動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育是一系列復(fù)雜而精細(xì)的生物代謝過(guò)程，這一過(guò)程的調(diào)控機(jī)制一直是國(guó)內(nèi)外的研究熱點(diǎn)。西藏小型豬和巴馬香豬是我國(guó)珍貴的小型豬種質(zhì)資源，但目前小型豬的生長(zhǎng)發(fā)育機(jī)制及矮小性狀形成的機(jī)理尚不清楚。在動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)控系統(tǒng)中，各因素對(duì)生長(zhǎng)的調(diào)節(jié)主要是通過(guò)神經(jīng)內(nèi)分泌生長(zhǎng)激素軸（GH-IGF軸）實(shí)現(xiàn)的，其中，胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6（IGFBP-6）因其結(jié)構(gòu)與功能的特點(diǎn)，以及與胰島素樣生長(zhǎng)因子2（IGF-2）較強(qiáng)的親和力而備受關(guān)注。 本試驗(yàn)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法，對(duì)不同生長(zhǎng)時(shí)期的西藏小型豬，巴馬香豬和軍牧1號(hào)白豬的不同組織中IGFBP-6基因mRNA表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)，利用直接測(cè)序法對(duì)西藏小型豬，巴馬香豬，軍牧1號(hào)白豬，東北野豬，大白豬的IGFBP-6基因的啟動(dòng)子區(qū)及部分基因序列進(jìn)行了突變位點(diǎn)的篩查和SNPs位點(diǎn)的連鎖分析，并對(duì)啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行了預(yù)測(cè)和分析，以期分析IGFBP-6基因的表達(dá)及SNPs對(duì)小型豬體長(zhǎng)性狀的影響及作用機(jī)制。為進(jìn)一步研究IGFBP-6的作用機(jī)制，設(shè)計(jì)并構(gòu)建了小鼠IGFBP-6基因的shRNA載體，轉(zhuǎn)染細(xì)胞，下調(diào)IGFBP-6的表達(dá)量，MTT法檢測(cè)細(xì)胞...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1總RNA瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果

1.1總RNA瓊脂糖凝膠電泳結(jié)．DNAMarker2000；1、2．總RN.1.1AgarosegelelectrophoresisoftoM.DNAMarker2000;1,2.totalRNACR引物檢測(cè)結(jié)果-actin基因?qū)崟r(shí)熒光定量....

圖1.2熒光定量引物擴(kuò)增產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果

1.1總RNA瓊脂糖凝膠電泳結(jié)M．DNAMarker2000；1、2．總RNe.1.1AgarosegelelectrophoresisoftotM.DNAMarker2000;1,2.totalRNACR引物檢測(cè)結(jié)果β-actin基因?qū)崟r(shí)....

圖1.3IGFBP-6基因和β-actin基因?qū)崟r(shí)熒光定量PCR溶解曲線和擴(kuò)增曲線

P-6基因和β-actin基因?qū)崟r(shí)熒光定量PCR溶解曲-6基因溶解曲線；B．IGFBP-6基因擴(kuò)增曲線；C．β-actiD．β-actin基因擴(kuò)增曲線Real-timePCRamplificationcurvesandmeltingcurvgenea....

圖2.1豬基因組DNA凝膠電泳結(jié)果

結(jié)合位點(diǎn)的預(yù)測(cè)與分析。分析Ps位點(diǎn)進(jìn)行基因定位及基因型分位點(diǎn)進(jìn)行了χ2分析，p<0.05定義基因連鎖及單倍型分析。結(jié)果A提取試劑盒，對(duì)5個(gè)品種豬2提取部分結(jié)果如圖2.1，可見(jiàn)基因及RNA污染，質(zhì)量較好，可作為

本文編號(hào)：3936342