十二指腸賈第蟲(Giardia duodenalis)又名藍(lán)氏賈第蟲(G.lamblia)(簡稱賈第蟲),是一種重要的人獸共患原蟲,寄生在宿主十二指腸,主要引起腹瀉。賈第蟲可通過水源傳播,我國城市供水水質(zhì)和生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)均把賈第蟲檢測列為必檢項目。目前治療賈第蟲病常用藥物有甲硝唑、替硝唑等,藥物副作用較大且蟲體已產(chǎn)生耐藥性。由于尚沒有預(yù)防賈第蟲病的疫苗,因此賈第蟲病仍然是嚴(yán)重危害人畜健康的一種原蟲病。天然免疫是機(jī)體抵抗病原的第一道防線,目前宿主天然免疫在抗賈第蟲感染中的作用尚不明確,深入開展宿主天然免疫防御賈第蟲研究將為該病防治提供理論依據(jù)。胞外陷阱(Extracellular Traps,ETs)是機(jī)體抵抗病原的一種重要天然免疫方式。當(dāng)嗜中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等受到外界病原或某些化學(xué)物質(zhì)刺激后,向細(xì)胞外釋放出主要以DNA為骨架并附著有顆粒蛋白的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),該結(jié)構(gòu)可對多種胞外病原微生物進(jìn)行捕獲和殺滅。賈第蟲是一種胞外寄生原蟲,目前賈第蟲能否誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞ETs(METs)以及該METs對賈第蟲是否具有捕獲和殺傷作用尚不清楚。本研究對賈第蟲誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞ETs形成及METs對賈第蟲的殺傷作...

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
英文縮寫詞表
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第1章 賈第蟲研究進(jìn)展
        1 賈第蟲病原學(xué)與生活史
        2 賈第蟲的分類
        3 賈第蟲的致病性
        4 賈第蟲病與免疫
        5 賈第蟲病的診斷和治療
        6 結(jié)語
    第2章 胞外陷阱研究進(jìn)展
        1 胞外陷阱的作用及性質(zhì)
        2 胞外陷阱形成的分子機(jī)制
        3 胞外陷阱與病原
        4 巨噬細(xì)胞胞外陷阱研究進(jìn)展
        5 胞外陷阱與自身免疫疾病
        6 結(jié)語
第二篇 研究內(nèi)容
    第1章 賈第蟲誘導(dǎo)METs形成及成份鑒定
        1 材料
            1.1 主要試劑
            1.2 主要設(shè)備
            1.3 賈第蟲蟲株及細(xì)胞
            1.4 主要試劑配方
        2 方法
            2.1 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的制備與培養(yǎng)
            2.2 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞純度及ETs釋放能力的鑒定
            2.3 賈第蟲滋養(yǎng)體的培養(yǎng)和收集
            2.4 掃描電鏡觀察賈第蟲誘導(dǎo)的METs超微結(jié)構(gòu)
            2.5 間接免疫熒光檢測賈第蟲誘導(dǎo)的METs成份
        3 結(jié)果
            3.1 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞分離與鑒定
            3.2 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞ETs釋放能力的鑒定
            3.3 賈第蟲滋養(yǎng)體的體外純培養(yǎng)
            3.4 賈第蟲可誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生ETs結(jié)構(gòu)
            3.5 賈第蟲誘導(dǎo)的METs成份鑒定
        4 討論
        5 小結(jié)
    第2章 賈第蟲誘導(dǎo)的METs釋放的相關(guān)分子作用研究
        1 材料
            1.1 主要試劑
            1.2 主要設(shè)備
        2 方法
            2.1 METs釋放的動力學(xué)研究
            2.2 MAPK通路、MPO、Ca2+(SOCE)、NADPH oxidase在賈第蟲誘導(dǎo)METs釋放中的作用
            2.3 胞內(nèi)活性氧簇產(chǎn)生量和胞外乳酸脫氫酶釋放量的檢測
            2.4 數(shù)據(jù)分析
        3 結(jié)果
            3.1 賈第蟲誘導(dǎo)METs釋放呈劑量和時間依賴性
            3.2 MAPK通路蛋白對METs釋放的影響
            3.3 MPO、Ca²⁺ (SOCE)、NADPH oxidase對 METs釋放的影響
            3.4 胞內(nèi)活性氧簇及胞外乳酸脫氫酶檢測
        4 討論
        5 小結(jié)
    第3章 METs對賈第蟲滋養(yǎng)體的殺傷作用
        1 材料
            1.1 主要試劑
            1.2 主要設(shè)備
        2 方法
            2.1 細(xì)胞松弛素D對 METs釋放的影響
            2.2 METs作用對賈第蟲滋養(yǎng)體存活率的影響
            2.3 METs作用后賈第蟲滋養(yǎng)體形態(tài)變化觀察
            2.4 數(shù)據(jù)分析
        3 結(jié)果
            3.1 細(xì)胞松弛素D對 METs的釋放影響
            3.2 METs作用對賈第蟲滋養(yǎng)體的影響
        4 討論
        5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
導(dǎo)師簡介
作者簡介及科研成果
致謝



本文編號：4018389