雞傳染性貧血病(Chicken infectious anemia,CIA)是由雞傳染性貧血病毒(Chicken infectious anemia virus,CIAV)感染引起的一種免疫抑制性疾病,感染雞群臨床上主要表現(xiàn)為貧血等癥狀,目前已經(jīng)在全球主要養(yǎng)禽國廣泛分布和流行,給養(yǎng)禽業(yè)造成的損失日益增加,并逐步發(fā)展成為了一個(gè)全球性的問題。CIAV的傳播方式主要包括水平傳播和垂直傳播,但是作為在禽弱毒疫苗中常見的外源病毒之一,使用了污染CIAV的弱毒疫苗也是一種非常重要的傳播途徑。此前我們觀察到低劑量的CIAV在弱毒疫苗中的污染也可以引起非常典型的CIAV發(fā)病癥狀,而同等劑量的CIAV直接攻毒卻幾乎觀察不到任何明顯癥狀,我們利用系統(tǒng)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)疫苗中污染的CIAV與疫苗毒株發(fā)揮了協(xié)同致病作用,但是疫苗污染是小概率事件極少發(fā)生。本研究中,某養(yǎng)殖場在免疫了新城疫弱毒疫苗后出現(xiàn)了典型的貧血癥狀,而尚未免疫新城疫弱毒疫苗的雞群卻并未表現(xiàn)出典型癥狀,這是否與雞群中存在CIAV的感染和流行有關(guān)?新城疫弱毒疫苗的免疫是否會(huì)增強(qiáng)CIAV感染的致病性?本研究在對發(fā)病雞群開展流行病學(xué)調(diào)查基礎(chǔ)上通過系統(tǒng)的動(dòng)...

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
符號(hào)說明
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 雞傳染性貧血病毒病原學(xué)研究
        1.1.1 CIAV的發(fā)現(xiàn)與命名
        1.1.2 CIAV的形態(tài)學(xué)及理化性質(zhì)
        1.1.3 CIAV的基因組結(jié)構(gòu)及編碼蛋白特性
    1.2 雞傳染性貧血病毒流行病學(xué)
        1.2.1 發(fā)生與分布
        1.2.2 宿主
            1.2.2.1 自然宿主
            1.2.2.2 實(shí)驗(yàn)室宿主系統(tǒng)
        1.2.3 傳播
    1.3 雞傳染性貧血病毒發(fā)病機(jī)理
    1.4 雞傳染性貧血病毒病理變化
    1.5 CIAV的診斷技術(shù)
        1.5.1 臨床診斷
        1.5.2 病例剖檢診斷
        1.5.3 病原學(xué)診斷
        1.5.4 血清學(xué)診斷
        1.5.5 分子生物學(xué)診斷
    1.6 CIAV的預(yù)防和控制
2 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 毒株
        2.1.2 疫苗
        2.1.3 質(zhì)粒
        2.1.4 主要試劑以及儀器
            2.1.4.1 試劑
            2.1.4.2 儀器
        2.1.5 其它主要試劑的配置
    2.2 不同方法檢測雞群中雞傳染性貧血病毒的感染情況
        2.2.1 發(fā)病雞群背景及樣品來源
        2.2.2 血液核酸提取
        2.2.3 應(yīng)用Real-time PCR檢測雞群中CIAV感染
        2.2.4 應(yīng)用PCR結(jié)合核酸斑點(diǎn)雜交檢測雞群中CIAV感染
            2.2.4.1 斑點(diǎn)雜交探針的制備
            2.2.4.2 雜交探針的純化
            2.2.4.3 發(fā)病雞群樣品的PCR擴(kuò)增
            2.2.4.4 PCR擴(kuò)增樣品的斑點(diǎn)雜交檢測
        2.2.5 應(yīng)用RAA方法檢測雞群中CIAV感染
    2.3 CIAV與新城疫弱毒疫苗LaSota株對SPF雞的協(xié)同致病作用
        2.3.1 CIAV-SDLY08 毒株的增殖與定量
        2.3.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.3.3 體重及免疫器官指數(shù)的情況
        2.3.4 血細(xì)胞分析儀檢測雞紅細(xì)胞數(shù)目的變化
        2.3.5 應(yīng)用血凝抑制實(shí)驗(yàn)檢測新城疫(NDV)抗體
            2.3.5.1 四單位抗原的制備
            2.3.5.2 血凝抑制實(shí)驗(yàn)測定NDV抗體滴度
        2.3.6 Real-time PCR檢測血液中CIAV的病毒載量
3 結(jié)果
    3.1 不同方法檢測雞群中雞傳染性貧血病毒的感染情況
        3.1.1 Real-time PCR檢測結(jié)果
        3.1.2 PCR結(jié)合核酸斑點(diǎn)雜交檢測結(jié)果
        3.1.3 RAA方法檢測結(jié)果
            3.1.3.1 RAA反應(yīng)體系及條件
            3.1.3.2 RAA靈敏性和特異性驗(yàn)證
            3.1.3.3 RAA方法檢測應(yīng)用結(jié)果
    3.2 CIAV與新城疫弱毒疫苗LaSota株對SPF雞的協(xié)同致病作用
        3.2.1 不同組SPF雞的死亡率
        3.2.2 不同組SPF雞體重差異
        3.2.3 不同組SPF雞免疫器官指數(shù)差異
        3.2.4 不同組SPF雞紅細(xì)胞數(shù)目的差異
        3.2.5 不同組SPF雞新城疫抗體的差異
        3.2.6 不同組SPF雞 CIAV病毒載量的差異
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況



本文編號(hào)：3875900