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TGEV雙抗體夾心ELISA方法建立與膠體金免疫層析試紙條的制備

發(fā)布時(shí)間:2024-11-18 21:23
  豬傳染性胃腸炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus of swine,TGEV)主要引起豬傳染性胃腸炎(Transmissible gastroenteritis,TGE),TGE是一種急性、高度接觸性的腸道傳染病,主要引起仔豬嘔吐、嚴(yán)重腹瀉、脫水,尤其兩周齡以內(nèi)仔豬致死率可達(dá)100%。該病傳播迅速給養(yǎng)豬業(yè)帶來極大的損失。目前對(duì)于該病的檢測(cè)方法有多種,但多數(shù)適用于實(shí)驗(yàn)室診斷,缺少適用于現(xiàn)場(chǎng)的快速準(zhǔn)確檢測(cè)方法,以期在豬感染早期做出快速診斷,采取有效的防控措施來減少TGE爆發(fā)帶來的損失。 本實(shí)驗(yàn)主要用抗TGEV N蛋白單抗(MAb)和抗TGEV N蛋白多抗血清(PcAb)建立一種檢測(cè)TGEV雙抗體夾心ELISA方法。該方法選用N蛋白作為靶蛋白是因N蛋白為病毒核蛋白,具有高度保守性,在病毒中含量高,與其他病毒無交叉性反應(yīng),便于該方法準(zhǔn)確診斷,但由于N蛋白位于病毒內(nèi)部,如何從病毒中釋放出N蛋白是本實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵。經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究,研制出一種病毒N蛋白裂解液,其主要成分有SDS、Tris,實(shí)驗(yàn)證明將裂解液與病毒混合,4℃靜置30min,一抗為抗TGEV N蛋白單...

【文章頁數(shù)】:65 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1豬傳染性胃腸炎病毒粒子結(jié)構(gòu)模式

圖1豬傳染性胃腸炎病毒粒子結(jié)構(gòu)模式

1豬傳染性胃腸炎病毒粒子結(jié)構(gòu)模式Fig.1-1ModelofTGEV'SPellet性和理化特性細(xì)胞、豬睪丸細(xì)胞、唾液腺細(xì)胞[8,9]和管、小腸組織塊等分離病毒。初分離暫、輕微、不明顯和易被忽略。有的未然[11]。近年來,ST、PK15細(xì)胞系養(yǎng)細(xì)胞的TGEV可在傳....


圖2試紙條組裝模型

圖2試紙條組裝模型

圖2試紙條組裝模型Fig2ModeloftheImmunityColloidGoldStrip體金試紙條各種反應(yīng)條件的優(yōu)化及性能評(píng)價(jià)酸纖維素膜(NCM)的選擇illipore公司的AE98、AE99、HF135和HF180型號(hào)的NCM,在四種NC....


圖3-1純化抗豬傳染性胃腸炎病毒N蛋白單克隆抗體的SDS-PAGE電泳圖

圖3-1純化抗豬傳染性胃腸炎病毒N蛋白單克隆抗體的SDS-PAGE電泳圖

20化抗豬傳染性胃腸炎病毒N蛋白單克隆抗體的SDS(ku)2.親和層析法純化后單克隆抗體;3.辛酸-硫酸體;PAGEanalysisofpurifiedmonoclonalantibodyagainsteightmarker(ku);2.Purified....


圖3-1誘導(dǎo)表達(dá)的重組TGEVN蛋白的SDS-PAGE電泳圖

圖3-1誘導(dǎo)表達(dá)的重組TGEVN蛋白的SDS-PAGE電泳圖

圖3-1誘導(dǎo)表達(dá)的重組TGEVN蛋白的SDS-PAG標(biāo)準(zhǔn)(ku);2.未經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后重組菌菌體裂解物菌菌體裂解物Fig.3-1SDS-PAGEanalysisofrecombinantTGEVNweightmarker(ku);2.T....



本文編號(hào):4012183

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