)控毛囊干細(xì)胞增殖分化相關(guān)基因表達(dá)確定54-71
• 3.3.4 結(jié)論71-72
• 4 全文總結(jié)72-73
• 致謝73-74
• 參考文獻(xiàn)74-79
• 附錄79-84
• 作者簡介84

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8 周s，

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