目的：建立、優(yōu)化并對(duì)比呋喃它酮代謝物5-甲基嗎啉–3-氨基-2-惡唑烷酮（3-amino-5-morpholinomethyl-2-oxazolidinone, AMOZ）的膠體金與熒光猝滅免疫試層析檢測(cè)方法。 方法：將實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的CPAMOZ單克隆抗體標(biāo)記于膠體金顆粒表面后，噴涂于聚酯膜上，將抗原CPAMOZ-BSA作為檢測(cè)線（Test line），羊抗鼠IgG作為質(zhì)控線（Control line）分別包被于硝酸纖維膜上，組裝試紙條，優(yōu)化各實(shí)驗(yàn)條件。測(cè)定試紙條敏感性，特異性、穩(wěn)定性及檢測(cè)時(shí)間；將熒光顆粒與抗原CPAMOZ-BSA混合液作為檢測(cè)線，熒光顆粒為質(zhì)控線分別包被于硝酸纖維素膜上，制備熒光猝滅試紙條，調(diào)整優(yōu)化各實(shí)驗(yàn)條件，測(cè)定其靈敏度、檢測(cè)線性范圍、特異性、檢測(cè)時(shí)間，并與膠體金試紙條對(duì)比。 結(jié)果：成功合成出檢測(cè)抗原CPAMOZ-BSA；制備了平均顆粒直徑為20nm膠體金顆粒；成功研制CPAMOZ膠體金與熒光猝滅免疫層析試紙條，其靈敏度分別為10ppb、0.625ppb，熒光猝滅試紙條線性范圍是0.3-10ppb；二者檢測(cè)時(shí)間分別為5min、10min，并均與硝基呋喃代謝物A...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1呋喃它酮分子結(jié)構(gòu)

圖1呋喃它酮分子結(jié)構(gòu)Fig.1Themolecularstructureoffuraltadone藥物可抑制乙酰輔酶A活性，使糖類不能進(jìn)入抑菌作用。國(guó)外于1959年將呋喃它酮應(yīng)用于臨感染如蜂窩織炎、膿腫、傷口感染、中耳炎、支基呋喃類藥物被后，在體內(nèi)迅速代謝，....

圖2競(jìng)爭(zhēng)法免疫層析原理圖

了繁瑣的加樣、洗滌等步驟，反應(yīng)迅速并結(jié)果判斷直觀，適合現(xiàn)場(chǎng)大批量快速篩選，目前已被廣泛應(yīng)用于臨床診斷檢測(cè)等。紙條主要有4部分組成：樣品墊（sampleapplicationpad）、信號(hào)墊（signalgenerationpad）和吸收墊（absorptio固定于P....

圖3AMOZ衍化反應(yīng)方程式Fig3.ThechemicalequationofAMOZderivation

Na2HPO4·12H2O20.67gNaH2PO4·2H2O5.2g定溶于1000mL去離子水中，抽濾后使用；洗脫液（pH2.7）稱取谷氨酸3.75g，定容于1000mL，用鹽酸調(diào)節(jié)pH至2.7，抽濾后使中和液（1mol/LpH9.0Tri....

圖4AMOZ抗原的紫外光譜圖

紫外光譜掃描結(jié)果見圖4。由圖4可知，BSA紫外最大吸收峰波長(zhǎng)為抗原CPAMOZ-BSA最大吸收峰位于300nm。CPAMOZ-BSA相對(duì)大紫外吸收峰發(fā)生了紅移。表明完全抗原CPAMOZ-BSA偶聯(lián)成功

本文編號(hào)：4027737