近年來，維氏氣單胞菌（Aeromonas veronii,AV）已逐漸成為一種重要的人-獸-魚共患病原菌，其不但可以感染魚類，而且能夠感染包括人、狐貍等哺乳類在內(nèi)的多種動(dòng)物。維氏氣單胞菌已逐漸開始對(duì)人類健康和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展構(gòu)成威脅，應(yīng)當(dāng)引起我們的重視。目前國內(nèi)外關(guān)于維氏氣單胞菌毒力基因的研究并不多見，而且對(duì)其致病機(jī)理也知之甚少。本研究采用體內(nèi)誘導(dǎo)抗原技術(shù)（In vivo induced antigen technology, IVIAT）對(duì)狐貍源致病性維氏氣單胞菌CVCC3700（AV CVCC3700）的體內(nèi)誘導(dǎo)基因進(jìn)行篩選并鑒定。 首先構(gòu)建AV CVCC3700基因組表達(dá)文庫：提取基因組DNA，限制性內(nèi)切酶Sau3AⅠ隨機(jī)酶切，優(yōu)化酶切條件，酶切片段至合適大小，純化回收酶切片段；BamHⅠ酶切pET-30a/b/c三種表達(dá)載體，去磷酸化并回收；將基因組片段與載體連接，電轉(zhuǎn)化入DH5α中，檢測片段插入率及大��；提取重組質(zhì)粒，電轉(zhuǎn)化入表達(dá)菌BL21(DE3)，最終獲得庫容量為6.4×104的基因組表達(dá)文庫，且片段插入率約為97.5%，完全滿足試驗(yàn)要求。 然后收集并處理血清：將A...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    1.1 維氏氣單胞菌
    1.2 篩選細(xì)菌體內(nèi)誘導(dǎo)基因技術(shù)
    1.3 IVIAT 及其在動(dòng)物病原菌體內(nèi)誘導(dǎo)抗原基因篩選中的應(yīng)用
    1.4 研究目的及意義
第二篇 研究內(nèi)容
    第一章 AV CVCC3700 基因組表達(dá)文庫的構(gòu)建及鑒定
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 結(jié)果
        1.4 討論
        1.5 小結(jié)
    第二章 AV CVCC3700 體內(nèi)誘導(dǎo)抗原特異抗體的制備
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 結(jié)果
        2.4 討論
        2.5 小結(jié)
    第三章 AV CVCC3700 基因組表達(dá)文庫的篩選及鑒定
        3.1 材料
        3.2 方法
        3.3 結(jié)果
        3.4 討論
        3.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介
致謝



本文編號(hào)：4007879