隨著哺乳動物遺傳與發(fā)育的深入研究,體外受精、體細胞核移植、誘導(dǎo)多能性干細胞和轉(zhuǎn)基因等生物技術(shù)迅速發(fā)展,動物卵子和胚胎因體外研究需求數(shù)量大規(guī)模増加,卵子與胚胎的長期、均衡供應(yīng)顯得非常重要,冷凍保存技術(shù)對解決這一問題提供了便利。特別是配子的冷凍保存,不僅可以跨越時間與空間的限制,提供充足的配子與胚胎來源,而且有利于優(yōu)良種質(zhì)資源的交流和生物多樣性的維持。但是,近年來的研究表明,玻璃化冷凍不僅會對細胞的細胞膜、線粒體等超微結(jié)構(gòu)造成損傷,還會對卵母細胞或者胚胎的DNA甲基化水平、組蛋白的修飾和印記基因的表達產(chǎn)生影響,阻礙胚胎的正常發(fā)育。白藜蘆醇是一種多酚類物質(zhì),具有多種生物活性,如抗氧化、抗腫瘤和抗衰老等作用。最近研究表明,白藜蘆醇還可在表觀遺傳修飾上調(diào)控基因的表達,參與基因組DNA甲基化和組蛋白修飾等。本研究使用Cryotop玻璃化冷凍方法,通過在對小鼠MII期卵母細胞的玻璃化冷凍液和解凍液中同時添加白藜蘆醇,旨在提高卵母細胞的冷凍效率和胚胎發(fā)育潛力,并對異常的表觀遺傳修飾加以改善。本研究使用TUNEL染色、免疫熒光染色和qRT-PCR等方法,分析了白藜蘆醇對冷凍后的MII期卵母細胞中DNA甲...

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3-1卵母細胞玻璃化冷凍及添加白藜蘆醇后對囊胚凋亡的影響，“*”表示差異顯著（P＜0.05）

圖3-1卵母細胞玻璃化冷凍及添加白藜蘆醇后對囊胚Figure3-1EffectofvitrificationofoocytesandadditiindicatessignificantdifferenA：冷凍及添加白藜蘆醇對囊胚凋亡的影響，B：囊胚A:E....

圖4-1卵母細胞冷凍及添加白藜蘆醇后對SIRT1表達水平的影響，“*”表示差異顯著（P＜0.05）

在相同條件下對SIRT1進行免疫熒光染色和qRT-PCR。結(jié)果如圖4-1所示：冷凍組的SIRT1基因表達水平顯著低于未冷凍組（P＜0.05），Res組的SIRT1基因表達水平與未冷凍組無顯著差異（P＞0.05）。24

圖4-2卵母細胞冷凍及添加白藜蘆醇后對H3K9ac水平的影響，“*”表示差異顯著（P＜0.05）

圖4-2卵母細胞冷凍及添加白藜蘆醇后對H3K9ac水平的影響，“*”表示差異顯著（P＜0Figure4-2EffectoffreezingandadditionofresveratrolontheexpressionlevelofH3K9ac....

圖4-3卵母細胞冷凍及添加白藜蘆醇后對5mC水平的影響，“*”表示差異顯著（P＜0.05）

圖4-2卵母細胞冷凍及添加白藜蘆醇后對H3K9ac水平的影響，“*”表示差異顯著（P＜0.05）Figure4-2EffectoffreezingandadditionofresveratrolontheexpressionlevelofH3K....

本文編號：3980192