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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
ABSTRACT
縮略詞中英文對照(Abbreviation)
第一篇 文獻綜述
    1 家禽卵巢及卵泡發(fā)育概述
        1.1 家禽的卵巢及卵泡發(fā)育
        1.2 家禽卵泡顆粒細胞
        1.3 家禽卵泡顆粒細胞與卵泡閉鎖的關系
    2 卵泡刺激素(FSH)概述
        2.1 卵泡刺激素
        2.2 卵泡刺激素的作用機制
        2.3 卵泡刺激素與卵泡顆粒細胞的關系
    3 miRNA概述
        3.1 miRNA及其特征
        3.2 miRNA在動物生殖中的研究進展
    4 本研究的目的和意義
    參考文獻
第二篇 試驗部分
    第一章 FSH對雞小黃卵泡顆粒細胞凋亡的調(diào)控作用
        1 實驗材料
            1.1 實驗動物及樣品采集
            1.2 主要試劑
            1.3 主要儀器
            1.4 主要溶液及其配置
        2 實驗方法
            2.1 雞小黃卵泡顆粒細胞的分離培養(yǎng)
            2.2 放射免疫法測定顆粒細胞上清液中孕酮含量
            2.3 流式細胞術檢測細胞凋亡情況
            2.4 顆粒細胞總RNA的提取及其濃度和純度檢測
                2.4.1 RNA的提取
                2.4.2 RNA濃度和純度檢測
            2.5 反轉錄cDNA的合成
            2.6 實時熒光定量PCR
            2.7 數(shù)據(jù)分析
        3 實驗結果
            3.1 雞小黃卵泡顆粒細胞形態(tài)觀察
            3.2 放射免疫法測定顆粒細胞上清液中孕酮含量
            3.3 流式細胞術檢測細胞凋亡情況
            3.4 總RNA質量檢測
            3.5 Caspase-3基因mRNA的表達情況
        4 討論
            4.1 關于雞卵泡顆粒細胞的分離培養(yǎng)
            4.2 關于FSH與雞卵泡顆粒細胞的關系
        5 小結
        參考文獻
    第二章 應用高通量測序技術篩選FSH處理雞卵泡顆粒細胞后差異表達的miRNAs
        1 實驗材料
            1.1 雞卵泡顆粒細胞
            1.2 主要試劑
            1.3 主要儀器
            1.4 主要溶液及其配置
            1.5 miRNA表達譜測序
            1.6 生物學工具：主要數(shù)據(jù)庫及軟件
        2 實驗方法
            2.1 雞卵泡顆粒細胞樣品RNA的提取及濃度、純度檢測
            2.2 高通量測序篩選FSH處理雞卵泡顆粒細胞后差異表達的miRNAs
            2.3 差異表達顯著的四個miRNAs的qRT-PCR驗證
        3 實驗結果
            3.1 雞卵泡顆粒細胞總RNA的提取
            3.2 高通量測序篩選FSH處理雞卵泡顆粒細胞后差異表達的miRNAs
                3.2.1 FSH實驗組與ITS對照組的小RNA文庫的構建
                3.2.2 篩選FSH處理雞卵泡顆粒細胞后差異表達的miRNAs
            3.3 對差異表達顯著的四個miRNAs進行qRT-PCR驗證
            3.4 差異表達的miRNAs靶基因的預測及其生物信息學分析
        4 討論
        5 小結
        參考文獻
全文結論
全文創(chuàng)新點
致謝
附錄
攻讀碩士期間發(fā)表的論文



本文編號：3859273