為探討胰島素和油酸對延邊黃牛前脂肪細(xì)胞分化的影響,試驗(yàn)采用膠原酶消化法在無菌條件下分離獲得延邊黃牛原代脂肪細(xì)胞,并進(jìn)行傳代及誘導(dǎo)分化,通過油紅O染色法、甘油三酯含量測定及實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法研究胰島素和油酸單獨(dú)處理和同時(shí)處理96 h后,對延邊黃牛脂肪細(xì)胞分化的影響,以及與脂肪細(xì)胞分化相關(guān)的主要標(biāo)志基因PPARγ、LPL、SREBP1和C/EBPαmRNA表達(dá)的影響。結(jié)果表明,在分化處理96 h后,胰島素單獨(dú)處理雖不能促使脂滴形成,但卻顯著提高了PPARγ基因的表達(dá)量;油酸不僅對脂滴的形成有著明顯的促進(jìn)作用,同時(shí)還顯著提高了PPARγ和SREBP1基因的表達(dá)量;二者同時(shí)處理時(shí),脂滴數(shù)量和大小以及甘油三酯含量均大于單獨(dú)處理時(shí),但各標(biāo)志基因的表達(dá)量與單獨(dú)處理時(shí)相比卻都各不相同。因此得出,胰島素和油酸均在延邊黃牛脂肪細(xì)胞的分化過程中起著重要作用,通過對脂肪形成相關(guān)基因的調(diào)節(jié)作用,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)脂肪細(xì)胞的分化并促進(jìn)脂滴的形成。

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料和試劑
    1.2 牛原代細(xì)胞的分離培養(yǎng)
    1.3 脂肪細(xì)胞的傳代培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化
    1.4 甘油三酯含量測定
    1.5 油紅 O 染色
    1.6 RNA的提取及RT-PCR
2 結(jié)果
    2.1 延邊黃牛前體脂肪細(xì)胞分化前后的形態(tài)學(xué)觀察
    2.2 不同分化處理96 h后延邊黃牛脂肪細(xì)胞油紅O染色結(jié)果
    2.3 不同分化處理96 h后甘油三酯含量變化
    2.3 分化處理96 h后不同轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)量
        2.3.1 分化處理96 h后PPARγ基因的表達(dá)量
        2.3.2 分化處理96 h后SREBP1基因的表達(dá)量
        2.3.3 不同分化處理96 h后C/EBPα基因的表達(dá)量
        2.3.4 分化處理96 h后LPL基因的表達(dá)量
3 討論



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