發(fā)布時間：2024-01-19 15:06

　　目的:探究紫外線抵抗相關(guān)基因(UVRAG)對金黃色葡萄球菌(SA)誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞自噬及胞內(nèi)菌存活的影響。方法:通過SA刺激HeLa細(xì)胞建立體外感染模型,分別用UVRAG小干擾RNA(siRNA)及pCI-neo-HA-hUVRAG質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞。Western blot法檢測自噬相關(guān)蛋白LC3B、p62及UVRAG的表達(dá)水平。用EGFP-LC3質(zhì)粒及pCI-neo-HA-hUVRAG質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞后SA感染細(xì)胞,激光共聚焦顯微鏡觀察EGFP-LC3的點(diǎn)狀聚集。分別用UVRAG siRNA及pCI-neo-HA-hUVRAG質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞后SA感染細(xì)胞,平板計(jì)數(shù)法計(jì)算胞內(nèi)SA數(shù)量。結(jié)果:SA感染HeLa細(xì)胞能夠引起自噬水平升高以及UVRAG的表達(dá)升高,UVRAG siRNA能夠抑制LC3Ⅱ的表達(dá),促進(jìn)p62的表達(dá)。過表達(dá)UVRAG能夠促進(jìn)LC3Ⅱ的表達(dá),抑制p62的表達(dá)。過表達(dá)UVRAG使EGFP-LC3的點(diǎn)狀聚集增多,并且抑制胞內(nèi)菌的存活,UVRAG siRNA促進(jìn)胞內(nèi)菌的復(fù)制。結(jié)論:SA感染宿主細(xì)胞誘導(dǎo)UVRAG表達(dá)的增加可以增強(qiáng)自噬水平并且抑制胞內(nèi)菌的存活。

【文章頁數(shù)】：5 頁

本文編號：3880012