半月板是位于膝關(guān)節(jié)的纖維軟骨組織,具有吸收振蕩、分散膝關(guān)節(jié)承重、減小膝關(guān)節(jié)摩擦等重要作用。半月板損傷會(huì)嚴(yán)重限制膝關(guān)節(jié)的功能,增加膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎的風(fēng)險(xiǎn),而半月板損傷病例很常見。近年來,組織工程為半月板損傷修復(fù)治療提供了一種新的方向。組織工程的主要步驟是首先制備支架,然后將細(xì)胞接種于支架上,并通過細(xì)胞因子、力學(xué)刺激等方法調(diào)控細(xì)胞-支架復(fù)合物,使之產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellular matrix,ECM)后移植至動(dòng)物或人體內(nèi)。由于半月板解剖結(jié)構(gòu)和生物力學(xué)性能上的特殊性,相比其他組織工程支架的制備技術(shù),3D打印技術(shù)在制備組織工程半月板支架上有很大優(yōu)勢(shì)。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone marrow stem cells,BMSCs)是理想的半月板組織工程種子細(xì)胞的來源,但其在向軟骨誘導(dǎo)時(shí)常常會(huì)發(fā)生終末分化。大量研究表明,雖然組織工程半月板移植物可以對(duì)關(guān)節(jié)軟骨起到一定保護(hù)作用,但依然會(huì)造成不同程度的關(guān)節(jié)軟骨損傷及軟骨下骨變性,所以,應(yīng)用組織工程半月板治療時(shí)應(yīng)關(guān)注膝關(guān)節(jié)軟骨損傷和軟骨下骨變性。甲狀旁腺激素(Parathyroid hormone,PTH)可以抑制BMSCs向軟骨誘導(dǎo)過程中的終末分...

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 半月板的結(jié)構(gòu)與功能
        1.1.1 解剖結(jié)構(gòu)和生物力學(xué)
        1.1.2 半月板細(xì)胞外基質(zhì)
        1.1.3 半月板細(xì)胞
    1.2 半月板損傷及修復(fù)重建方法
        1.2.1 半月板全部/部分切除術(shù)
        1.2.2 半月板修復(fù)術(shù)
        1.2.3 同種異體半月板移植
        1.2.4 組織工程半月板
    1.3 組織工程半月板
        1.3.1 組織工程半月板支架
        1.3.2 組織工程半月板存在的問題
    1.4 甲狀旁腺激素(1-34)對(duì)膝關(guān)節(jié)的作用
        1.4.1 甲狀旁腺激素(1-34)對(duì)BMSCs成軟骨的作用
        1.4.2 甲狀旁腺激素(1-34)對(duì)關(guān)節(jié)軟骨的作用
        1.4.3 甲狀旁腺激素(1-34)對(duì)軟骨下骨的作用
第二章 3D打印支架復(fù)合BMSCs制備組織工程半月板及體外成軟骨誘導(dǎo)時(shí)間對(duì)其分化的影響
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 試驗(yàn)試劑與儀器設(shè)備
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 3D打印半月板支架的制備及觀察
        2.2.2 支架力學(xué)性能和降解率的評(píng)估
        2.2.3 支架與細(xì)胞相容性的評(píng)估
        2.2.4 BMSCs-支架復(fù)合物的制備
        2.2.5 不同體外誘導(dǎo)時(shí)間BMSCs-支架復(fù)合物分化生長(zhǎng)程度的檢測(cè)
        2.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    2.3 試驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 3D打印支架形態(tài)及微觀結(jié)構(gòu)觀測(cè)
        2.3.2 支架的力學(xué)性能和降解率
        2.3.3 支架與細(xì)胞的相容性
        2.3.4 BMSCs-支架復(fù)合物形態(tài)學(xué)觀察
        2.3.5 糖胺聚糖(GAG)及DNA含量測(cè)定
        2.3.6 Western blot檢測(cè)Ⅱ膠原蛋白的表達(dá)情況
    2.4 討論
        2.4.1 組織工程半月板支架制備技術(shù)的選擇
        2.4.2 組織工程化半月板體外誘導(dǎo)培養(yǎng)時(shí)間的選擇
第三章 PTH(1-34)對(duì)BMSCs-3D打印支架構(gòu)建體修復(fù)犬半月板缺損的影響
    3.1 試驗(yàn)材料
        3.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        3.1.2 試驗(yàn)試劑與藥品
        3.1.3 試驗(yàn)儀器與耗材
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 組織工程化半月板的構(gòu)建
        3.2.2 手術(shù)步驟
        3.2.3 大體觀察及膝關(guān)節(jié)功能評(píng)分
        3.2.4 剖檢觀察
        3.2.5 新生半月板的生物力學(xué)檢測(cè)
        3.2.6 組織學(xué)觀察及評(píng)分
        3.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3.3 試驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 大體觀察及膝關(guān)節(jié)功能評(píng)分
        3.3.2 剖檢觀察結(jié)果
        3.3.3 新生半月板的生物力學(xué)檢測(cè)結(jié)果
        3.3.4 新生半月板組織學(xué)觀察結(jié)果
        3.3.5 股骨髁和脛骨平臺(tái)組織學(xué)觀察結(jié)果
    3.4 討論
        3.4.1 模型動(dòng)物的選擇
        3.4.2 BMSCs-3D打印支架構(gòu)建體修復(fù)半月板缺損及PTH(1-34)的輔助作用
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3856896