發(fā)布時(shí)間：2023-04-05 19:39

　　豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)是嚴(yán)重危害我國(guó)生豬產(chǎn)業(yè)的重要病原。研究病毒編碼蛋白與宿主細(xì)胞蛋白之間的相互作用對(duì)于理解PRRSV的致病機(jī)制具有十分重要的意義。本研究在篩選、鑒定與PRRSV蛋白相互作用的細(xì)胞蛋白的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步分析了Nsp3與IFITM1、E蛋白與Tetherin、Nsp2與CD2AP之間相互作用的分子機(jī)制及其生物學(xué)意義,以期為闡明PRRSV的致病機(jī)制提供科學(xué)依據(jù)。 分別將含有PRRSV各個(gè)基因(除Nsp6和Nsp8)的酵母質(zhì)粒pGBKT7轉(zhuǎn)化酵母菌Y2H,進(jìn)行細(xì)胞毒性和自激活實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明,PRRSV的各個(gè)基因編碼的蛋白無(wú)細(xì)胞毒性和自激活現(xiàn)象。應(yīng)用豬肺泡巨噬細(xì)胞(PAMs) cDNA文庫(kù)和酵母雙雜交技術(shù),分別篩選與Nsp2、Nsp9、Nsp10、Nsp11和Nsp12相互作用的細(xì)胞蛋白,將陽(yáng)性克隆進(jìn)行了質(zhì)粒提取和測(cè)序分析,并在NCBI上進(jìn)行序列比對(duì),確定了相應(yīng)序列對(duì)應(yīng)的基因和相互作用的候選蛋白。分別從PAMs中克隆固有抗病毒因子IFITM1、IFITM3、Tetherin、PKR、OAS、Mx1、ISG15和ISG56基因,并將克隆的片段構(gòu)建到pGADT7載體上,...

【文章頁(yè)數(shù)】：87 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
插圖清單
附表清單
縮略詞表
第一章 引言
    1.1 國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀
    1.2 研究的目的和意義
    1.3 研究的內(nèi)容與技術(shù)路線
    1.4 研究目標(biāo)
第二章 豬繁殖與呼吸綜合征病毒蛋白與宿主細(xì)胞相互作用蛋白的篩選與鑒定
    摘要
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
    2.3 結(jié)果與分析
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 豬繁殖與呼吸綜合征病毒Nsp3、E與IFITM1、Tetherin的相互作用
    摘要
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
    3.3 結(jié)果與分析
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
第四章 豬繁殖與呼吸綜合征病毒Nsp2與CD2AP的相互作用及其生物學(xué)意義
    摘要
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
    4.3 結(jié)果與分析
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
第五章 結(jié)論
第六章 創(chuàng)新點(diǎn)
第七章 文獻(xiàn)綜述
    7.1 細(xì)胞骨架的主要組分
    7.2 細(xì)胞骨架和病毒的生命周期
    7.3 細(xì)胞骨架對(duì)病毒的屏障作用
    7.4 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3784006