白細(xì)胞介素簡(jiǎn)稱白介素(Interleukin,IL),是一類多由白細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子的總稱。其中,白介素-1家族(Interleukin-1 family,IL-1F)參與機(jī)體免疫過程并在炎癥反應(yīng)中起重要作用。白介素1β(IL-1β)和其受體拮抗因子(IL-1Ra)是IL-1F中最重要的成員。炎癥反應(yīng)過程中,IL-1β表達(dá)量增多,促進(jìn)炎癥進(jìn)程;IL-1Ra常與其呈拮抗趨勢(shì),抑制IL-1β生物學(xué)功能。IL-1Ra與IL-1β間的拮抗作用引起其比值(IL-1Ra/IL-1β)在許多疾病的診斷、治療等過程中具有重要指示意義,例如骨關(guān)節(jié)炎、布魯氏菌病等。布魯氏菌病(簡(jiǎn)稱布病)是危害嚴(yán)重的人獸共患流行病。由于目前沒有可靠的區(qū)別布病感染與免疫鑒別診斷方法,大量布病免疫動(dòng)物因檢測(cè)血清布病抗體反應(yīng)陽(yáng)性而被當(dāng)作布病患病動(dòng)物撲殺,帶來巨大經(jīng)濟(jì)損失。本課題組前期發(fā)現(xiàn),IL-1β和IL-1Ra的表達(dá)量在布病中呈現(xiàn)明顯變化,進(jìn)一步研究表明,IL-1Ra/IL-1β比值在布病自然感染動(dòng)物與人工免疫動(dòng)物中差異顯著,因此提出,IL-1Ra/IL-1β可能對(duì)區(qū)別布病感染與免疫鑒別診斷具有重要指示意義�；谇捌谘芯砍晒�,...

【文章頁(yè)數(shù)】：73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
英文縮寫詞表
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第1章 白細(xì)胞介素
    第2章 IL-1β與 IL-1Ra的平衡與疾病的關(guān)系
        2.1 與支氣管哮喘之間的關(guān)系
        2.2 IL-1β與抑郁癥之間的關(guān)系
        2.3 與糖尿病之間的關(guān)系
        2.4 與關(guān)節(jié)炎的關(guān)系
        2.5 與布魯氏菌病的關(guān)系
    第3章 布魯氏菌病
    第4章 IL-1Ra與 IL-1β檢測(cè)方法
第二篇 研究?jī)?nèi)容
    第1章 IL-1β和 IL-1Ra全長(zhǎng)及結(jié)構(gòu)域蛋白的表達(dá)與制備
        1.1 材料
            1.1.1 耗材
            1.1.2 儀器設(shè)備
            1.1.3 主要試劑制備
        1.2 方法
            1.2.1 質(zhì)粒提取
            1.2.2 重組蛋白的表達(dá)
            1.2.3 重組蛋白的純化
        1.3 結(jié)果
            1.3.1 重組蛋白的表達(dá)
            1.3.2 重組蛋白的純化
        1.4 討論
        1.5 小結(jié)
    第2章 IL-1β和 IL-1Ra多克隆抗體的制備
        2.1 材料
            2.1.1 耗材
            2.1.2 主要儀器設(shè)備
            2.1.3 主要試劑制備
        2.2 方法
            2.2.1 動(dòng)物免疫
            2.2.2 抗體效價(jià)檢測(cè)
            2.2.3 多克隆抗體的純化
            2.2.4 抗體特異性分析
        2.3 結(jié)果
            2.3.1 抗體效價(jià)檢測(cè)
            2.3.2 抗體的純化
            2.3.3 抗體的特異性分析
        2.4 討論
        2.5 小結(jié)
    第3章 IL-1Ra/IL-1β雙 T線膠體金免疫層析試紙條檢測(cè)方法的建立
        3.1 材料
            3.1.1 耗材
            3.1.2 主要儀器設(shè)備
            3.1.3 主要溶液配制
        3.2 方法
            3.2.1 膠體金溶液制備與鑒定
            3.2.2 IL-1β-1Ra2 多克隆抗體除鹽處理
            3.2.3 膠體金探針制備與優(yōu)化
            3.2.4 膠體金試紙條組裝
            3.2.5 NC膜優(yōu)化
            3.2.6 雙T線抗體工作濃度優(yōu)化
            3.2.7 試紙條標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
            3.2.8 回收率試驗(yàn)與最低檢測(cè)限的確定
            3.2.9 重復(fù)性試驗(yàn)
            3.2.10 與市售試劑盒比較
        3.3 結(jié)果
            3.3.1 膠體金溶液分析
            3.3.2 膠體金探針鑒定與優(yōu)化
            3.3.3 NC膜的優(yōu)化
            3.3.4 雙T線抗體工作濃度優(yōu)化
            3.3.5 試紙條標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
            3.3.6 回收率試驗(yàn)與最低檢測(cè)限的確定
            3.3.7 重復(fù)性試驗(yàn)
            3.3.8 與市售試劑盒比較
        3.4 討論
        3.5 小結(jié)
    第4章 IL-1Ra/IL-1β雙 T線膠體金免疫層析試紙條臨床實(shí)際樣品檢測(cè)應(yīng)用分析
        4.1 材料
            4.1.1 樣品采集
            4.1.2 耗材、儀器設(shè)備
        4.2 方法
            4.2.1 樣品處理
            4.2.2 樣品檢測(cè)與灰度分析
            4.2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
        4.3 結(jié)果
            4.3.1 部分血清樣本虎紅平板凝集試驗(yàn)結(jié)果
            4.3.2 羊血清IL-1β和 IL-1Ra檢測(cè)分析
            4.3.3 臨床樣本檢測(cè)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
        4.4 討論
        4.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
作者簡(jiǎn)介及科研成果
致謝



本文編號(hào)：3868141