本試驗從杏鮑菇菌糠中篩選出纖維素降解優(yōu)勢菌株,并與乳酸片球菌和釀酒酵母組成復合發(fā)酵菌劑對杏鮑菇菌糠進行混菌發(fā)酵。使用響應面法,對杏鮑菇菌糠發(fā)酵條件進行優(yōu)化,提高纖維素降解率,并探究混菌發(fā)酵杏鮑菇菌糠的飼用安全性及營養(yǎng)價值。試驗一纖維素降解優(yōu)勢菌株的篩選本試驗使用CMC篩選培養(yǎng)基,并結合羧甲基纖維素酶活和濾紙酶活測定對纖維素降解優(yōu)勢菌株進行篩選,通過細菌16S rDNA和真菌18S rDNA同源序列比對確定菌株種屬,并對其產酶條件進行測定。（1）篩選出三株纖維素降解優(yōu)勢菌株,枯草芽孢桿菌P12（Bacillus subtilis）,黑曲霉L6（Aspergillus niger）,里氏木霉L8（Trichoderma reesei）,其中P12、L6為中華人民共和國農業(yè)部公布的《飼料添加劑品種目錄（2013）》中可作為飼料添加劑的菌種。（2）菌株P12的最適產酶時間、溫度、pH分別為48 h、37℃、6.5-7;菌株L6的最適產酶時間、溫度、pH分別為48 h、30℃、6.5-7。試驗二響應面法優(yōu)化杏鮑菇菌糠混菌發(fā)酵條件本試驗將試驗一篩選的纖維素降解優(yōu)勢菌株P12、L6與乳酸片球菌、釀酒酵...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-2 BBD三因素試驗點分布

Box–Behnken試驗設計是響應面法常用的試驗設計方法之一,使用用多元二次方程來擬合響應變量與響應值之間的函數關系,通過分析回歸方程來優(yōu)化條件工藝,是解決多響應變量與響應值關系的一種統(tǒng)計方法。各變量設置3個水平,高水平(+1)、低水平(-1)及中心水平(0),試驗研究的變量越....

圖2-1部分菌株在篩選培養(yǎng)基上形成的透明圈

采用剛果紅染色法對前期從杏鮑菇菌糠中篩選分離的16株纖維素降解菌進行初篩,結果見表2-3,部分菌株培養(yǎng)基脫色結果見圖2-1。選出6株d/D大于3的菌株:分別為P2、P7、P12、L6、L7、L8。2.2.2葡萄糖標準曲線的繪制

圖2-2葡萄糖標準曲線

葡萄糖標準曲線見圖2-2,纖維素酶活力的計算參照中國農業(yè)標準GB/T23881-2009(飼用纖維素酶活性的測定)。2.2.3纖維素降解優(yōu)勢菌株酶活的測定

圖2-3纖維素分解優(yōu)勢菌株不同培養(yǎng)時間羧甲基纖維素酶活(圖2-3a)和濾紙酶活(圖2-3b)

如圖2-3所示,P12、L6的CMCA和FPA隨著培養(yǎng)時間的延長,呈先增加后降低的趨勢,在48h時達到最大值。L6在培養(yǎng)48h的CMCA和FPA顯著高于其他培養(yǎng)時間(P<0.05),P12培養(yǎng)48h與72h的CMCA差異不顯著(P>0.05),與其他組差異顯著(P<0.0....

本文編號：4044108