肉孢子蟲是家畜常見的胞內(nèi)寄生原蟲,其導(dǎo)致的肉孢子蟲病常致使宿主生長發(fā)育緩慢,嚴(yán)重時引起死亡。我國是牦牛出欄量最大的國家,其主要出產(chǎn)在青藏高原,是當(dāng)?shù)啬撩裰饕慕?jīng)濟(jì)來源。目前,牦牛體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的肉孢子蟲有2種,牦牛犬肉孢子蟲(Sarcocystis poephagicanis Wei,1983)和牦牛肉孢子蟲(S.poephagi Wei,1983),但原始描述簡單,且沒有提供任何分子數(shù)據(jù)。本實(shí)驗(yàn)利用形態(tài)學(xué)和4種分子標(biāo)記(18S rDNA、28S rDNA、線粒體COX1基因和ITS1基因)對采自西藏地區(qū)(拉薩市、那曲市和日喀則市)的牦牛肉孢子蟲的自然感染情況、種類和分子系統(tǒng)學(xué)進(jìn)行了研究。本次共采集了 101頭牦牛的肌肉樣品,鏡檢后發(fā)現(xiàn)肉孢子蟲的自然感染率為63.37%(64/101)。基于形態(tài)學(xué)和4種分子標(biāo)記特征,共鑒定出5種肉孢子蟲:人肉孢子蟲(S.hominis Raillietand Lucet,1891)、哈氏肉孢子蟲(S.heydorni Dubey,2015)、毛形肉孢子蟲(S.hirsuta Moule,1888)、牦牛犬肉孢子蟲(S.poephagicanis)和牦牛未定種...

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 肉孢子蟲的發(fā)現(xiàn)及分類地位
    2 肉孢子蟲的生活史
    3 肉孢子蟲的致病性
    4 肉孢子蟲的分類標(biāo)準(zhǔn)
        4.1 肉孢子蟲的包囊形態(tài)
        4.2 宿主特異性
        4.3 遺傳標(biāo)記的分子特征
    5 牦牛肉孢子蟲的研究背景和意義
        5.1 牦牛肉孢子蟲的國內(nèi)外研究現(xiàn)狀
        5.2 研究意義
第二章 牦牛肉孢子蟲的形態(tài)學(xué)和分子系統(tǒng)學(xué)研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 牦牛肌肉樣品采集
        2.2 牦牛肌肉樣品鑒定
        2.3 肉孢子蟲包囊的分離和光鏡觀察
        2.4 肉孢子蟲包囊的透射電鏡觀察
        2.5 分子實(shí)驗(yàn)試劑及實(shí)驗(yàn)儀器
            2.5.1 實(shí)驗(yàn)試劑及其配置方法
            2.5.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.6 分子實(shí)驗(yàn)方法
            2.6.1 單包囊DNA提取
            2.6.2 目的基因片段PCR擴(kuò)增
            2.6.3 PCR產(chǎn)物的回收和純化
            2.6.4 目的片段的連接和轉(zhuǎn)化
            2.6.5 陽性克隆檢測
            2.6.6 序列測定
            2.6.7 序列分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 牦牛肌肉樣品Cytb基因鑒定結(jié)果
        3.2 自然感染率調(diào)查
        3.3 牦牛肉孢子蟲包囊形態(tài)
            3.3.1 人肉孢子蟲(S.hominis)
            3.3.2 哈氏肉孢子蟲(S.heydorni)
            3.3.3 毛形肉孢子蟲(S. hirsuta)
            3.3.4 牦牛未定種肉孢子蟲(Sarcocystis sp.)
            3.3.5 耗牛犬肉孢子蟲(S.poephagicanis)
        3.4 牦牛肉孢子蟲的基因序列分析
            3.4.1 牦牛肉孢子蟲的18S rDNA序列分析
            3.4.2 牦牛肉孢子蟲的28S rDNA序列分析
            3.4.3 牦牛肉孢子蟲的COX1基因序列分析
            3.4.4 牦牛肉孢子蟲的ITS1基因序列分析
        3.5 牦牛肉孢子蟲的基因序列的遺傳距離分析
        3.6 牦牛肉孢子蟲基于4種基因序列的分子系統(tǒng)學(xué)分析
            3.6.1 牦牛肉孢子蟲基于18S rDNA序列的分子系統(tǒng)學(xué)分析
            3.6.2 牦牛肉孢子蟲基于28S rDNA序列的分子系統(tǒng)學(xué)分析
            3.6.3 牦牛肉孢子蟲基于線粒體COX1基因序列的分子系統(tǒng)學(xué)分析
            3.6.4 牦牛肉孢子蟲基于ITS1基因序列的分子系統(tǒng)學(xué)分析
    4 討論
    5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間完成的科研成果
致謝



本文編號：3936421