本研究通過定點(diǎn)突變技術(shù),對A/Quail/Hong Kong/G1/1997(H9N2)毒株NS1蛋白114、124、202、212位進(jìn)行氨基酸置換,并構(gòu)建出未置換NS1蛋白重組表達(dá)質(zhì)粒p CAGGS-NS1、位點(diǎn)置換重組表達(dá)質(zhì)粒p CAGGS-NS1/P114S、p CAGGS-NS1/M124V、p CAGGS-NS1/T202A、p CAGGS-NS1/S212P。應(yīng)用反向遺傳技術(shù)拯救出野生型未置換病毒Re G1-NS1、位點(diǎn)置換病毒Re G1-NS1/P114S、Re G1-NS1/M124V、Re G1-NS1/T202A、Re G1-NS1/S212P。雙熒光素酶試驗(yàn)結(jié)果顯示,與poly(I:C)組相比,NS1蛋白未置換、NS1蛋白P114S、M124V、S212P置換后,對NF-κB、IRF-3、IFN-β啟動子的轉(zhuǎn)錄活性均有抑制作用,而NS1蛋白T202A置換后對NF-κB、IRF-3、IFN-β啟動子的轉(zhuǎn)錄活性無顯著抑制。與NS1蛋白未置換組相比,NS1蛋白S212P置換后對NF-κB、IRF-3、IFN-β啟動子轉(zhuǎn)錄活性的抑制作用最為顯著,而NS1蛋白T202A置換后...

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖15種NS基因編碼蛋白的mRNA剪接模式圖

A型流感病毒NS1蛋白研究進(jìn)展A型流感病毒屬正黏病毒科、有囊膜、單股負(fù)鏈RNA病毒，基因組由PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M、NS8個RNA節(jié)段組成。作為NS基因的表達(dá)產(chǎn)物之一，NS1蛋白可以從宿主和病毒兩方面影響病毒的致病力及毒力[6～7]....

圖2A型流感病毒NS1蛋白功能分區(qū)Figure2FunctionalpartitionofNS1proteinofinfluenzaAvirus

5圖2A型流感病毒NS1蛋白功能分區(qū)Figure2FunctionalpartitionofNS1proteinofinfluenzaAvirus

圖3A型流感病毒NS1蛋白對IFN-β信號通路的影響

10圖3A型流感病毒NS1蛋白對IFN-β信號通路的影響Figure3EffectsofNS1proteinofinfluenzaAvirusonIFN-βsignalingpathway

圖1.1位點(diǎn)置換NS基因電泳結(jié)果

第一章H9N2病毒NS1位點(diǎn)置換對NF-κB、IRF-3與IFN-計分析，計算p值�！皀.s.”表示無顯著差異；“.01；“***”代表p<0.001；“****”代表p<0位點(diǎn)置換結(jié)果毒株基因組RNA，經(jīng)RT-PCR擴(kuò)增出病毒NS增出相應(yīng)位點(diǎn)置換的....

本文編號：4027579