本研究的目的是通過低氧處理體外培養(yǎng)的雞原始生殖細胞(Primordial germ cell)優(yōu)化培養(yǎng)系統(tǒng),降低細胞凋亡率,提高細胞活力,為高效生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因雞提供科學依據(jù)。研究采用低氧氣體(1%O₂)分別處理雞PGCs 6 h、12 h、24 h,隨后用q-PCR檢測凋亡相關基因Caspase3的表達。與常氧組(21%O₂)相比,1%O₂-24h低氧組Caspase3顯著下調(diào)(p<0.05)。進一步檢測1%O₂-24 h低氧組p53和Bcl2的表達情況,結(jié)果顯示p53表達顯著下調(diào)(p<0.05),Bcl2表達無顯著差異。采用流式細胞術檢測細胞凋亡比例,低氧組((13.5±0.8)%)凋亡比例低于常氧組((21.8±2.1)%)。采用q-PCR,免疫熒光染色,細胞遷移鑒定低氧處理后的雞PGCs生物學特性,發(fā)現(xiàn)其仍保持生殖細胞的生物學特性。本研究表明,在體外培養(yǎng)條件下,1%O₂低氧處理雞PGCs 24 h能抑制細胞凋亡,且不改變其生物學特性。

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【文章目錄】：
1 結(jié)果與分析
    1.1 低氧對雞PGCs凋亡的影響
    1.2 低氧處理后雞PGCs的生物學特性
2 討論
3 材料與方法
    3.1 細胞來源與培養(yǎng)
    3.2 RNA提取和q-PCR鑒定
    3.3 低氧處理
    3.4 細胞凋亡檢測
    3.5 細胞免疫熒光染色
    3.6 PGCs遷移鑒定
    3.7 統(tǒng)計分析



本文編號：3781747