奶牛乳房炎(Bovine mastitis,BM)是一種由病原微生物侵襲所造成的復(fù)雜的奶牛乳腺綜合征疾病,其中亞臨床型乳房炎尤為高發(fā)。亞臨床型乳房炎在感染過(guò)程中無(wú)臨床癥狀表現(xiàn),因此給疾病的診斷和治療帶來(lái)了極大的困難。該病不僅造成了產(chǎn)奶量的巨大損失、養(yǎng)殖業(yè)經(jīng)濟(jì)效益的降低,同時(shí)也對(duì)動(dòng)物和人類的健康造成了很大的影響。為了能夠?qū)ふ业揭环N高效、敏感和特異的檢測(cè)方法,提高對(duì)奶牛乳房炎發(fā)病情況及致病微生物的診斷率,本研究參照GenBank發(fā)表的序列,在大腸桿菌、無(wú)乳鏈球菌和金黃色葡萄球菌各自保守的16-23s rRNA區(qū)域及白色念珠菌的18s rRNA區(qū)域設(shè)計(jì)了4對(duì)特異性引物,建立了大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、無(wú)乳鏈球菌和白色念珠菌等4種乳房炎主要致病菌多重PCR檢測(cè)方法,同時(shí)本實(shí)驗(yàn)采集40份臨床奶樣,對(duì)病原菌進(jìn)行了分離、培養(yǎng)及多重PCR檢測(cè)驗(yàn)證了檢測(cè)方法的可行性,取得結(jié)果如下:(1)對(duì)甘肅省蘭州市2家奶牛場(chǎng)采集的40份奶樣進(jìn)行了細(xì)菌學(xué)檢測(cè)。共檢出4份含有金黃色葡萄球菌的奶樣,7份含有無(wú)乳鏈球菌的奶樣,3份含有白色念珠菌的奶樣,5份含有大腸桿菌的奶樣;檢出率為金黃色葡萄球菌10%、大腸桿菌12.5%、...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖3多重PCR敏感性Figure3Sensitivityofthemultiplex-PCRM：DL2000DNAMarker；1∶1×107CFU/mL；2∶1×106CFU/mL；3∶1×105CFU/mL；4∶1×104CFU/mL；5∶1×103CFU/mL；6∶1×102

第1期丁天翊等：快速檢測(cè)奶牛乳房炎四種病原菌的多重PCR方法的建立及應(yīng)用2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp1319bp730bp663bp406bpM1234567M圖3多重PCR敏感性Figure3Sensitivityofthemultiplex....

圖2單重PCR敏感性Figure2SensitivityofPCRA：大腸桿菌單重PCR敏感性；B：白色念珠菌單重PCR敏感性；C：金黃色葡萄球菌單重PCR敏感性D：無(wú)乳鏈球菌單重PCR敏感性

第1期丁天翊等：快速檢測(cè)奶牛乳房炎四種病原菌的多重PCR方法的建立及應(yīng)用2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp1319bp730bp663bp406bpM1234567M圖3多重PCR敏感性Figure3Sensitivityofthemultiplex....

圖2.1單重PCR敏感性A:白色念珠菌單重PCR敏感性；B：大腸桿菌單重PCR敏感性；C：金黃色葡萄球菌單重PCR敏感性D：無(wú)乳鏈球菌單重PCR敏感性;M:DL2000DNA765432

CD圖2.1單重PCR敏感性A:白色念珠菌單重PCR敏感性；B：大腸桿菌單重PCR敏感性；C：金黃色葡萄球菌單重PCR敏感性D：無(wú)乳鏈球菌單重PCR敏感性;M:DL2000DNAmarker;1:107CFU/mL;2:106CFU/mL;3:105....

圖2.2多重PCR特異性檢測(cè)M:DL2000marker；1：陰性對(duì)照；2：大腸桿菌；3：白色念珠菌；4：金黃色葡萄球菌；5：

圖2.2多重PCR特異性檢測(cè)M:DL2000marker；1：陰性對(duì)照；2：大腸桿菌；3：白色念珠菌；4：金黃色葡萄球菌；5：無(wú)乳鏈球菌；6：金黃色葡萄球菌+大腸桿菌+白色念珠菌；7：金黃色葡萄球菌+白色念珠菌+無(wú)乳鏈球菌；8：金黃色葡萄球菌+大腸桿菌+無(wú)乳鏈球菌；9：....

本文編號(hào)：3975744