本試驗(yàn)以4-20周齡晉嵐絨山羊母羔為研究對(duì)象,應(yīng)用超數(shù)排卵技術(shù)、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、Real time PCR技術(shù),確定了晉嵐絨山羊幼羔超排方法及體外成熟培養(yǎng)液體系,探討了卵母細(xì)胞成熟前后,卵泡發(fā)育相關(guān)的基因和受體基因的表達(dá)差異。旨在為晉嵐絨山羊胚胎生產(chǎn)提供更多優(yōu)質(zhì)的卵母細(xì)胞,更好地保護(hù)其優(yōu)秀的種質(zhì)資源,為其遺傳育種過(guò)程奠定一定的理論基礎(chǔ)。主要試驗(yàn)結(jié)果如下： (1)初步篩選出晉嵐絨山羊羔羊超數(shù)排卵方法：6-10周齡是晉嵐絨山羊羔羊的適宜超排周齡;國(guó)產(chǎn)激素與進(jìn)口激素差異不顯著(P>0.05);超排方案是FSH+PMSG法,連續(xù)兩天上午8：00和下午5：00注射4mg FSH,最后一次注射FSH時(shí)注射400IUPMSG;活體采卵對(duì)羔羊成年后繁殖性能無(wú)顯著影響。 (2)初步確定了晉嵐絨山羊母羔卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)液體系：培養(yǎng)液中添加100μg/ml谷氨酰胺能顯著提高卵母細(xì)胞成熟率(P<0.05)；加入100μg/ml谷氨酰胺后,再添加50μg/ml或100μg/ml IGF-I,可以顯著提高卵母細(xì)胞的成熟率(P<0.05)。 (3) Real time PCR檢測(cè)到用篩選出的方法...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-1羔羊超排后卵翼(A)

#、羊超排后印巢及印母細(xì)胞觀察黑羊超排后卵巢如下圖2-1A所示，兩側(cè)卵巢上均清晰可見(jiàn)排出的多個(gè)卵泡，說(shuō)明試驗(yàn)效果良好，可用于后續(xù)試驗(yàn)的進(jìn)行。吸取卵巢卵泡液在顯微鏡下觀察卵母細(xì)胞如圖2-1B所示，由圖可見(jiàn)收集到的卵母細(xì)胞形態(tài)正常，胞質(zhì)均勻，卵丘細(xì)胞清晰可見(jiàn)。觀察完后對(duì)可用卵母細(xì)....

圖2-2周齡對(duì)超排后卵母細(xì)胞數(shù)量的影響

按周齡將蓋羊分組進(jìn)行超排，釆用同種激素和同一超排方法，蓋羊所釆集的卵母細(xì)胞結(jié)果見(jiàn)下圖（圖2-2)。從圖中可以看出，超排蓋羊的周齡對(duì)超排后收獲的卵母細(xì)胞數(shù)量有」定影響。6-10周齡母蓋收獲的卵母細(xì)胞數(shù)高于4-5周齡，差^顯著-14-

圖3-1卵母細(xì)胞組圖

jig/ml、50ng/mK100ng/ml和150jxg/rnl四個(gè)不同濃度的谷氣酰胺體外成熟培養(yǎng)液中進(jìn)行成熟培養(yǎng)。圖3-1為卵母細(xì)胞組圖：圖A為未成熟卵母細(xì)胞，圖B為排出第一極體的卵母細(xì)胞，圖C為培養(yǎng)后非正常卵母細(xì)胞，卵母細(xì)胞內(nèi)部空泡化，圖D為收集到的裸卵。5 0-2....

圖4-1實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增條件與溶解曲線條件Fig.4-1ThermalprofileofamplificationanddissociationforRealtimePCR

1Cycle圖4-1實(shí)時(shí)勞光定量PCR擴(kuò)増條件與溶解曲線條件Fig.4-1ThermalprofileofamplificationanddissociationforRealtimePCR-29-

本文編號(hào)：3900080