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板藍(lán)根多糖對體外小鼠骨髓衍生的樹突狀細(xì)胞亞群形態(tài)及功能的影響

發(fā)布時間:2023-12-24 10:29
  板藍(lán)根多糖是從板藍(lán)根中分離純化具有免疫活性的一類物質(zhì)。近來有不少研究者對板藍(lán)根多糖進(jìn)行了藥理學(xué)方面的研究,證實(shí)板藍(lán)根多糖具有抗病毒、清除氧自由基和免疫調(diào)節(jié)等生物活性?乖岢始(xì)胞主要承擔(dān)對抗原物質(zhì)的攝取、加工,并將抗原肽呈遞給特異性T淋巴細(xì)胞的功能,是啟動免疫應(yīng)答的關(guān)鍵因素。樹突狀細(xì)胞,是目前已知功能最強(qiáng)的專職抗原提呈細(xì)胞,具有誘導(dǎo)初次免疫應(yīng)答的獨(dú)特功能,能有效刺激初始型T細(xì)胞的增殖,在機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫調(diào)控中具有獨(dú)特的地位,另有研究表明樹突狀細(xì)胞也是植物多糖發(fā)揮作用的靶細(xì)胞之一。 為探討板藍(lán)根多糖對樹突狀細(xì)胞的影響,本課題采用分離小鼠骨髓來源造血干細(xì)胞,以不同細(xì)胞因子誘導(dǎo)其分化為DCs亞群的方法,在此基礎(chǔ)上分析板監(jiān)根多糖對不同DCs亞群的調(diào)控作用,現(xiàn)將本文主要研究內(nèi)容及研究成果歸納如下: 一、DCs亞群細(xì)胞體外誘導(dǎo)培養(yǎng)方法的建立:從小鼠體內(nèi)收集的骨髓細(xì)胞經(jīng)貼壁法純化后,在三種不同的條件下誘導(dǎo),其中DCo細(xì)胞在含有rmGM-CSF和rmIL-3的培養(yǎng)基中誘導(dǎo),DC1在DC0培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上增添了IFN-γ和rmIL-12, DC2在DC0培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上增添了rmIL-4。隔天半量換液...

【文章頁數(shù)】:53 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
致謝
摘要
符號及縮略語
第一章 樹突狀細(xì)胞的研究進(jìn)展
    1 DCs的生物學(xué)特性
    2 DCs的不同亞群
        2.1 根據(jù)分泌細(xì)胞因子的不同分類
        2.2 根據(jù)表達(dá)細(xì)胞表型的不同分類
        2.3 根據(jù)其對T細(xì)胞誘導(dǎo)分化的功能分類
    3 DCs的體外培養(yǎng)條件與方法
        3.1 DCs的培養(yǎng)條件
        3.2 DCs的培養(yǎng)方法
    4 DC與Th細(xì)胞之間的關(guān)系
    5 結(jié)語
第二章 中藥對DC調(diào)控作用的研究
    1 中藥對DC及對其功能各方面的影響
        1.1 中藥對DC形態(tài)的調(diào)控作用
        1.2 中藥對DCs增殖的調(diào)控作用
        1.3 中藥對DCs表面分子表達(dá)的影響
        1.4 中藥對DCs吞噬及抗原提呈能力的影響
        1.5 中藥對DCs分泌細(xì)胞因子的影響
        1.6 中藥作用后的DCs對混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)的影響
        1.7 中藥對DCs抗腫瘤作用的影響
        1.8 中藥對DCs抗病毒作用的影響
    2 板藍(lán)根多糖的免疫調(diào)節(jié)機(jī)理研究
    3 展望
試驗(yàn)一 DCs亞群細(xì)胞體外誘導(dǎo)培養(yǎng)方法的建立
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)動物
            1.1.2 主要試劑
            1.1.3 主要溶液的配制
            1.1.4 主要儀器與設(shè)備
        1.2 方法
            1.2.1 小鼠骨髓來源DCs的體外誘導(dǎo)及培養(yǎng)
            1.2.2 形態(tài)學(xué)鑒定
                1.2.2.1 倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)
                1.2.2.2 掃描電鏡觀察DCs表面形態(tài)
            1.2.3 流式細(xì)胞儀檢測各DCs亞群表面分子的表達(dá)
    2 結(jié)果
        2.1 倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)
        2.2 掃描電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)
        2.3 流式細(xì)胞儀檢測各DCs亞群表面分子的表達(dá)
    3 分析討論
試驗(yàn)二 IRPS對體外DCs亞群成熟和功能的影響研究
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 主要試劑
            1.1.2 主要溶液的配制
            1.1.3 主要儀器與設(shè)備
        1.2 方法
            1.2.1 IRPS對DCs亞群最佳增殖濃度的確定
            1.2.2 IRPS對各DCs亞群形態(tài)的影響
            1.2.3 同種混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)
                1.2.3.1 刺激細(xì)胞的制備
                1.2.3.2 混合淋巴細(xì)胞的制備
            1.2.4 IRPS對各DCs亞群分泌細(xì)胞因子的影響
                1.2.4.1 樣本制備
                1.2.4.2 試劑準(zhǔn)備
                1.2.4.3 試驗(yàn)流程
            1.2.5 IRPS對各DCs亞群表面分子表達(dá)的影響
            1.2.6 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果
        2.1 IRPS對DCs亞群最佳增殖濃度的確定
        2.2 IRPS對各DCs亞群形態(tài)的影響
        2.3 IRPS對各DCs亞群分泌細(xì)胞因子的影響
        2.4 同種混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)
        2.5 同種混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中淋巴細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的水平
        2.6 IRPS對各DCs亞群表面分子表達(dá)的影響
    3 分析討論
        3.1 Luminex xMAP技術(shù)優(yōu)勢
        3.2 IRPS對各DCs亞群分泌細(xì)胞因子的影響
        3.3 各DC亞群對淋巴細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的影響
        3.4 IRPS對各DCs亞群的雙向調(diào)節(jié)作用
        3.5 IRPS對各DCs亞群表面分子標(biāo)志的影響
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
ABSTRACT



本文編號:3874327

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