本試驗旨在建立原代乳腺上皮細(xì)胞系的體外培養(yǎng)方法,并進行β酪蛋白mRNA的表達驗證。取新鮮泌乳期的乳腺組織,采用組織塊法培養(yǎng)純化原代乳腺上皮細(xì)胞,利用顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)并進行細(xì)胞生長計數(shù),采用實時熒光定量PCR技術(shù)檢測β酪蛋白mRNA表達。結(jié)果顯示,純化培養(yǎng)的原代乳腺上皮細(xì)胞集聚成島嶼狀生長,具有典型的鋪路石和鵝卵石形狀,細(xì)胞生長曲線呈"S"形,符合一般細(xì)胞的生長規(guī)律,并成功表達β酪蛋白mRNA。綜上所述,本研究采用組織塊法成功培養(yǎng)出具有正常生理功能的奶牛原代乳腺上皮細(xì)胞,為后續(xù)的乳腺上皮細(xì)胞功能研究提供了良好的細(xì)胞試驗?zāi)Ｐ汀?br>
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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑與儀器
    1.2 奶牛乳腺上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)
    1.3 乳腺上皮細(xì)胞的純化與傳代
        1.3.1 乳腺上皮細(xì)胞純化
        1.3.2 乳腺上皮細(xì)胞傳代
    1.4 乳腺上皮細(xì)胞形態(tài)觀察
    1.5 乳腺上皮細(xì)胞的生長計數(shù)
    1.6 乳腺上皮細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇
        1.6.1 細(xì)胞凍存
        1.6.2 細(xì)胞復(fù)蘇
    1.7 乳腺上皮細(xì)胞β酪蛋白基因 (CSN2) 表達檢測
2 結(jié)果
    2.1 乳腺上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)
    2.2 乳腺上皮細(xì)胞形態(tài)觀察
    2.3 乳腺上皮細(xì)胞生長曲線
    2.4 β酪蛋白基因 (CSN2) 表達結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論



本文編號：3774285