為探討胰島素和油酸對延邊黃牛前脂肪細胞分化的影響,試驗采用膠原酶消化法在無菌條件下分離獲得延邊黃牛原代脂肪細胞,并進行傳代及誘導(dǎo)分化,通過油紅O染色法、甘油三酯含量測定及實時熒光定量RT-PCR方法研究胰島素和油酸單獨處理和同時處理96 h后,對延邊黃牛脂肪細胞分化的影響,以及與脂肪細胞分化相關(guān)的主要標志基因PPARγ、LPL、SREBP1和C/EBPαmRNA表達的影響。結(jié)果表明,在分化處理96 h后,胰島素單獨處理雖不能促使脂滴形成,但卻顯著提高了PPARγ基因的表達量;油酸不僅對脂滴的形成有著明顯的促進作用,同時還顯著提高了PPARγ和SREBP1基因的表達量;二者同時處理時,脂滴數(shù)量和大小以及甘油三酯含量均大于單獨處理時,但各標志基因的表達量與單獨處理時相比卻都各不相同。因此得出,胰島素和油酸均在延邊黃牛脂肪細胞的分化過程中起著重要作用,通過對脂肪形成相關(guān)基因的調(diào)節(jié)作用,進而實現(xiàn)脂肪細胞的分化并促進脂滴的形成。

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料和試劑
    1.2 牛原代細胞的分離培養(yǎng)
    1.3 脂肪細胞的傳代培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化
    1.4 甘油三酯含量測定
    1.5 油紅 O 染色
    1.6 RNA的提取及RT-PCR
2 結(jié)果
    2.1 延邊黃牛前體脂肪細胞分化前后的形態(tài)學觀察
    2.2 不同分化處理96 h后延邊黃牛脂肪細胞油紅O染色結(jié)果
    2.3 不同分化處理96 h后甘油三酯含量變化
    2.3 分化處理96 h后不同轉(zhuǎn)錄因子的表達量
        2.3.1 分化處理96 h后PPARγ基因的表達量
        2.3.2 分化處理96 h后SREBP1基因的表達量
        2.3.3 不同分化處理96 h后C/EBPα基因的表達量
        2.3.4 分化處理96 h后LPL基因的表達量
3 討論



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