本文關鍵詞：褪黑素刺激對內蒙古絨山羊毛囊干細胞增殖和分化的影響及機理研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：本研究旨在探討褪黑素及其受體阻斷后對內蒙古絨山羊毛囊干細胞增殖和分化過程中整合素β1、SOX9、β-catenin、BMP2/4、KAP7、KAP8、K5/14和K1／10十一個基因表達的研究,為內蒙古白絨山羊毛囊干細胞定向增殖及其誘導分化提供相關的理論基礎。1.探尋研究褪黑素對毛囊干細胞的最適增殖分化濃度,采用0pg/mL (CG)、 100pg/mL、300pg/mL、500pg/mL、700pg/mL五個濃度梯度對毛囊干細胞連續(xù)處理21d,分別提取0d、1d、3d、5d、7d、14d和21d的細胞eDNA為模板采用實時定量PCR方法整合素β1、SOX9、β-catenin、BMP2/4、KAPT、KAPS、K5/14和K1/10十一個基因表達量。結果顯示,500pg/mL濃度的褪黑素為毛囊干細胞定向分化為毛囊細胞的最適分化濃度,300pg/mL濃度的褪黑素為毛囊干細胞定向分化為表皮細胞的最適分化濃度,且同時存在整合素β1、SOX9、β-catenin, BMP2/4、KAPT、KAP8、K5/14和K1/10在一定的時間點出現高表達的現象。2。探尋研究褪黑素對毛囊干細胞分化為毛囊細胞膜受體作用,根據第一個實驗確定的最適分化濃度,設立Opg/ml、500pg/mL、500pg/mL+4-P-ADOT(MT2阻斷劑)、500pg/mL+Luzindole (MT1+MT2阻斷劑)四個實驗組處理毛囊干細胞,分別提取0d、1d、3d、5d、7d、14d和21d的細胞cDNA為模板采用實時定量PCR方法整合素β1、SOX9、β-catenin、BMP2/4、KAP7、KAP8、K5/14和K1/10十一個基因表達量。結果顯示,加入阻斷劑組未出現KAP7、KAP8高表達現象,褪黑素作用毛囊干細胞向毛囊細胞分化是通過細胞膜上的受體2調節(jié)實現的。
【關鍵詞】：絨山羊 毛囊干細胞 褪黑素 整合素β1 SOX9 β-catenin BMP2/4 KAP7/8 K5/14 K1/10
【學位授予單位】：內蒙古農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S827
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-12
• 1 引言12-22
• 1.1 絨山羊的簡介12
• 1.2 毛囊的介紹12-14
• 1.2.1 毛囊的結構12
• 1.2.2 毛囊的生長周期12-13
• 1.2.3 毛囊周期性變化的調控因子13-14
• 1.3 毛囊干細胞的介紹14-19
• 1.3.1 毛囊干細胞的概述及特征14-15
• 1.3.2 毛囊干細胞的相關標記物15-16
• 1.3.3 毛囊干細胞定位的研究歷程16-17
• 1.3.4 調節(jié)毛囊干細胞增殖分化的信號通路17-19
• 1.4 褪黑素19-20
• 1.4.1 褪黑素的研究概況19
• 1.4.2 褪黑素受體的分類和分布19-20
• 1.5 本實驗研究的目的和意義20-22
• 2 褪黑素對毛囊干細胞增殖分化濃度的研究22-53
• 2.1 實驗材料22
• 2.1.1 實驗材料22
• 2.1.2 實驗儀器及耗材22
• 2.1.3 實驗試劑22
• 2.2 實驗方法22-26
• 2.2.1 毛囊干細胞的解凍和復蘇22
• 2.2.2 毛囊干細胞的傳代培養(yǎng)22-23
• 2.2.3 褪黑素處理毛囊干細胞23
• 2.2.4 細胞總RNA的提取23
• 2.2.5 細胞總RNA的鑒定23
• 2.2.6 熒光定量PCR引物的設計與合成23
• 2.2.7 RT-PCR擴增23-25
• 2.2.8 相對定量PCR檢測基因不同組間的表達25-26
• 2.2.9 實驗數據的統(tǒng)計分析26
• 2.3 結果與分析26-53
• 2.3.1 細胞總RNA的提取26-27
• 2.3.2 褪黑素刺激后毛囊干細胞形態(tài)觀察27
• 2.3.3 褪黑素刺激調控毛囊干細胞增殖分化β1-integrin和SOX9基因的確定27-34
• 2.3.4 褪黑素刺激調控于毛囊干細胞增殖分化β-catenin和BMP2/4基因表達的確定34-40
• 2.3.5 褪黑素刺激調控毛囊干細胞增殖分化KAP7和KAP8基因表達確定40-45
• 2.3.6 褪黑素刺激調控毛囊干細胞增殖分化K5/14和K1/10基因表達確定45-53
• 3 褪黑素刺激(受體阻斷)調控毛囊干細胞增殖分化濃度相關基因受體的確定53-72
• 3.1 實驗材料53
• 3.2 實驗方法53
• 3.3 結果與分析53-72
• 3.3.1 細胞總RNA的提取53
• 3.3.2 褪黑素及褪黑素受體阻斷后毛囊干細胞形態(tài)觀察53-54
• 3.3.3 褪黑素刺激(受體阻斷)調控毛囊干細胞增殖分化相關基因表達確定54-71
• 3.3.4 結論71-72
• 4 全文總結72-73
• 致謝73-74
• 參考文獻74-79
• 附錄79-84
• 作者簡介84

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本文編號：450130