肌肉生長(zhǎng)發(fā)育受多種因子在時(shí)間和空間上的精密調(diào)控,MSTN/Smad信號(hào)通路在哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育期以及出生后肌肉的生長(zhǎng)發(fā)育過程中具有重要的調(diào)節(jié)作用。MSTN主要通過和其受體ActRIIB結(jié)合,激活Smad2、Smad3蛋白后,結(jié)合Smad4形成異源復(fù)合物,進(jìn)入細(xì)胞核作用于靶基因MyoD,從而抑制肌肉的生長(zhǎng)發(fā)育；FST是MSTN的拮抗劑,通過結(jié)合MSTN解除其抑制肌肉生長(zhǎng)發(fā)育的功能。本試驗(yàn)以大白豬和馬身豬為研究對(duì)象,采用qRT-PCR技術(shù),檢測(cè)了背最長(zhǎng)肌組織中FST、MSTN、ActⅡB、Smad2、Smad3、 Smad4基因在mRNA水平的發(fā)育性表達(dá),探討相關(guān)基因在同一品種的相關(guān)性;并采用Western-blot技術(shù)檢測(cè)了FST,Smad2基因在蛋白水平的發(fā)育性表達(dá)(所選的生長(zhǎng)點(diǎn)為出生后1、30、60、90、120、150、180日齡)。具體結(jié)果如下：(1)兩豬種中,FST、MSTN、ActRⅡB基因在mRNA水平呈現(xiàn)出不同的發(fā)育性表達(dá)趨勢(shì)。FST、MSTN基因均在大白豬90日齡時(shí)表達(dá)量最高,而馬身豬在150日齡時(shí)表達(dá)量最高；馬身豬中ActRⅡB基因mRNA的表達(dá)量在90日齡時(shí)極顯著高于...

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 肌肉的生長(zhǎng)發(fā)育
        1.1 肌肉生長(zhǎng)發(fā)育過程
        1.2 肌纖維結(jié)構(gòu)和類型
    2 肌肉生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)調(diào)控因子
        2.1 Pax家族
            2.1.1 Pax家族簡(jiǎn)介
            2.1.2 Pax家族功能
        2.2 生肌調(diào)節(jié)因子
            2.2.1 MRFs家族簡(jiǎn)介
            2.2.2 MRFs功能
        2.3 肌細(xì)胞特異性增強(qiáng)因子2家族
            2.3.1 MEF2家族簡(jiǎn)介
            2.3.2 MEF2家族的功能
    3 骨骼肌發(fā)育相關(guān)的信號(hào)通路
        3.1 Wntβ-catenin信號(hào)通路
        3.2 Notch信號(hào)通路
        3.3 MAPK信號(hào)通路
        3.4 TGF-β信號(hào)通路
            3.4.1 肌肉生長(zhǎng)抑制素
            3.4.2 卵泡抑素
            3.4.3 Smad蛋白家族
            3.4.4 激活素IIB型受體
    4 馬身豬的研究概況
    5 本研究的目的和意義
第二章 MSTN/Smad信號(hào)通路關(guān)鍵基因在豬背最長(zhǎng)肌中mRNA發(fā)育性表達(dá)檢測(cè)
    1 材料和方法
        1.1 試驗(yàn)材料
        1.2 試驗(yàn)試劑和儀器
            1.2.1 試驗(yàn)的主要儀器
            1.2.2 試劑與耗材
        1.3 試驗(yàn)方法
            1.3.1 引物設(shè)計(jì)與合成
            1.3.2 樣品總RNA的提取
            1.3.3 RNA濃度與純度的檢測(cè)
            1.3.4 cDNA的合成
            1.3.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)體系及反應(yīng)條件的優(yōu)化
            1.3.6 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
            1.3.7 熒光定量PCR反應(yīng)
        1.4 數(shù)據(jù)處理與分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 總RNA的提取結(jié)果
        2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作與分析
        2.3 qRT-PCR的擴(kuò)增曲線和熔解曲線
        2.4 馬身豬和大白豬背最長(zhǎng)肌FST基因的發(fā)育性表達(dá)
        2.5 馬身豬和大白豬背最長(zhǎng)肌MSTN基因的發(fā)育性表達(dá)
        2.6 馬身豬和大白豬背最長(zhǎng)肌ActRIIB基因的發(fā)育性表達(dá)
        2.7 馬身豬和大白豬背最長(zhǎng)肌Smad2、Smad3和Smad4基因的發(fā)育性表達(dá)
        2.8 背最長(zhǎng)肌中FST與MSTN基因、MSTN與ActRIIB基因的相關(guān)性分析
        2.9 背最長(zhǎng)肌中Smad2和Smad3發(fā)育性表達(dá)變化的相關(guān)性
    3 討論
        3.1 關(guān)于FST、MSTN、ActRIIB基因表達(dá)趨勢(shì)變化的分析
        3.2 Smad2、Smad3、Smad4基因在大白豬和馬身豬背最長(zhǎng)肌中的發(fā)育性表達(dá)研究
第三章 FST和Smad2蛋白在大白豬、馬身豬背最長(zhǎng)肌中的發(fā)育性表達(dá)
    1 材料和方法
        1.1 試驗(yàn)材料
        1.2 主要儀器和試劑
            1.2.1 主要儀器
            1.2.2 主要試劑
            1.2.3 所需溶液及配制過程
        1.3 試驗(yàn)方法
            1.3.1 蛋白的提取
            1.3.2 蛋白質(zhì)濃度的測(cè)定
            1.3.3 Western-blot技術(shù)
        1.4 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 FST蛋白在大白豬和馬身豬背最長(zhǎng)肌中的發(fā)育性表達(dá)
        2.2 Smad2蛋白在大白豬和馬身豬背最長(zhǎng)肌中的發(fā)育性表達(dá)
    3 討論
        3.1 關(guān)于FST蛋白在背最長(zhǎng)肌中的發(fā)育性表達(dá)分析
        3.2 關(guān)于Smad2蛋白在背最長(zhǎng)肌中的發(fā)育性表達(dá)分析
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
Abstract
致謝



本文編號(hào)：3774306