小鼠巨噬細胞胞外陷阱形成及對賈第蟲殺傷作用研究
發(fā)布時間:2024-12-21 04:20
十二指腸賈第蟲(Giardia duodenalis)又名藍氏賈第蟲(G.lamblia)(簡稱賈第蟲),是一種重要的人獸共患原蟲,寄生在宿主十二指腸,主要引起腹瀉。賈第蟲可通過水源傳播,我國城市供水水質(zhì)和生活飲用水衛(wèi)生標準均把賈第蟲檢測列為必檢項目。目前治療賈第蟲病常用藥物有甲硝唑、替硝唑等,藥物副作用較大且蟲體已產(chǎn)生耐藥性。由于尚沒有預(yù)防賈第蟲病的疫苗,因此賈第蟲病仍然是嚴重危害人畜健康的一種原蟲病。天然免疫是機體抵抗病原的第一道防線,目前宿主天然免疫在抗賈第蟲感染中的作用尚不明確,深入開展宿主天然免疫防御賈第蟲研究將為該病防治提供理論依據(jù)。胞外陷阱(Extracellular Traps,ETs)是機體抵抗病原的一種重要天然免疫方式。當嗜中性粒細胞、巨噬細胞等受到外界病原或某些化學(xué)物質(zhì)刺激后,向細胞外釋放出主要以DNA為骨架并附著有顆粒蛋白的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),該結(jié)構(gòu)可對多種胞外病原微生物進行捕獲和殺滅。賈第蟲是一種胞外寄生原蟲,目前賈第蟲能否誘導(dǎo)巨噬細胞ETs(METs)以及該METs對賈第蟲是否具有捕獲和殺傷作用尚不清楚。本研究對賈第蟲誘導(dǎo)巨噬細胞ETs形成及METs對賈第蟲的殺傷作...
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
abstract
英文縮寫詞表
前言
第一篇 文獻綜述
第1章 賈第蟲研究進展
1 賈第蟲病原學(xué)與生活史
2 賈第蟲的分類
3 賈第蟲的致病性
4 賈第蟲病與免疫
5 賈第蟲病的診斷和治療
6 結(jié)語
第2章 胞外陷阱研究進展
1 胞外陷阱的作用及性質(zhì)
2 胞外陷阱形成的分子機制
3 胞外陷阱與病原
4 巨噬細胞胞外陷阱研究進展
5 胞外陷阱與自身免疫疾病
6 結(jié)語
第二篇 研究內(nèi)容
第1章 賈第蟲誘導(dǎo)METs形成及成份鑒定
1 材料
1.1 主要試劑
1.2 主要設(shè)備
1.3 賈第蟲蟲株及細胞
1.4 主要試劑配方
2 方法
2.1 小鼠腹腔巨噬細胞的制備與培養(yǎng)
2.2 小鼠腹腔巨噬細胞純度及ETs釋放能力的鑒定
2.3 賈第蟲滋養(yǎng)體的培養(yǎng)和收集
2.4 掃描電鏡觀察賈第蟲誘導(dǎo)的METs超微結(jié)構(gòu)
2.5 間接免疫熒光檢測賈第蟲誘導(dǎo)的METs成份
3 結(jié)果
3.1 小鼠腹腔巨噬細胞分離與鑒定
3.2 小鼠腹腔巨噬細胞ETs釋放能力的鑒定
3.3 賈第蟲滋養(yǎng)體的體外純培養(yǎng)
3.4 賈第蟲可誘導(dǎo)巨噬細胞產(chǎn)生ETs結(jié)構(gòu)
3.5 賈第蟲誘導(dǎo)的METs成份鑒定
4 討論
5 小結(jié)
第2章 賈第蟲誘導(dǎo)的METs釋放的相關(guān)分子作用研究
1 材料
1.1 主要試劑
1.2 主要設(shè)備
2 方法
2.1 METs釋放的動力學(xué)研究
2.2 MAPK通路、MPO、Ca2+(SOCE)、NADPH oxidase在賈第蟲誘導(dǎo)METs釋放中的作用
2.3 胞內(nèi)活性氧簇產(chǎn)生量和胞外乳酸脫氫酶釋放量的檢測
2.4 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果
3.1 賈第蟲誘導(dǎo)METs釋放呈劑量和時間依賴性
3.2 MAPK通路蛋白對METs釋放的影響
3.3 MPO、Ca2+ (SOCE)、NADPH oxidase對 METs釋放的影響
3.4 胞內(nèi)活性氧簇及胞外乳酸脫氫酶檢測
4 討論
5 小結(jié)
第3章 METs對賈第蟲滋養(yǎng)體的殺傷作用
1 材料
1.1 主要試劑
1.2 主要設(shè)備
2 方法
2.1 細胞松弛素D對 METs釋放的影響
2.2 METs作用對賈第蟲滋養(yǎng)體存活率的影響
2.3 METs作用后賈第蟲滋養(yǎng)體形態(tài)變化觀察
2.4 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果
3.1 細胞松弛素D對 METs的釋放影響
3.2 METs作用對賈第蟲滋養(yǎng)體的影響
4 討論
5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
導(dǎo)師簡介
作者簡介及科研成果
致謝
本文編號:4018389
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
abstract
英文縮寫詞表
前言
第一篇 文獻綜述
第1章 賈第蟲研究進展
1 賈第蟲病原學(xué)與生活史
2 賈第蟲的分類
3 賈第蟲的致病性
4 賈第蟲病與免疫
5 賈第蟲病的診斷和治療
6 結(jié)語
第2章 胞外陷阱研究進展
1 胞外陷阱的作用及性質(zhì)
2 胞外陷阱形成的分子機制
3 胞外陷阱與病原
4 巨噬細胞胞外陷阱研究進展
5 胞外陷阱與自身免疫疾病
6 結(jié)語
第二篇 研究內(nèi)容
第1章 賈第蟲誘導(dǎo)METs形成及成份鑒定
1 材料
1.1 主要試劑
1.2 主要設(shè)備
1.3 賈第蟲蟲株及細胞
1.4 主要試劑配方
2 方法
2.1 小鼠腹腔巨噬細胞的制備與培養(yǎng)
2.2 小鼠腹腔巨噬細胞純度及ETs釋放能力的鑒定
2.3 賈第蟲滋養(yǎng)體的培養(yǎng)和收集
2.4 掃描電鏡觀察賈第蟲誘導(dǎo)的METs超微結(jié)構(gòu)
2.5 間接免疫熒光檢測賈第蟲誘導(dǎo)的METs成份
3 結(jié)果
3.1 小鼠腹腔巨噬細胞分離與鑒定
3.2 小鼠腹腔巨噬細胞ETs釋放能力的鑒定
3.3 賈第蟲滋養(yǎng)體的體外純培養(yǎng)
3.4 賈第蟲可誘導(dǎo)巨噬細胞產(chǎn)生ETs結(jié)構(gòu)
3.5 賈第蟲誘導(dǎo)的METs成份鑒定
4 討論
5 小結(jié)
第2章 賈第蟲誘導(dǎo)的METs釋放的相關(guān)分子作用研究
1 材料
1.1 主要試劑
1.2 主要設(shè)備
2 方法
2.1 METs釋放的動力學(xué)研究
2.2 MAPK通路、MPO、Ca2+(SOCE)、NADPH oxidase在賈第蟲誘導(dǎo)METs釋放中的作用
2.3 胞內(nèi)活性氧簇產(chǎn)生量和胞外乳酸脫氫酶釋放量的檢測
2.4 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果
3.1 賈第蟲誘導(dǎo)METs釋放呈劑量和時間依賴性
3.2 MAPK通路蛋白對METs釋放的影響
3.3 MPO、Ca2+ (SOCE)、NADPH oxidase對 METs釋放的影響
3.4 胞內(nèi)活性氧簇及胞外乳酸脫氫酶檢測
4 討論
5 小結(jié)
第3章 METs對賈第蟲滋養(yǎng)體的殺傷作用
1 材料
1.1 主要試劑
1.2 主要設(shè)備
2 方法
2.1 細胞松弛素D對 METs釋放的影響
2.2 METs作用對賈第蟲滋養(yǎng)體存活率的影響
2.3 METs作用后賈第蟲滋養(yǎng)體形態(tài)變化觀察
2.4 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果
3.1 細胞松弛素D對 METs的釋放影響
3.2 METs作用對賈第蟲滋養(yǎng)體的影響
4 討論
5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
導(dǎo)師簡介
作者簡介及科研成果
致謝
本文編號:4018389
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