精子是一個非常復(fù)雜且高度分化的細(xì)胞,精子凍融過程會在一定程度上導(dǎo)致精子細(xì)胞器結(jié)構(gòu)及細(xì)胞生理過程發(fā)生不可逆損傷,從而導(dǎo)致精子活力、運(yùn)動性能、頂體和質(zhì)膜完整性降低和發(fā)生凋亡,使精子功能和精液質(zhì)量降低。本研究針對這一問題,將鮮精質(zhì)量檢測合格的綿羊四個品種的精液進(jìn)行冷凍,利用iTRAQ技術(shù)研究綿羊精液耐凍性差異的蛋白質(zhì)。主要研究結(jié)果如下:試驗對澳洲白、白頭杜泊、湖羊和黑頭杜泊4個品種的種公羊的合格鮮精進(jìn)行冷凍保存,結(jié)果:湖羊的總體活力、前進(jìn)式活力、快速前進(jìn)活力顯著高于澳洲白、白頭杜泊、黑頭杜泊(P<0.05);白頭杜泊的總體活力、前進(jìn)式活力、快速前進(jìn)活力顯著低于澳洲白、湖羊、黑頭杜泊(P<0.05)�？梢�,四個綿羊品種間的精液耐凍性以湖羊為最好,白頭杜泊為最差。據(jù)以上試驗結(jié)果,采集湖羊和白頭杜泊的種公羊精液分別做混池,并收集湖羊鮮精(hx)、湖羊活精(hh)、湖羊凍精(hd)和白頭鮮精(bx)、白頭活精(bh)、白頭凍精(bd)的樣品,利用iTRAQ技術(shù)對每組樣本總蛋白進(jìn)行相對及絕對定量分析。結(jié)果:hh.vs.bh、hd.vs.bd、hd.vs.hx、bd.vs.bx分別存在56、...

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【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 冷凍-解凍對精子的損傷
        1.1.1 冷凍-解凍對精子頂體的影響
        1.1.2 冷凍-解凍對精子質(zhì)膜的影響
        1.1.3 保護(hù)精子質(zhì)膜的方法
        1.1.4 冷凍-解凍對精子抗氧化系統(tǒng)的影響
        1.1.5 增強(qiáng)抗氧化能力的方法
    1.2 蛋白質(zhì)組學(xué)的研究進(jìn)展
        1.2.1 蛋白質(zhì)組學(xué)概述
        1.2.2 對蛋白質(zhì)組學(xué)研究的需求
        1.2.3 蛋白質(zhì)組學(xué)的技術(shù)
        1.2.4 同位素標(biāo)記相對和絕對定量（i TRAQ）
        1.2.5 成熟精子細(xì)胞和蛋白質(zhì)組學(xué)
    1.3 本研究目的意義
2 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 試驗動物與試驗設(shè)計
        2.1.2 主要儀器設(shè)備
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要試劑的配制方法
    2.2 試驗方法
        2.2.1 不同品種間耐凍性選擇的試驗方法
        2.2.2 不同品種間蛋白質(zhì)組的i TRAQ測定試驗方法
        2.2.3 i TRAQ試驗方法
        2.2.4 蛋白數(shù)據(jù)質(zhì)控
    2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 綿羊不同品種間精液耐凍性比較
        3.1.1 不同品種種公羊鮮精活力比較
        3.1.2 不同品種種公羊凍精活力比較
    3.2 綿羊不同品種間精液蛋白質(zhì)組i TRAQ測定結(jié)果
        3.2.1 湖羊和白頭杜泊精子凍融前后活力比較
        3.2.2 蛋白質(zhì)的提取和定量結(jié)果
        3.2.3 差異蛋白分析結(jié)果
        3.2.4 GO富集分析結(jié)果
        3.2.5 KEGG富集分析結(jié)果
4 討論
    4.1 抗氧化應(yīng)激蛋白
        4.1.1 PRDX2
        4.1.2 ORM1（Alpha1acid glycoprotein）
        4.1.3 Glutathione peroxidase-1 (Fragment)
    4.2 氧化應(yīng)激蛋白
        4.2.1 S100A12（Protein S100）
    4.3 精子能量代謝
        4.3.1 ALB（Serum albumin）
    4.4 精子活力
        4.4.1 C-type natriuretic peptide
        4.4.2 Beta-defensin
        4.4.3 AFP
        4.4.4 AHSG（Alpha2HS-glycoprotein）
        4.4.5 HK3（Hexokinase 3）
        4.4.6 COX1
    4.5 精卵結(jié)合蛋白
        4.5.1 SPACA3
        4.5.2 SPA17
        4.5.3 Hyaluronidase
        4.5.4 UCHL1
    4.6 精子畸形蛋白
        4.6.1 SPEM1
        4.6.2 KRT5
    4.7 移動蛋白
        4.7.1 TSGA10
        4.7.2 SPATA19
        4.7.3 ATG7
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介
致謝
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