豬圓環(huán)病毒2型(Porcine circovirus type2, PCV2)是豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征(Postweaning multisystemic wasting syndrome, PMWS)和其他豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾病的原發(fā)性病原。免疫預防是控制該類疾病的重要手段之一。本研究成功構(gòu)建可表達PCV2空衣殼粒子的家蠶表達體系,并利用表達產(chǎn)物制備出PCV2Cap蛋白滅活疫苗,利用小鼠和豬分析了疫苗的免疫原性。 采集臨床疑似斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征發(fā)病仔豬的淋巴結(jié)等臟器,采用PCR技術(shù)檢測PCV2,陽性樣本用PK-15細胞進行病毒分離。經(jīng)間接免疫熒光、免疫過氧化物酶單層細胞試驗(IPMA)、免疫電鏡觀察對分離物進行鑒定。最終分離出5株P(guān)CV2,分別命名為PCV2-1、PCV2-2、PCV2-3、PCV2-4和PCV2-5。 首先將去核定位信號的Cap基因克隆到大腸桿菌表達載體,分離純化目的蛋白,經(jīng)質(zhì)譜鑒定后用于抗體制備�？贵w效價達到1：3200以上者,可用于真核表達Cap蛋白產(chǎn)物的檢測。用PCR擴增PCV2Cap基因,或?qū)⒔?jīng)人工改造構(gòu)建Cap突變體基因,克隆到家蠶桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體,經(jīng)...

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
第一章 引言
    1.1 豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾病
    1.2 豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾病的預防與控制
    1.3 研究的目的和意義
    1.4 研究的內(nèi)容與技術(shù)路線
第二章 豬圓環(huán)病毒2型毒株的分離鑒定
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
    2.3 結(jié)果與分析
    2.4 討論
第三章 豬圓環(huán)病毒2型Cap蛋白在家蠶中的表達與鑒定
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
    3.3 結(jié)果與分析
    3.4 討論
第四章 豬圓環(huán)病毒2型Cap蛋白亞單位疫苗的制備
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
    4.3 結(jié)果與分析
    4.4 討論
第五章 豬圓環(huán)病毒2型Cap蛋白亞單位疫苗免疫效力試驗
    5.1 前言
    5.2 材料與方法
    5.3 結(jié)果與分析
    5.4 討論
第六章 結(jié)論與創(chuàng)新點
    6.1 結(jié)論
    6.2 創(chuàng)新點
第七章 文獻綜述
    7.1 豬圓環(huán)病毒2型疫苗國內(nèi)外的研究與應用
    7.2 家蠶表達外源蛋白在國際上的研究與應用
    7.3 家蠶表達外源蛋白的優(yōu)點
參考文獻
附件
致謝
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