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FSH處理對雞卵泡顆粒細(xì)胞凋亡的影響及差異表達(dá)miRNAs的研究

發(fā)布時(shí)間:2023-10-31 18:43
  

【文章頁數(shù)】:67 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
ABSTRACT
縮略詞中英文對照(Abbreviation)
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    1 家禽卵巢及卵泡發(fā)育概述
        1.1 家禽的卵巢及卵泡發(fā)育
        1.2 家禽卵泡顆粒細(xì)胞
        1.3 家禽卵泡顆粒細(xì)胞與卵泡閉鎖的關(guān)系
    2 卵泡刺激素(FSH)概述
        2.1 卵泡刺激素
        2.2 卵泡刺激素的作用機(jī)制
        2.3 卵泡刺激素與卵泡顆粒細(xì)胞的關(guān)系
    3 miRNA概述
        3.1 miRNA及其特征
        3.2 miRNA在動物生殖中的研究進(jìn)展
    4 本研究的目的和意義
    參考文獻(xiàn)
第二篇 試驗(yàn)部分
    第一章 FSH對雞小黃卵泡顆粒細(xì)胞凋亡的調(diào)控作用
        1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1 實(shí)驗(yàn)動物及樣品采集
            1.2 主要試劑
            1.3 主要儀器
            1.4 主要溶液及其配置
        2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 雞小黃卵泡顆粒細(xì)胞的分離培養(yǎng)
            2.2 放射免疫法測定顆粒細(xì)胞上清液中孕酮含量
            2.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡情況
            2.4 顆粒細(xì)胞總RNA的提取及其濃度和純度檢測
                2.4.1 RNA的提取
                2.4.2 RNA濃度和純度檢測
            2.5 反轉(zhuǎn)錄cDNA的合成
            2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
            2.7 數(shù)據(jù)分析
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            3.1 雞小黃卵泡顆粒細(xì)胞形態(tài)觀察
            3.2 放射免疫法測定顆粒細(xì)胞上清液中孕酮含量
            3.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡情況
            3.4 總RNA質(zhì)量檢測
            3.5 Caspase-3基因mRNA的表達(dá)情況
        4 討論
            4.1 關(guān)于雞卵泡顆粒細(xì)胞的分離培養(yǎng)
            4.2 關(guān)于FSH與雞卵泡顆粒細(xì)胞的關(guān)系
        5 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
    第二章 應(yīng)用高通量測序技術(shù)篩選FSH處理雞卵泡顆粒細(xì)胞后差異表達(dá)的miRNAs
        1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1 雞卵泡顆粒細(xì)胞
            1.2 主要試劑
            1.3 主要儀器
            1.4 主要溶液及其配置
            1.5 miRNA表達(dá)譜測序
            1.6 生物學(xué)工具:主要數(shù)據(jù)庫及軟件
        2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 雞卵泡顆粒細(xì)胞樣品RNA的提取及濃度、純度檢測
            2.2 高通量測序篩選FSH處理雞卵泡顆粒細(xì)胞后差異表達(dá)的miRNAs
            2.3 差異表達(dá)顯著的四個miRNAs的qRT-PCR驗(yàn)證
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            3.1 雞卵泡顆粒細(xì)胞總RNA的提取
            3.2 高通量測序篩選FSH處理雞卵泡顆粒細(xì)胞后差異表達(dá)的miRNAs
                3.2.1 FSH實(shí)驗(yàn)組與ITS對照組的小RNA文庫的構(gòu)建
                3.2.2 篩選FSH處理雞卵泡顆粒細(xì)胞后差異表達(dá)的miRNAs
            3.3 對差異表達(dá)顯著的四個miRNAs進(jìn)行qRT-PCR驗(yàn)證
            3.4 差異表達(dá)的miRNAs靶基因的預(yù)測及其生物信息學(xué)分析
        4 討論
        5 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
全文結(jié)論
全文創(chuàng)新點(diǎn)
致謝
附錄
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本文編號:3859273

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