發(fā)布時間：2024-05-12 11:55

　　鴨新城疫是由新城疫病毒引起的一類急性、高度接觸性和致死性的傳染病。該病以腹瀉和神經(jīng)癥狀，腺胃黏膜局灶性出血或潰瘍，腸道黏膜棗核樣出血及胰腺或脾臟有白色壞死點為主要特征。新城疫病毒對水禽的致病力在逐漸增強，水禽不僅是新城疫的宿主和儲存庫，而且成為新城疫病毒的易感禽類。新城疫病毒長期以來一直是危害我國養(yǎng)禽業(yè)的主要病原之一。新城疫病毒主要引起雞的新城疫、鵝源新城疫、鴿源新城疫等，但近年來新城疫病毒感染并致病的宿主范圍有擴大的趨勢。且有報道顯示，不同禽源的新城疫病毒分離株的毒力及其相關毒力基因、免疫原活性和致病性等生物學特性并非完全一致。所以進行對新城疫各種不同禽源分離毒株的主要生物學特性的研究，有利于探索該病毒在不同禽類之間感染與傳播的機制、病毒的進化機制及其疾病的流行病學調查等方面的研究。 近年來，鴨新城疫的感染呈上升趨勢，將對我國的養(yǎng)鴨業(yè)產(chǎn)生巨大危害。加強對鴨新城疫病毒的研究，對預防和控制鴨新城疫的流行，保護和促進我國養(yǎng)鴨業(yè)的健康發(fā)展具有重要意義。 本研究是從濟南地區(qū)鴨病料中分離得到三株鴨新城疫病毒。通過RT-PCR技術對這三株鴨新城疫病毒的F基因進行擴增，并進行序列測定，分析測序結果。...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
符號說明
中文摘要
ABSTRACT
1 前言
    1.1 鴨新城疫病毒的概述
        1.1.1 病毒的分類、大小與形態(tài)特征
        1.1.2 理化特性
        1.1.3 培養(yǎng)特性
        1.1.4 流行病學
        1.1.5 臨床癥狀及病理變化
        1.1.6 病毒的致病機理
        1.1.7 實驗室診斷
            1.1.7.1 血凝抑制（HI）試驗
            1.1.7.2 RT-PCR 技術
            1.1.7.3 REAL-TIME PCR
            1.1.7.4 酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）
            1.1.7.5 瓊脂擴散試驗（AGP）
            1.1.7.6 熒光抗體技術（IF）
            1.1.7.7 核酸探針檢測技術
            1.1.7.8 單克隆抗體技術
    1.2 NDV 的基因組與 F 蛋白的結構和功能
        1.2.1 NDV 的基因組
        1.2.2 F 蛋白的結構和功能
    1.3 NDV 的毒力與致病性
    1.4 鴨 NDV 的防制
        1.4.1 鴨新城疫的預防
            1.4.1.1 加強飼養(yǎng)管理和衛(wèi)生消毒工作
            1.4.1.2 做好疫苗免疫
        1.4.2 鴨新城疫的治療
    1.5 本研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 病料與試驗動物
        2.1.2 主要儀器與試劑
        2.1.3 引物設計
    2.2 方法
        2.2.1 病毒的分離傳代
        2.2.2 血凝性試驗（HA）和血凝抑制（HI）試驗
            2.2.2.1 紅細胞懸液的制備
            2.2.2.2 HA 試驗
            2.2.2.3 四單位病毒的制備
            2.2.2.4 HI 試驗
        2.2.3 雞胚半數(shù)感染量（EID50）的測定
        2.2.4 雞胚平均致死時間（MDT）的測定
        2.2.5 1日齡雛雞腦內接種致病指數(shù)（ICPI）的測定
        2.2.6 動物致病性試驗
        2.2.7 RT-PCR 擴增 F 基因及序列分析
            2.2.7.1 病毒總 RNA 的提取
            2.2.7.2 RT-PCR 反應
            2.2.7.3 瓊脂糖凝膠電泳
            2.2.7.4 PCR 產(chǎn)物的純化回收
            2.2.7.5 PCR 純化回收產(chǎn)物與 PMD 18-T 載體的連接反應
            2.2.7.6 DH5Α感受態(tài)細胞的制備
            2.2.7.7 轉化反應
            2.2.7.8 質粒 DNA 的制備
            2.2.7.9 陽性重組質粒的酶切鑒定
            2.2.7.10 序列測定及分析
3 結果與分析
    3.1 病毒的分離與鑒定
    3.2 ELD50、MDT 及 ICPI 的測定結果
    3.3 致病性試驗
    3.4 F 基因 RT-PCR 擴增
    3.5 重組質粒的酶切鑒定結果
    3.6 測序結果及序列分析
4 討論
5 結論
6 創(chuàng)新點
參考文獻
致謝
攻讀專業(yè)學位期間發(fā)表的文章



本文編號：3971293