我國作為一個農(nóng)業(yè)大國,每年農(nóng)作物秸稈產(chǎn)量驚人,由于缺少有效的解決方案,存在地區(qū)性、季節(jié)性、結(jié)構(gòu)性的秸稈過剩等問題。農(nóng)村的秸稈焚燒甚至引起了嚴重的污染空氣,而且由于有機質(zhì)沒有歸還土壤,造成土壤板結(jié),肥力減退。秸稈的飼料化加工有利于高秸稈利用率、轉(zhuǎn)化率及其相關(guān)經(jīng)濟效益,而秸稈的青貯處理是其飼料化過程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。在反芻動物的飼料中添加青貯秸稈,可以有效高反芻動物的對飼料的干物質(zhì)攝入量,促進粗飼料的瘤胃轉(zhuǎn)化率。然而,反芻動物的瘤胃是pH中性環(huán)境,青貯秸稈中含有大量的乳酸會對反芻動物的健康造成不利影響。乳酸氧化酶是一種能夠?qū)⑷樗徂D(zhuǎn)化為丙酮酸的生物酶,因此在飼喂前添加可以有效降低青貯秸稈中的乳酸含量,并且所產(chǎn)生的丙酮酸能為大多數(shù)瘤微生物進一步利用。同時這一反應(yīng)過程消耗氧氣,這將有利于瘤胃形成厭氧環(huán)境。因此,本研究通過微生物的富集分離技術(shù)與分子生物學(xué)方法,研究了乳酸氧化酶強化秸稈青貯處理的過程與機制。主要研究結(jié)果如下:(1)從安格斯肉牛瘤胃液中富集分離篩選得到了一株兼性厭氧細菌-鶉雞腸球菌,并從中克隆得到了乳酸氧化酶(EgLOD)的基因,序列分析表明:EgLOD基因全長1104kb,編碼368個氨...

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【學(xué)位級別】：碩士

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圖2-1乳酸氧化酶基因序列圖

圖2-1乳酸氧化酶基因序列圖Fig2-1Thegenomesequencediagramoflactateoxidase2.3.3乳酸氧化酶基因克隆

圖2-2EgLOD基因擴增Fig2-2PCRamplificationofEgLOD

證結(jié)果如圖2-2所示，1200bp左右，與所預(yù)結(jié)果顯示，所得到的片這個乳酸氧化酶基因MG547691。經(jīng)Signa

圖3-1一輪overlapPCR產(chǎn)物Fig3-1FirstPCRamplificationofEgLOD

圖3-1一輪overlapPCR產(chǎn)物Fig3-1FirstPCRamplificationofEgLOD直接轉(zhuǎn)化，菌落PCR驗證顯示EGLOG成功連接達載體上的EgLOD在BL21及JM109中均能夠成BL21表達宿主本身就含有乳酸氧化酶，能夠產(chǎn)生....

圖3-2EgLODSDS-PAGE蛋白電泳圖

1FirstPCRamplificationof落PCR驗證顯示EGLEgLOD在BL21及JM1主本身就含有乳酸氧化而言，乳酸氧化酶在JL，因此選擇在BL21中-EgLOD和BL21-30a-E時，但經(jīng)過純化后所得活；而后者僅需與鎳珠透液與洗脫液中酶活....

本文編號：3965800