為了解黑龍江地區(qū)部分規(guī)�；鰻倥８篂a性大腸桿菌毒力基因和耐藥基因分布情況,篩選敏感藥物以及分析腐殖酸鈉對牛源致病性大腸桿菌的防治作用,本研究收集了40份病料,通過分離純化、染色鏡檢、生化鑒定以及分子生物學的方法對分離菌進行鑒定;采用PCR技術(shù)進行毒力基因和耐藥基因的檢測;采用K-B法進行藥敏檢測;利用稀釋平板計數(shù)法研究不同濃度腐殖酸鈉對大腸桿菌的抑制效果;腐殖酸鈉灌胃小鼠研究其對攻毒小鼠的保護作用。結(jié)果顯示,共分離出牛源大腸桿菌30株;其中25株檢出毒力基因,在檢測的10種毒力基因中,有8種毒力基因被檢出,檢出率達83.3%,同時還存在多種毒力基因組合;在檢測的7種耐藥基因中bla_TEM基因檢出率最高,為100%,bla_SHV基因最低,為13.3%,其他耐藥基因檢出率也較高;藥敏試驗結(jié)果顯示,30株分離菌對美羅培南最為敏感,其次為阿米卡星;稀釋平板計數(shù)結(jié)果顯示,5%腐殖酸鈉的抑菌效果優(yōu)于其他濃度;攻毒試驗結(jié)果顯示,腐殖酸鈉能明顯提高攻毒小鼠的存活率。本研究對該地區(qū)抗菌藥物的合理使用以及腐殖酸鈉的臨床應用提供了依據(jù)。

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【部分圖文】：

圖1大腸桿菌分離鑒定

將采集的病料接種于MAC培養(yǎng)基中培養(yǎng)(圖1A),將符合大腸桿菌特征的菌落進行EMB培養(yǎng)基篩選,可見帶金屬光澤的紫黑色菌落(圖1B);鏡下形態(tài)為粉紅色短桿狀(圖1C),符合大腸桿菌的生長特征,初步分離出30株疑似大腸桿菌。利用細菌全自動微生物鑒定系統(tǒng)對30株疑似菌株進行生化鑒定,結(jié)....

圖3部分菌株毒力基因PCR檢測

應用PCR技術(shù)對30株大腸桿菌的10種毒力基因進行檢測,結(jié)果顯示有25株攜帶毒力基因,除bfpA基因和F18基因外,其他毒力基因均被檢出,其中F17基因檢出率最高(43.3%,13/30),irp2基因檢出率最低(10%,3/30)(圖3和表3)。隨后,對檢出攜帶毒力基因的大腸桿....

圖425株大腸桿菌攜帶多種毒力基因情況

表330株牛源大腸桿菌毒力基因的檢出率Table3Detectionrateofvirulencegenesof30E.coliisolatedfromcattle毒力基因Virulencegenes檢出數(shù)Numberofdetection....

圖530株牛源大腸桿菌多重耐藥情況

表530株牛源大腸桿菌耐藥基因的檢出率Table5Detectionrateofdrug-resistantgenesof30E.coliisolatedfromcattle藥物分類Drugtypes耐藥基因Resistancegenes檢出數(shù)....

本文編號：3919876