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成纖維細胞有絲分裂同步化條件的摸索及HSF-2基因在絨山羊染色體中的定位分析

發(fā)布時間:2024-10-04 21:09
  目前對于絨山羊Y染色體相關(guān)基因的研究較少,被定位在絨山羊Y染色體上的功能基因更是未見報道。為了豐富絨山羊的基因圖譜,進一步擴大絨山羊的功能基因的定位,完善絨山羊Y染色體上的遺傳信息,本實驗選取了HSF-2基因,并對其進行定位。HSF-2基因主要在細胞循環(huán)、胚胎發(fā)育、細胞分化、生殖細胞的形成中發(fā)揮作用,對熱刺激信號有耐受性,同時對調(diào)控機體生長、發(fā)育、分化的信號更為敏感。因此,了解HSF-2的基因相關(guān)信息對絨山羊的選育具有重要意義。 實驗通過體外培養(yǎng)成纖維細胞,制作細胞的染色體核型,并對核型進行分析,確定染色體懸液制備的最優(yōu)條件。然后以HSF-2基因的質(zhì)粒DNA標記探針,與絨山羊的成纖維細胞染色體標本進行雜交,從而對絨山羊的HSF-2基因進行物理定位。 結(jié)果如下: (一)為了制備高質(zhì)量的染色體標本,獲得大量處于中期分裂相的細胞,對培養(yǎng)條件進行了摸索,結(jié)果如下: 1、未經(jīng)任何同步化處理,正常培養(yǎng)72h成纖維細胞,流式檢測G2/M期所占比例僅為0.18%。 2、運用秋水仙堿同步化處理的最適濃度是0.07ug/ml,最適作用時間是18h,得到的G2/M期最高比例為10...

【文章頁數(shù)】:44 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1內(nèi)蒙古絨山羊Fig.1InnerMongoliaCashmereGoat

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擇形成了品種[2]叫“溫暖全世界”,它是鄂爾多斯羊絨制品人引以為豪的本土品牌,這個品牌就是以該hmeregoat)主要分布于內(nèi)蒙古自治區(qū)西部爾市、阿拉善三盟市,1988年經(jīng)自治區(qū)檢狼山型、阿拉善型這三型都屬于絨、肉兼用自治區(qū)政府將三個類型的羊合并命名為內(nèi)蒙多風少雨而且干旱植....


圖2熱激轉(zhuǎn)錄因子家族成員的激活通路Fig.2Activationpathwayformembersoftheheatshocktranscriptionfactorfamily

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內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文體上的位置以及相關(guān)的功能調(diào)控的研究,這一研究成果對于絨山羊的選育意義。熱應激反應熱應激反應是指當周圍的環(huán)境溫度超過了人或者動物自身最舒適的溫度時物為了保護自身正常的代謝作用所做出的應激性的各種反應的總和。它是細列高度程序化的事件,熱應激反應機制在分子遺....


圖3第五代成纖維細胞(100倍鏡下觀察)

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內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文3.3.5顯微觀察及顯微照相實驗所用的兩種熒光染料是FITC和PI,F(xiàn)ITC的激發(fā)波長為492nm,發(fā)射波520nm,綠色,PI的激發(fā)波長為353nm,發(fā)射波長為420nm,紅色,在NikonE8光顯微鏡下,用濾光片B-2A(激....


圖4第八代成纖維細胞(100倍鏡下觀察)

圖4第八代成纖維細胞(100倍鏡下觀察)

以判斷絨山羊Y染色體上是否存在HSF-2基因。4結(jié)果4.1成纖維細胞的培養(yǎng)圖3第五代成纖維細胞(100倍鏡下觀察)Fig.3Thefifthgenerationoffibroblasts(100timesmicroscope)



本文編號:4007150

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