Orexin是一種通過其受體(OX1R和OX2R)發(fā)揮功能的神經(jīng)肽,被分為Orexin A和Orexin B兩種。研究發(fā)現(xiàn)Orexin的分布非常廣泛,參與調(diào)節(jié)多種生理功能,如對內(nèi)分泌、生殖活動的調(diào)控和調(diào)節(jié)攝食與能量平衡、以及對藥物成癮的影響等。 為了探索不同濃度Orexin A在不同時間對綿羊卵巢黃素化顆粒細胞中StAR.CYP11和3β-HSD (黃體功能相關基因)的影響,本實驗首先對綿羊卵巢顆粒細胞體外培養(yǎng)使其轉變成黃素化顆粒細胞,即對顆粒細胞添加LH(2.5IU/ml)、 FSH(2.5IU/ml)、E2(lμg/mL)后培養(yǎng)24h。而后再對該黃素化顆粒細胞添加不同劑量(0.05,0.2,0.5和1μg/mL) Orexin A,分別于刺激后0、2、6、12h和24h提取細胞總RNA,運用qPCR方法檢測了Bax/Bcl-2、OX1R以及黃體化相關基因CYP11、3β-HSD、StAR mRNA表達量的變化。結果顯示,添加Orexin A后,與對照組相比,Bax/Bcl-2的值顯著升高,說明Orexin A可以促進黃素化顆粒細胞凋亡；與對照組相比,2h時1μg/ml Orexin...

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【學位級別】：碩士

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圖1-1preproorexin的基因結構⑴]

圖1-1preproorexin的基因結構⑴]A:preproorexin;B:preproorexinmRNA;a:信號狀mRNA;b:OrexinAmRNA;c:OrexinBmRNA；▲：信號肽被切斷的位點.Fig.1-1Thegene....

圖1-3中樞神經(jīng)系統(tǒng)Orexin纖維的投射[12】Fig.1-3ProjectionofOrexinimmunoreactivefibersincentralnervoussystem

于中樞神經(jīng)系統(tǒng)下丘腦內(nèi)" 圖1-3""所示為Orexin纖維在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的映射。對于不同種屬的動物來說，Orexin的分布既有相似之處也存在一定種屬

圖1-4黃體的結構

(Granulosaluteincell)和膜黃體細胞(Thecaluteincell)，見圖1-4。

圖3-1原代錦羊顆粒細胞及OrexinA處理的黃素化顆粒細胞Fig.3.1PrimaryovinegranulosecellsandluteinizedgranulosacellstreatedwithOrexinA注：A,a,a?：初分離顆粒細胞4X，lOX,20X；B,b,b'：培養(yǎng)24h4X,lOX,20X顆粒細胞：C,c,c':OrexinA

3.1綿羊顆粒細胞的培養(yǎng)及黃素化顆粒細胞的轉變光學顯微鏡下觀察到，從綿羊卵泡中初分離出的顆粒細胞呈現(xiàn)為球形（圖3-1A,a，a’），培養(yǎng)24h后細胞以單層貼壁形式生長（圖3-lB，b，b’）_，多數(shù)呈現(xiàn)出梭行或不規(guī)則三角形。當細胞生長至80%?90%，出現(xiàn)聚集生長現(xiàn)象。添加Or....

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