【目的】細胞自噬和凋亡存在著相互制約,p38MAPK信號通路作為細胞凋亡的主要調(diào)控通路之一,也對細胞自噬存在促進和抑制的雙重作用。已有研究表明,促性腺激素抑制激素(gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH)對細胞自噬與凋亡均有影響,但作用機制尚不明確。故探究GnIH通過p38MAPK信號通路對豬卵巢顆粒細胞(pGCs)自噬與凋亡的影響及其機理,為解決母豬的產(chǎn)子率以及同期發(fā)情等問題提供參考�！痉椒ā繌呢i卵巢中提取卵巢顆粒細胞,進行體外培養(yǎng)。1、探究GnIH對p38MAPK信號通路的最佳作用時間:按孵育GnIH時間梯度(0min、10 min、30 min、60 min、90 min)分組,用Western blot檢測豬卵巢顆粒細胞p38與p-p38的蛋白表達量變化;2、驗證GnIH對p38MAPK信號通路的影響:按(空白對照、GnIH、p38激活劑(U-46619)、U-46619+GnIH)分組,用Western blot檢測p38與p-p38的蛋白表達量變化;3、探究不同濃度GnIH對自噬和凋亡的影響:按(空白對照、10-6 mol·L-1 GnIH...

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【部分圖文】：

圖1 10-6 mol·L-1 GnIH(0、10、30、60、90 min)處理p38及p-p38的免疫印跡及統(tǒng)計學分析

p38激活劑孵育pGCs后，GnIH濃度梯度（0、10-6、10-8、10-10、10-12）處理pGCs,Westernblot檢測Caspase-3、Bax和Bcl-2，灰度值分析。結(jié)果提示，P38激活劑組與空白對照相比，存在顯著性差異（P<0.05）；經(jīng)不同劑量GnIH處....

圖2 按空白對照、GnIH、U-46619、U-46619+GnIH四組處理p GCs,Western blot檢測p38及p-p38的免疫印跡及統(tǒng)計學分析

圖110-6mol·L-1GnIH(0、10、30、60、90min)處理p38及p-p38的免疫印跡及統(tǒng)計學分析圖3不同劑量GnIH(0、10-6、10-8、10-10、10-12）處理pGCs,Westernblot檢測caspase-3、Bax和Bcl-2的免疫....

圖3 不同劑量GnIH(0、10-6、10-8、10-10、10-12）處理pGCs,Western blot檢測caspase-3、Bax和Bcl-2的免疫印跡及統(tǒng)計學分析

圖2按空白對照、GnIH、U-46619、U-46619+GnIH四組處理pGCs,Westernblot檢測p38及p-p38的免疫印跡及統(tǒng)計學分析圖4不同劑量GnIH(0、10-6、10-8、10-10、10-12）處理pGCs,Westernblot檢測Becli....

圖4 不同劑量GnIH(0、10-6、10-8、10-10、10-12）處理pGCs,Western blot檢測Beclin-1、Atg12和Atg5的免疫印跡及統(tǒng)計學分析

圖3不同劑量GnIH(0、10-6、10-8、10-10、10-12）處理pGCs,Westernblot檢測caspase-3、Bax和Bcl-2的免疫印跡及統(tǒng)計學分析圖5用p38激活劑孵育，用不同劑量GnIH(0、10-6、10-8、10-10、10-12）處理pGCs....

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