針對小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的高度保守基因foxA以及3種毒力基因ail、ystA、ystB設(shè)計并合成引物,建立一種多重PCR方法,該方法能夠鑒定小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌,同時檢測其位于染色體上的毒力基因。用單重PCR方法和所建立的多重PCR方法對145份牛糞可疑樣品進(jìn)行檢測并加以分析。結(jié)果顯示,建立的多重PCR方法重復(fù)性良好,特異性強,靈敏度高,對ystA、ail、ystB以及foxA基因的最低檢測限依次為3×10^-3ng/μL、3×10^-3ng/μL、1.8×10^-3ng/μL和3.2×10^-3 ng/μL。對145份牛糞可疑樣品的檢測結(jié)果顯示,其中38份樣品只含有foxA基因,71份樣品含有foxA和ystB基因,未檢出含有ail和ystA基因的樣品,與單重PCR結(jié)果一致。該方法可一次性檢測4種基因,較單重PCR方法更省時省力,對于含有不同毒力基因的小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的快速檢測具有重大意義。

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