發(fā)布時(shí)間：2023-05-07 16:48

　　隨著全球氣候的變化、生態(tài)環(huán)境的不斷惡化、城鎮(zhèn)化程度的加快、各國之間的貿(mào)易往來頻繁及交通工具運(yùn)輸?shù)目旖荼憷?全世界蚊媒傳染病發(fā)病呈上升趨勢(shì),已有蚊媒傳染病的流行區(qū)域不斷擴(kuò)大、疾病的流行頻度不斷加強(qiáng)。內(nèi)蒙古擁有廣袤的草原,水草豐茂,牛羊較多,與蒙古國,俄羅斯相接壤,邊境線很長,獨(dú)特的氣候環(huán)境和地理環(huán)境給蚊蟲帶來滋生的空間。為了解內(nèi)蒙古呼倫貝爾和錫林郭勒盟邊境地區(qū)優(yōu)勢(shì)蚊蟲種類,并對(duì)其保守基因COI的基因多態(tài)性分析。應(yīng)用傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)相結(jié)合的方法,對(duì)該地區(qū)10個(gè)采樣點(diǎn)進(jìn)行蚊蟲種型的鑒定和基因多態(tài)性分析,并對(duì)蚊蟲體內(nèi)是否攜帶西尼羅病毒初步進(jìn)行檢測(cè)。方法:在2018-2019年間,從內(nèi)蒙古呼倫貝爾地區(qū)和錫林郭勒盟地區(qū)的草地上采集蚊蟲樣本。通過傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)鑒定方法,對(duì)蚊蟲樣本進(jìn)行顯微鏡下觀察后初步確定其種型。再采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)對(duì)蚊蟲的線粒體細(xì)胞色素C氧化酶I基因(COI)基因序列進(jìn)行擴(kuò)增,測(cè)序后對(duì)蚊蟲的基因序列進(jìn)行同源性分析和遺傳進(jìn)化分析,即應(yīng)用Mega6.06軟件構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹,與GenBank數(shù)據(jù)庫中已知蚊蟲的COI基因進(jìn)行聚類分析,以確定蚊子進(jìn)化的規(guī)律;通過相關(guān)生物軟件分析其...

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 研究背景
        1.1.1 蚊蟲的概述
        1.1.2 蚊蟲的分類
        1.1.3 蚊蟲分布
    1.2 蚊子的種型鑒定方法
        1.2.1 傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)鑒定方法
        1.2.2 分子生物學(xué)鑒定方法
    1.3 蚊傳疾病
        1.3.1 蚊傳疾病的流行情況
        1.3.2 蚊傳疾病的防治
    1.4 本研究的目的和意義
2 試驗(yàn)材料
    2.1 蚊蟲的采集
    2.2 培養(yǎng)基及緩沖液
    2.3 試劑耗材
    2.4 儀器設(shè)備
3 方法
    3.1 蚊蟲的種型鑒定
        3.1.1 形態(tài)學(xué)鑒定
        3.1.2 分子生物學(xué)鑒定
        3.1.3 數(shù)據(jù)處理分析
    3.2 在蚊蟲體內(nèi)西尼羅病毒的檢測(cè)
        3.2.1 蚊蟲總RNA的提取
        3.2.2 TaqMan實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法的建立
4 結(jié)果
    4.1 蚊蟲種型鑒定及基因多態(tài)性結(jié)果
        4.1.1 蚊蟲的形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果
        4.1.2 蚊蟲COI基因的擴(kuò)增和同源性分析結(jié)果
        4.1.3 蚊蟲的COI基因序列遺傳進(jìn)化樹結(jié)果
        4.1.4 蚊蟲COI基因序列組成及核苷酸不同位點(diǎn)堿基替代類型結(jié)果
        4.1.5 遺傳距離分析結(jié)果
        4.1.6 COI基因遺傳多樣性和單倍型分析結(jié)果
    4.2 在蚊蟲體內(nèi)西尼羅病毒檢測(cè)結(jié)果
        4.2.1 TaqMan實(shí)時(shí)熒光定量PCR標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制結(jié)果
        4.2.2 TaqMan實(shí)時(shí)熒光定量PCR特異性試驗(yàn)結(jié)果
        4.2.3 TaqMan實(shí)時(shí)熒光定量PCR靈敏性試驗(yàn)結(jié)果
        4.2.4 TaqMan實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)樣品結(jié)果
5 討論
6 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3810949