家豬通過長期的人工飼養(yǎng)及篩選,其產(chǎn)仔數(shù)遠遠高于野豬,而卵泡的發(fā)育與凋亡是決定產(chǎn)仔數(shù)的重要因素之一。在前期實驗中,我們期待通過分子生物學(xué)技術(shù)找到這些被人工篩選的基因。使用2DE-DIGE-MS技術(shù)尋找家豬和野豬卵巢組織的差異蛋白,VDAC2是其中之一,并且在家豬卵巢中表達量高于野豬。本研究在此基礎(chǔ)上深入探討VDAC2在DNA水平和蛋白水平上的調(diào)控機制。 VDAC2(電壓依賴性陰離子通道蛋白)是廣泛分布于所有真核生物線粒體外膜的一種豐富蛋白,是VDAC家族成員之一。當(dāng)細胞受到應(yīng)激反應(yīng)時,VDAC2孔道可以發(fā)生閉合從而導(dǎo)致線粒體膜通透性發(fā)生改變,釋放細胞色素C等細胞凋亡因子最終導(dǎo)致細胞凋亡。很多證據(jù)表明VDAC2對線粒體和細胞功能的調(diào)節(jié)非常重要,目前對VDAC2研究的熱點是VDAC2在細胞凋亡中的地位以及它在精子運動能力和受精能力上的作用。 為確定VDAC2是否與卵子發(fā)生相關(guān),對出生后各個時期小鼠卵巢RNA和蛋白進行RT-PCR和Western blot定量實驗,發(fā)現(xiàn)VDAC2的表達與小鼠出生后卵巢發(fā)育呈現(xiàn)相關(guān)趨勢,并進一步通過免疫熒光進行了證實。免疫熒光的結(jié)果發(fā)現(xiàn)盡管在出生后兩天的卵巢中V...

【文章頁數(shù)】：128 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1-1眾多基因調(diào)控印子發(fā)生過程，圖片引自（JagarlamudiandRajkovic,2011)

限的空間內(nèi)，使得卵細胞保持在靜止的分裂相期，直到受到生長刺激才會發(fā)生分裂(Erickson，1966)。促使原始卵泡形成的調(diào)控原因現(xiàn)在還清楚。如圖1-1所示，眾多基因參與調(diào)控卵子發(fā)生和卵泡的形成。Oct4,Hmog,Ztx,m,m：, Figii.L_,"aim.Somi,....

圖1-2印泡的發(fā)育，圖片引自（Pictonetal.，1998)

續(xù)分裂卻被顆粒細胞所抑制著(PincusandEnzmann，1935)。到了卵泡破裂時，卵母細胞才開始進入第一次減數(shù)分裂中期，為后面的排卵和受精做準備。如圖1-2所示，卵泡發(fā)育的分類從原始卵泡到初級卵泡再到次級卵泡，最后形成竇狀卵泡。觀察發(fā)現(xiàn)，由于基因缺失會導(dǎo)致哨齒動物卵母....

圖I-3人類不同類型卵母細月色中線粒?

在人類卵細胞在成熟排卵前，也具有同樣的mtDNA短時間大量復(fù)制。圖1-3顯示了人類各個時期的卵母細胞中線粒體數(shù)量。有些患者的卵細胞+能進行mtDNA短時間大量復(fù)制，這會對卵細胞后續(xù)發(fā)育產(chǎn)生負面影響。這些結(jié)果具有直接的臨床意義，因為不孕不育患者她們的卵細胞發(fā)育緩慢，或者不能受精，或....

圖1-4VDACl蛋白的三維結(jié)構(gòu)圖，VDAC1蛋白由19個p折疊和位于N末端的螺旋結(jié)構(gòu)形成一個桶狀孔道結(jié)構(gòu)，圖片引自（Sampsoneta1.,1997;Shoshan-Barmatzeta1.,2010)

圖1-4VDACl蛋白的三維結(jié)構(gòu)圖，VDAC1蛋白由19個p折疊和位于N末端的螺旋結(jié)構(gòu)形成一個桶狀孔道結(jié)構(gòu)，圖片引自（Sampsoneta1.,1997;Shoshan-Barmatzeta1.,2010)在哺乳動物VDAC亞型分析研究中，VDACl表現(xiàn)出預(yù)....

本文編號：3922489