為了更好地保護(hù)和開(kāi)發(fā)利用江口蘿卜豬,試驗(yàn)以0(出生時(shí)),2,4,10月齡江口蘿卜豬為研究對(duì)象,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)測(cè)定江口蘿卜豬不同生長(zhǎng)階段心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、胃、十二指腸、背最長(zhǎng)肌、腰大肌等9個(gè)器官組織中信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)基因相對(duì)表達(dá)量,以此探究STAT3基因在不同年齡江口蘿卜豬不同器官組織中的表達(dá)規(guī)律。結(jié)果表明:STAT3基因在脾臟、十二指腸和肺臟中表達(dá)量較高,為脾臟>十二指腸>肺臟,并且各月齡時(shí)STAT3基因在這3個(gè)組織中的表達(dá)量均顯著高于其他組織(P<0.05),其余組織間除腰大肌在0月齡和2月齡時(shí)表達(dá)量顯著低于其他組織之外均差異不大(P>0.05);同種組織不同月齡之間相比,腎臟、肝臟、胃、心臟中STAT3基因的表達(dá)量幾乎不隨月齡的增長(zhǎng)而改變,在背最長(zhǎng)肌、肺臟、十二指腸、脾臟以及腰大肌中,STAT3基因的表達(dá)量隨著月齡的增長(zhǎng)呈現(xiàn)上升趨勢(shì),其中在背最長(zhǎng)肌、十二指腸和腰大肌中呈現(xiàn)大幅上升趨勢(shì),各月齡之間存在顯著差異(P<0.05)。STAT3基因在江口蘿卜豬不同月齡、不同組織器官中呈現(xiàn)規(guī)律性表達(dá),說(shuō)明STA...

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【部分圖文】：

圖1 部分RNA電泳檢測(cè)結(jié)果

試驗(yàn)提取江口蘿卜豬各器官組織的總RNA,取部分RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)提取效果,結(jié)果見(jiàn)圖1。從圖1中可以清楚地看到28S、18S和5S各條帶清晰明亮且無(wú)拖帶現(xiàn)象,說(shuō)明RNA完整無(wú)降解。用超微量紫外分光光度計(jì)測(cè)定吸光度值,OD260/OD280值在1.8～2.0之間,說(shuō)明RN....

圖2 熒光引物PCR產(chǎn)物擴(kuò)增結(jié)果

對(duì)逆轉(zhuǎn)錄合成的cDNA進(jìn)行普通PCR擴(kuò)增,并采用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性,結(jié)果見(jiàn)圖2。從圖2中可以觀測(cè)到與預(yù)期片段大小一致的擴(kuò)增條帶,圖譜中條帶單一、明亮清晰,沒(méi)有非特異性產(chǎn)物和引物二聚體,說(shuō)明擴(kuò)增效果好,與預(yù)期效果一致。擴(kuò)增產(chǎn)物回收純化后克隆測(cè)序,測(cè)序結(jié)果與預(yù)期擴(kuò)....

圖3 β-actin基因的擴(kuò)增曲線與熔解曲線

用2-△△Ct法計(jì)算不同月齡江口蘿卜豬STAT3基因在腎臟、背最長(zhǎng)肌、肝臟、肺臟、十二指腸、脾臟、胃、心臟、腰大肌等9個(gè)器官組織中的相對(duì)表達(dá)量,并用單因素方差分析法檢驗(yàn)同月齡江口蘿卜豬不同器官組織之間STAT3基因表達(dá)的差異顯著性,結(jié)果見(jiàn)170頁(yè)彩圖5。圖4STAT3基因的擴(kuò)增....

圖4 STAT3基因的擴(kuò)增曲線與熔解曲線

圖3β-actin基因的擴(kuò)增曲線與熔解曲線由170頁(yè)彩圖5可以直觀地看到,STAT3基因在各器官組織中均有不同程度的表達(dá),在脾臟、十二指腸和肺臟中表達(dá)量較高,0月齡時(shí)在脾臟中的表達(dá)量顯著高于在十二指腸和肺臟中的表達(dá)量(P<0.05),2月齡時(shí)3個(gè)組織之間差異均顯著(P<0.05....

本文編號(hào)：4015257