隨著集約化規(guī)模化養(yǎng)豬業(yè)的快速發(fā)展,許多國家越來越廣泛運(yùn)用豬的人工授精技術(shù)(AI)進(jìn)行配種繁殖。種公豬在養(yǎng)豬業(yè)生產(chǎn)中的地位十分重要,關(guān)系到母豬的受孕、妊娠與分娩以及仔豬的健康,而精液是否攜帶病毒則關(guān)系到豬場相關(guān)疫病的傳播與否;雖然用于人工授精的精液里出現(xiàn)的病毒不一定導(dǎo)致母豬感染疫病,但精液仍然是傳播病毒性疫病的一大風(fēng)險。國內(nèi)外許多研究表明種公豬精液是導(dǎo)致病毒性疫病傳播的媒介,這些病毒既有DNA病毒又有RNA病毒,其中豬瘟病毒(CSFV)、豬繁殖障礙與呼吸綜合征病毒(PRRSV)、豬日本乙腦炎病毒(JEV)、豬口蹄疫病毒(FMDV)、豬偽狂犬病毒(PRV)、豬圓環(huán)病毒2型(PCV-2)和豬細(xì)小病毒(PPV)是種公豬精液中最為常見的導(dǎo)致母豬繁殖障礙性的病原,種公豬精液如果攜帶這些病毒會導(dǎo)致豬繁殖障礙類等疫病的發(fā)生,引起妊娠母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎或木乃伊胎或新生仔豬帶毒,給養(yǎng)豬業(yè)健康生產(chǎn)造成了巨大的損失。由于這些豬病毒通常會引起非常相似的臨床癥狀,且常伴隨著混合感染,對混合感染的病原體進(jìn)行單獨(dú)檢測往往比較費(fèi)時,為實(shí)現(xiàn)在種豬精液多病原混合感染的快速診斷,本研究建立了針對CSFV、PRRSV、FMDV、...

【文章頁數(shù)】：94 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 種公豬傳播病毒性疫病的研究進(jìn)展
        1.1 種公豬精液傳播的常見病毒性疫病
        1.2 種公豬精液傳播的其他病毒
    2 豬病毒性疫病單一PCR和多重PCR方法研究進(jìn)展
        2.1 單一PCR/RT-PCR方法
        2.2 二重PCR/RT-PCR方法
        2.3 三重PCR/RT-PCR方法
        2.4 四重PCR/RT-PCR方法
        2.5 五重PCR/RT-PCR方法
        2.6 六重PCR/RT-PCR方法
    3 研究目的及意義
第二章 種公豬精液傳播的CSFV、PRRSV、JEV、FMDV、PRV、PCV-2和PPV的檢測及其單一PCR/RT-PCR方法的建立
    1 材料
        1.1 病毒、病料
        1.2 主要試劑
        1.3 主要溶液的配制
        1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        1.5 引物設(shè)計與合成
    2 方法
        2.1 病料處理
        2.2 核酸提取
        2.3 病毒核酸的PCR/RT-PCR擴(kuò)增
        2.4 CSFV、PRRSV、JEV、FMDV、PRV、PCV-2和PPV目的基因的鑒定
        2.5 單一PCR/RT-PCR診斷方法的建立
        2.6 單一PCR/RT-PCR診斷方法對臨床樣本的檢測
    3 結(jié)果
        3.1 CSFV、PRRSV、JEV、FMDV、PRV、PCV-2和PPV目的基因的鑒定
        3.2 單一PCR/RT-PCR診斷方法的建立
        3.3 單一PCR/RT-PCR診斷方法對臨床樣本的檢測
    4 討論
    5 結(jié)論
第三章 種公豬精液傳播七種常見病毒多重PCR方法的建立與初步應(yīng)用研究
    1 材料
        1.1 病毒、細(xì)胞及病毒基因質(zhì)粒
        1.2 病料
        1.3 主要試劑
        1.4 主要溶液的配制
        1.5 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2 方法
        2.1 病毒核酸提取
        2.2 引物設(shè)計與合成
        2.3 七重PCR診斷方法的建立
        2.4 七重PCR診斷方法對種公豬精液臨床病料的檢測
    3 結(jié)果
        3.1 種公豬精液攜帶七種病毒七重PCR診斷方法的建立
        3.2 七重PCR診斷方法對種公豬精液臨床病料的檢測
    4 鑒別種公豬精液常見病毒七重PCR試劑盒的組裝
        4.1 對照的制備
        4.2 mPCR Mix的制備
        4.3 試劑盒的成分及組裝
        4.4 試劑盒操作說明
    5 討論
    6 結(jié)論
主要參考文獻(xiàn)
致謝
附錄一 攻讀碩士學(xué)位期間參與發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
附錄二 本文用到的部分英文縮寫及含義說明



本文編號：3820230