豬偽狂犬病,是由偽狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)導(dǎo)致的急性傳染病,主要表現(xiàn)為母豬繁殖障礙和仔豬神經(jīng)癥狀。偽狂犬病病毒屬于α皰疹病毒亞科水痘病毒屬,編碼70多種蛋白,按表達(dá)的時(shí)序性可分為立即早期、早期和晚期蛋白。IE180(Immediate Early Protein 180,ICP4)和EP0(Early Protein 0,ICP0)分別為立即早期和早期的主要調(diào)控蛋白,主要調(diào)控病毒前期蛋白的合成以及組裝,同時(shí)對(duì)病毒復(fù)制是必須的。除了這兩個(gè)蛋白外,UL48(VP16)、UL54(ICP27)和UL41(VHS)也是病毒在增殖過(guò)程中重要的反式作用因子。UL23基因是偽狂犬病病毒重要的毒力基因,其編碼的蛋白為病毒自身所需的胸苷激酶(Thymidine Kinase,TK),在病毒的核酸代謝中發(fā)揮重要作用。缺失TK基因可使病毒高度致弱,對(duì)敏感動(dòng)物不致死,所以一些商用弱毒活疫苗是TK基因缺失的。UL23基因在α皰疹病毒亞科中相對(duì)保守,其在級(jí)聯(lián)轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制方面報(bào)道很少。本研究通過(guò)對(duì)UL23基因的轉(zhuǎn)錄特點(diǎn)以及病毒蛋白和細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子對(duì)該基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控影響進(jìn)行研究,以便深入...

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1偽狂犬病病毒在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制周期（Pomeranzetal.,2005）

文L54。早期蛋白合成之后，DNA開(kāi)始復(fù)制，復(fù)制通DNA的合成表明PRV復(fù)制周期晚期的開(kāi)始和真白進(jìn)入細(xì)胞核，它們圍繞由UL26和UL26.5基因種蛋白質(zhì)組成，它們分別為UL19（VP5）、UL18因產(chǎn)物充當(dāng)基因組DNA的入口，同時(shí)UL32、U的切割和包....

圖1.2轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合體結(jié)構(gòu)（PtashneandGann1997）

碩士學(xué)位論文第一激素響應(yīng)元素HRE和核因子元素NFE。相對(duì)應(yīng)的，序列特異性DNA式作用因子，包括特異性蛋白-1（Sp1）、激活蛋白家族（AP-1）、CCAC/EBP）、類固醇受體（GR）和組織特異性轉(zhuǎn)錄因子（NF-κB）(DynanahtandTjian,1986....

圖2.1UL23基因5’RACE路線圖

1．將2.1.4中提取的RNA用DNase處理，消除產(chǎn)物中DNA對(duì)后續(xù)操作的影響，具體反應(yīng)體系表2.1：表2.1DNaseI處理體系Table2.1ThedigestionsystemofDNaseI成分體積10×DNaseIBuffe....

圖2.2轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)的鑒定以及在基因組中的位置示意圖

5．孵育對(duì)應(yīng)二抗，TBST洗滌6遍，每次5分鐘；6．加上底物進(jìn)行顯影操作。2.1.11PRV反式激活因子和細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子的Co-IP互作驗(yàn)證細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子PTBP-HA和Sp1-HA分別和對(duì)應(yīng)的PRV反式激活因子UL54-Flag、IE180-Flag和EP0....

本文編號(hào)：3994259