新生兒的Fc受體(FcRn)對于向胎兒和新生兒提供具有保護性的母源抗體具有至關(guān)重要的作用,同時具有促進局部保護性免疫的功能。FcRn還可以將特異性IgG與抗原結(jié)合的抗原-抗體復(fù)合物轉(zhuǎn)運到粘膜的固有層,抗原復(fù)合物通過抗原遞呈細胞遞呈給T淋巴細胞,引起機體的免疫反應(yīng)。為探究由IgG FcRn介導(dǎo)奶牛乳房炎無乳鏈球菌和金黃色葡萄球菌保護性抗原亞單位疫苗的免疫效果,驗證IgG FcRn在奶牛乳腺發(fā)揮局部免疫過程中的重要作用。本研究采用分子生物學技術(shù),構(gòu)建了牛IgG Fc和無乳鏈球菌(S.agalactiae)重要的表面抗原Sip的重組質(zhì)粒pET-22b-Fc-Sip,通過原核表達并配合佐劑制備了亞單位疫苗Fc-Sip。在本實驗室過去研究的基礎(chǔ)上,制備了金黃色葡萄球菌Fc-FnBPB-ClfA亞單位疫苗。將無乳鏈球菌Fc-Sip亞單位疫苗、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)Fc-FnBPB-ClfA亞單位疫苗、Fc-Sip和Fc-FnBPB-ClfA二聯(lián)亞單位疫苗對即將干奶的患有隱性乳房炎奶牛進行免疫試驗。通過免疫前后乳樣細菌分離、乳樣體細胞數(shù)測定、免疫血清間接ELIS...

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1pET-22b(+)載體圖譜

PCR反應(yīng)體系加入量（μL）PCRreactionsystemAmountofaddition(μL)Fcrubberrecoveryproduct2Siprubberrecoveryproduct25×PCRBuffer10dNTPMixt....

圖2PCR鑒定結(jié)果和雙酶切結(jié)果

圖2PCR鑒定結(jié)果和雙酶切結(jié)果Fig2PCRidentificationresultsanddoubleenzymecuttingresults1：Fc片段；2：Sip片段3：Fc-Sip融合片段4：pET-22b-Sip雙酶切結(jié)果DNAM....

圖3pET-22b-Fc-Sip質(zhì)粒測序結(jié)果

圖3pET-22b-Fc-Sip質(zhì)粒測序結(jié)果Fig3TheresultofpET-22b-Fc-Sippasmidsequence2.3.3目的蛋白Fc-Sip最佳誘導(dǎo)濃度的確定結(jié)果每支離心管中菌液的接種比例、菌液的體積、菌液的誘導(dǎo)溫度和轉(zhuǎn)速均是相同各管....

圖4重組蛋白Fc-Sip不同濃度梯度IPTG誘導(dǎo)電泳圖

圖4重組蛋白Fc-Sip不同濃度梯度IPTG誘導(dǎo)電泳圖Fig4IPTGgradientofFc-SipusProteinMarker1：pET-22b（BL21）inducedwithIPTG2-8：Expressionproductsind....

本文編號：3903377